灵芝营养液的发酵法制备及分析

对灵芝营养液的制备条件进行了探讨。研究表明,筛选所获灵芝菌株在（２９±１）℃,ｐＨ４．０～５．０的适宜条件下,经９６ｈ深层通气培养可获得菌丝体鲜重＞３５０ｇ／Ｌ的发酵醪液。该研究采用的培养基适用性广,发酵醪液即可应用于营养液的制备。细胞破壁处理可有效地提高提取液中多糖及氨基酸的质量浓度,经低温浓缩后的灵芝营养液氨基酸构成全面,其质量浓度为１１．１２ｇ／Ｌ,氨基酸中必需氨基酸的质量分数为３２％;多糖的质量浓度为１２ｇ／Ｌ;还测得有核苷类、甾醇类物质。该营养液外观黑红色、不透明,重金属、大肠杆菌及其它致病菌等理化卫生指标符合国家有关规定。急性毒性实验表明受试物安全无毒（ＬＤ５０＞２１．５ｇ／ｋｇ）。经小鼠游泳耗竭实验证明灵芝营养液具有抗疲劳作用。     

平盖灵芝中锌锰铜铁含量分析

采用火焰原子吸收分光光度法测定了辽宁产平盖灵芝（本品）中Ｚｎ,Ｍｎ,Ｃｕ,Ｆｅ的含量。结果表明,本品中含有丰富的Ｚｎ,Ｍｎ,Ｃｕ,Ｆｅ,且含量均比黑龙江所产品种高。为探讨不同产地,同一品种药材间微量元素差异及药效与微量元素之间关系提供了参考数据。     

灵芝属真菌乙醇提取物抑瘤活性比较和机制探析

以人急性早幼粒白血病细胞HL-60细胞株作为模型,比较了灵芝属(Ganoderma)5 个不同种(赤芝G.lucidum,松山树芝G.tsugae,G.oerstedii,无柄灵芝G.resinaceum,G. aubamboinense)的液体培养茵丝体体外抗肿瘤活性,并初步探讨了抑瘤机制.结果显示:5个灵芝菌种的乙醇提取物对HL-60细胞均有抑制作用,其中以赤芝(G.lucidum)的抑瘤率最高(91.4±0.9%);作用48 h后,均在不同程度上诱导HL-60细胞发生早期凋亡.研究表明灵芝属的真菌除赤芝外,其他种类的发酵茵丝体醇提物也具有抑制HL-60肿瘤细胞生长的作用,抑瘤机制与诱导凋亡有关.     

灵芝良种选育Ⅰ：影响灵芝原生质体形成的因素

对灵芝的原生质体形成条件进行了研究。结果表明,合适的在生质体形成条件为酶组成蜗牛酶４ｇ／Ｌ,溶壁酶５ｇ／Ｌ;ｐＨ７．１７的磷酸缓冲液;酶解温度３０℃;酶解时间４ｈ;菌龄７２ｈ;稳定剂０．６ｍｏｌ／Ｌ的ＫＣｌ。原生质体最高产量为５．２×１０＾６个（ｇ·Ｌ＾－１）。灵芝菌丝释放原生质有顶端的边上二种方式。     

超临界流体萃取-高效液相色谱离线联用分析灵芝中三萜类化合物

在系统考察压力、温度和时间对萃取率影响的基础上,利用超临界流体萃取技术提取了灵芝子实体中的三萜类化合物。其最佳萃取条件为:压力15 MPa,温度35℃,动态萃取时间120 m in,CO2流量1 mL/m in,背压阀温度50℃。此外,还建立了高效液相色谱梯度洗脱分离三萜类化合物的方法。通过比较超临界流体提取物和甲醇提取物的色谱图,发现两者具有相似的峰形,说明超临界流体能够达到与甲醇相近的萃取效果,可以取代甲醇作为新一代的绿色萃取溶剂。     

灵芝野微粉的激光粒度测定法研究

灵芝的颗粒度对其药理作用有显著的影响．本文采用激光粒度法测定了灵芝野微粉的粒度．研究了分散别种类、分散剂用量、超声时间和测定温度对灵芝野微粉粒度测定的影响,得出最佳测定条件为：添加的分散剂为吐温-80：分散剂用量为1．0％：超声时间为≥6min;测定室温为5°C-35°C．     

灵芝漆酶的分离纯化及其部分酶学性质研究

将灵芝（Ganoderma lucidum）漆酶经过Sephadex G-75和DEAE-Sepharose Fast Flow两步纯化,获得具有3个同工酶的组分,并且纯度提高了81倍,酶活回收率高达83.9%。以ABTS为底物,漆酶最适pH值是2.2～2.6,在pH值4.6～7.8范围内稳定;最适温度45℃,在低于45℃时较稳定。大部分金属离子、酸根离子对灵芝漆酶普遍有抑制作用,除盐可以提高漆酶活力。     

灵芝发酵液中蛋白酶抑制剂GLPIA2的纯化及其特性

采用乙醇分级沉淀、凝胶色谱纯化、阴离子交换色谱分离等步骤从灵芝深层发酵液中提取得到蛋白酶抑制剂GLPIA1 与GLPIA2。其中GLPIA2仅在215 nm处有紫外吸收,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一条带,相对分子质 量为15000。由其氨基酸组成分析谱图可看出,其酸性氨基酸含量较高,碱性氨基酸及芳香族氨基酸含量较低。GLPIA2抑 制剂的底物特异性研究表明,它对天冬氨酸族的胃蛋白酶和酵母蛋白酶A有相对较强的抑制作用。     

运用色谱指纹图谱与化学计量学方法对灵芝进行分类

采用95%乙醇为提取溶剂,运用高效液相色谱(HPLC)指纹图谱技术与化学计量学方法,对11个不同灵芝菌株子实体进行分类。通过相似度分析分别获得提取样品指纹图谱的13个共有峰及每个样品之间的相似度;以相对共有峰面积为分析参数,运用化学计量学方法包括聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)及判别分析(DA)对其进行分类,结果分为紫芝、赤芝和美国大灵芝3类。实验结果表明,用化学计量学的方法对灵芝样品的指纹图谱数据进行分析,是一种可用于其分类的科学方法。     

超滤浓缩担子菌发酵液聚合物的研究

利用中空纤维超滤器对灵芝发酵液中聚合物的浓缩进行了较系统的研究,并推导出该超滤器放大的适宜计算公式．结果表明：截留分子量１００００ｄ的聚砜不对称膜是适于超滤浓缩灵芝发酵液的超滤膜．适宜的超滤条件为操作压力０．２ＭＰａ,料液温度２０～３０℃,循环速度０．２２ｍ／ｓ;在此条件下超滤２００ｍｉｎ,通量及截留率分别稳定在９．１Ｌ／（ｍ２ｈ）和９６％左右,发酵液聚合物浓缩５倍以上,其收率达９２．６％．