全二维液相色谱的初步构建及其在山羊血清分离中的应用

以GFC/RP模式构建全二维液相色谱系统,第一维凝胶过滤色谱柱使用ShodexProteinKW 802. 5(300mm×8mmi.d. ),以0. 2mol/LNaH2PO4 (pH7. 0)的流动相在0. 15mL/min的流速下等度洗脱,第二维反相色谱柱使用HypersilBDSC18 (35mm×4. 6mmi.d. ),在3mL/min的流速下梯度洗脱。采用平行柱交替分析的形式作切换接口, 2. 5min切换一次,两个反相柱交替富集、分析第一维洗脱产物。以5个标准蛋白混合物的分离评价该系统,在单独一维模式中不能分离的样品在全二维液相色谱中得到了较好的分离,二维系统的总峰容量为225。与一维色谱相比,系统的总峰容量、分辨率得到较大提高。并用于山羊血清的纯化分析,对一维分离中的重合谱峰进行验证,对制备纯化有一定的实际意义。     

川渝黔地区山羊起源于A和B两母系遗传谱系

本研究旨在从DNA水平揭示四川、重庆和贵州地区山羊的母系起源和群体遗传特征.通过对川渝黔地区13个山羊品种(类群)共152个体或序列mtDNA D-loop高变区HVI片段(481 bp)变异的分析,结合13个山羊参考序列(分属于A、B、C、D、F和G单倍群)构建系统进化树和单倍型网络分析以及不同单倍群群体扩张分析,结果表明:152只山羊mtDNA DloopHVI序列被类聚为A和B两个单倍群,其中单倍群B又分化为B1和B2两亚单倍群.从2种单倍群的地理分布特征可以发现,北川白山羊和阿坝藏山羊全部属于单倍群A,而其他山羊品种中单倍群A和B具有不同的分布频率.归并于A和B两个谱系的山羊并没有历经种群扩张.结果提示,川渝黔地区山羊可能起源于A和B两母系遗传谱系,而谱系B虽然分化为B1和B2两支系,但均未历经种群扩张.     

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在羊奶中的发酵特性研究

对从商业乳酸菌发酵剂分离纯化的8株乳酸菌在羊奶中的发酵特性进行了研究,结果表明:L.b-300和L.b-800菌株的产酸能力较强,S.t-499菌株的产黏能力较强,L.b-300和S.t-800菌株的产香能力较强,8株乳酸菌的后酸化能力均较弱.L.b-300和S.t-499菌株是适合发酵羊奶酸奶的乳酸菌.     

波尔山羊和成都麻羊乳的生化遗传性质研究

对波尔山羊和成都麻羊泌乳中期乳的常规营养成分含量、４种酶的活力、乳蛋白组成及乳蛋白遗传多态性进行了比较研究．结果显示,波尔山羊和成都麻羊乳蛋白含量分别为４５．９６±２．４１和４４．２２±３．４５ｇ／Ｌ,乳脂含量分别为６２．１１±４．１３和５８．８６±２．３３ｇ／Ｌ,乳糖含量分别为４６．４０±３．２５和４６．６７±３．４８ｇ／Ｌ;成都麻羊脱脂乳中γ－ＧＴ、Ａｋｐ、Ｌｐ的活力和比活力均极显著高于波尔山羊,ＮＡＧａＳｅ的活力和比活力显著高于波尔山羊;乳蛋白组分的相对含量,除波尔山羊β－Ｌｇ显著高于成都麻羊外,其余各指标含量相近;乳αｓ１－ＣＮ在成都麻羊中全部为高含量型,而在波尔山羊中,有９０％的个体为低含量型,仅１０％的个体为高含量型,反映了种间差异．结果为波尔山羊和成都麻羊的种质特性、乳的生化遗传性质和乳的比较生化研究提供了资料,并在指导羔羊的饲养中有一定的应用价值     

青海本地山羊血清运铁蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法对298只青海本地山羊的血清运铁蛋白多态性进行了研究。结果发现：被检山羊有，IFAA、TFAB、邢B三种基因型，以TFAA为优势基因型(74．5％)；TF^A和TF^B等位基因频率分别为0．8624和0．1376，基因杂合度和有效等位基因数分别为0．2373和1．3111；经遗传距离分析，青海本地山羊与四川藏山羊有较近的亲缘关系。     

三个山羊品种(类群)的RAPD分析

采用RAPD方法分析了藏山羊、安哥拉山羊、建昌黑山羊的巴普类群，得到清晰且多态性丰富的条带，其扩增条带总数共40条，其中22条有多态，多态频率为55．0％．对3个山羊品种(类群)的基因组DNA进行多态性和亲缘关系研究，结果表明：3个山羊品种(类群)间的多态性大于品种(类群)内的多态性，藏山羊与安哥拉山羊之间亲缘关系较近，巴普类群与安哥拉山羊之间亲缘关系较远．     

成都麻羊与四川9个黑山羊品种(群体)乳的生化组成及酪蛋白多态性研究

采用常规方法测定成都麻羊和四川9个黑山羊品种(群体)乳常规营养成分含量;以垂直板电泳经考马斯亮蓝染色分析乳蛋白组成;用碱性尿素电泳法分析酪蛋白多态性.结果表明,成都麻羊乳常规营养成分含量(g/L):乳蛋白为45.77±2.24、乳糖为44.00±3.20、乳脂肪为59.50±3.30.成都麻羊和四川9个黑山羊品种(群体)乳蛋白含量(g/L)范围为41.36～46.37,以营山黑山羊最低(41.36),金堂黑山羊最高(46.37),差异极显著(P<0.01);乳糖含量(g/L)范围为44.00～47.30,以成都麻羊最低(44.00),金堂黑山羊最高(47.30),差异极显著(P<0.01);乳脂含量(g/L)范围为55.45～60.52,以白玉黑山羊最低(55.45),自贡黑山羊最高(60.52),差异极显著(P<0.01).成都麻羊乳蛋白组分含量(%):α-La为5.80±0.61,β-Lg为14.77±0.26,CN为70.04±2.55,IgG为7.31±0.83,SA为2.08±0.23.成都麻羊与四川9个黑山羊品种(群体)乳蛋白组分含量(%)范围:α-La为5.35～5.96,β-Lg为14.46～15.87,CN为68.42～71.01,IgG为7.04～7.34,SA为2.02～2.40.在供试山羊品种(群体)中β-CN呈单态,带型为β-CN(AB);α-CN均呈现:αS1-CN(H),αS1-CN(L)、αS2-CN(CC)和αS2-CN(CD),在建昌黑山羊和白玉黑山羊中,还存在αS2-CN(DD).对αS2-CN遗传多态型与乳常规营养成分含量进行多重比较发现,在建昌黑山羊和白玉黑山羊中,αS2-CN(CC)型和αS2-CN(CD)型乳脂含量显著高于αS2-CN(DD)型的乳脂含量(P<0.05).     

雷州母山羊生长曲线及体重校正系数研制方法的探讨

本文探讨了雷州母山羊的生长曲线及其体重校正系数的研制方法.结果表明:用4次多项式方程所绘制的雷州母山羊生长曲线和估测的体重校正系数最理想.     

High expression of human serum albumin in milk of trans- genie mice directed by the goat p-casein gene promoter region

We have constructed a mammary gland expression vector that contained the goat β-casein gene pro-moter, 5'upstream regulatory region, exons 1, 2, intron 1 as well as the human serum albumin (hALB) mini-gene (including the full-long sequences of hALB cDNA and its intron 1). Injection of the vector into mouse tail veins showed that the recombinant construct was expressed only in mammary glands. The vector was microinjected into the mouse fertilized eggs, followed by transferring the eggs into the foster mice. 33 F0 mice were obtained. Of the 33, 8 mice (5 , 3 ) were transgenic with hALB gene integration identified by PCR as well as Southern blot hybridization. The integration rate was 24.2% (8/33). Western blot analysis showed that 3 female transgenic mice had hALB expression in their milk. The hALB contents in milk reached 3.54, 0.21 and 3.03 g/L, respectively.     

金堂黑山羊血液蛋白遗传多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）研究了金堂黑山羊血液运铁蛋白（Tf)、后白蛋白(Pa）及白蛋白(Alb)三个基因座的遗传多态性,并计算了金堂黑山羊与成都麻羊、湘东黑山羊等七个山羊群体的欧氏遗传距离。结果表明：金堂黑山羊群体中Tf和Pa两个基因座均表现出多态性、Alb基因座呈单态;Tf和Pa两个基因型分布均符合Hardy-weinberg定律;金堂黑山羊群体内的基因一致度高、基因多样度低、平均等位基因有效数少,是宝贵的山羊遗传资源。