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鲢(Hypophthalmichthys molitrix)IL-10基因的克隆及表达分析 总被引:1,自引:0,他引:1
白细胞介素10(IL-10)是一种作用广泛的抗炎细胞因子,主要功能是限制和最终终止炎症反应. 用RACE (rapid amplification of cDNA ends)-PCR方法扩增出鲢白细胞介素10(IL-10)的cDNA,其全长为1248nt,包含5′非编码区156nt,3′非编码区552nt,开放阅读框540nt.鲢IL-10的开放阅读框编码179个氨基酸,其中包含构成两对二硫键的4个保守半胱氨酸.RT-PCR结果显示鲢IL-10mRNA主要在脾脏、鳃、头肾和肌肉中表达.将鲢IL-10完整开放阅读框克隆到原核融合表达载体pET-32a-c(+)上,转入大肠杆菌Rosetta-gami(DE3) 内进行表达,经SDS-PAGE电泳后显示重组融合蛋白在分子量约39ku处有明显表达带,与预期分子量大小一致,且主要以不可溶的包涵体形式存在.变性条件下利用His·Bind树脂成功纯化了融合蛋白,将其免疫家兔,获得兔多克隆抗鲢IL-10抗体,Western blot检测到兔多克隆抗鲢IL-10抗体可有效地与重组蛋白结合.这些结果为进一步研究IL-10的功能奠定了基础. 相似文献
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在不同水硬度下铜对草鱼、鲢和大鳞泥鳅的急性毒性 总被引:6,自引:1,他引:5
实验以草鱼、鲢和大鳞泥鳅的鱼苗为材料,测定了水硬度对铜的急性毒性的影响,水硬度在255、141、37和14mg/L(以 CaCO_3计)时铜对草鱼的48小时 LC_(50)分别是519、354、91和76μg/L,96小时 LC_(50)则分别为460、307、67和39μg/L.在同样的硬度条件下,对鲢的48小时 LC_(50)是452、393、71和40μg/L,96小时 LC_(50)分别为452、296、41和31μg/L.大鲢泥鳅鱼苗在硬度260、137、36和10μg/L(以 CaCO_3计)条件下,铜的48小时 LC_(50)为369、305、1113和67μg/L,而96小时 LC_(50)则分别是226、135、67和18μg/L.铜的急性毒性和水硬度之间的关系可用下列方程来描述:草鱼 ln96小时■_(50)=1.1345+0.9051ln 硬度 r=0.99ln96小时■_(50)=2.2118+0.7220ln 硬度 r=0.97鲢 ln96小时■_(50)=0.4564+1.0207ln 硬度 r=0.97ln96小时■_(50)=1.1371+0.9232ln 硬度 r=0.98大鳞泥鳅ln96小时■_(50)=1.2823+0.7506ln 硬度 r=0.99ln96小时■_(50)=2.8635+0.5563ln 硬度 r=0.99 相似文献
3.
以夏季和冬季鲢为研究对象,利用胰凝乳蛋白酶能水解羧基端含芳香族氨基酸残基肽键的特性,根据其特异性酶切部位,结合电泳手段来分析肌球蛋白的内部构造差异性。结果表明,与夏季样品相比,冬季鲢的肌原纤维蛋白经酶切生成的肌球蛋白头部S-1较长,在高温下分子量为165 ku的重酶解肌球蛋白HMM容易被再降解成小片段的135 ku HMM,呈现出冬季肌球蛋白的结构不稳定性。在不同温度下加热夏季和冬季肌球蛋白,其ATPase失活速度和酶解肌球蛋白生成S-1的产生量的减少速度呈现一致性,说明酶解生成的S-1只来源于有活性的肌球蛋白。同时,冬季肌球蛋白热变性温度较夏季肌球蛋白要低6 ℃,表明冬季肌球蛋白的不稳定性。 相似文献
4.
采用蒸煮法、脂肪酶法、乙醚法对鲢肉进行脱脂.并比较不同酶制剂对脱脂鲢肉的水解效果.试验结果表明。脂肪酶法的脱脂效果最好,其脱脂率为98.11%.根据水解度及感官品尝指标,从5种酶中优选出复合蛋白酶为脱脂鱼肉的最佳水解酶.并通过正交实验确定该酶的最佳水解工艺条件:pH6.5,温度55℃,酶最3000U/g.蛋白质,底物浓度(鱼肉:水)1:3. 相似文献
5.
本文报道了由鲢碘泡虫Myxobolus drjagini Achermov寄生而引起的白鲢疯狂病鱼的肝,脾、肠和胃的组织病理变化。主要表现为:肝细胞颗粒性变化,萎缩,细胞核固缩,细胞界线不清。脾组织中白细胞增加。肠组织部分绒毛萎缩,肌纤维变性。肾脏水肿,肾小球严重病变,肾小管脂肪性颗粒沉积,细胞之间连接疏松。 相似文献
6.
鲢鱼鳃的扫描电镜研究 总被引:6,自引:0,他引:6
用扫描电镜观察了鲢(Hypophthalmichihysmolitrix)的鳃弓、鳃耙、鳃丝及鳃小片的表面结构,整个鳃上遍布微嵴,但不同区域的微嵴形态有差异:如排列方式、密集程度、宽度和长度等。另外,不同部位存在着不同功能的细胞群。味蕾存在于鳃耙的游离末端;粘液细胞几乎遍及整个鳃表面;鳃丝表面有少量氯细胞。 相似文献
7.
快速建立鲢、鳙纯系的初步研究 总被引:9,自引:0,他引:9
运用随机扩增多态性DNA(RAPD)方法对雌核发育和人工转性鲢、鳙进行了遗传多样性的研究,并用长江天然鲢、鳙群体作为对照分析.在雌核发育鲢中,共得到187条带,其中19条为多态带,占10.16%,而对照组鲢共扩增205条带,有32个多态座位,占总带数的15.61%.在雌核发育鳙中共产生232条带,其中11条为多态带,比例为4.74%,而在对照组中共产生241条带,25条为多态带,比例为10.37%.遗传距离分析表明,雌核发育鲢和鳙的平均值分别为0.102和0.023,而对照组鲢和鳙遗传距离平均值分别为0.161和0.104,均高于雌核发育组.从聚类分析UPGMA树可以十分明显找到了遗传配型相似、可以作为纯系繁殖的生理雄性个体及其同胞姐妹雌核发育雌鱼,由此提出了快速建立鱼类纯系的新操作途径. 相似文献
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1986年6月~1988年2月,作者选择PH A作为增强白继鱼苗免疫机能的基本浸泡药 剂,对控制鳞碘泡虫进行了实验研究.结果显示,在PH A中加入白继疯狂病鱼的脑浸液,疫苗和山芡若碱浸泡鱼苗,未见比单纯的PH A有更好的抑制效果.实验证明,用SPPm 的PH A液浸泡s小时是较佳的处理组合,该组合与对照有极显著的差异,不仅能明显减· 少营养体的数rti }i,而且能有效地阻止泡子的形成,故具有免疫刺激的治疗价值.作者改进·}了碘抱虫的采样和计数的方法,克服了以往存在的缺点.对于阻止抱子形成的机理,亦弓作子初步探讨. 相似文献
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雌核发育鲢各系及与普通鲢生长的比较研究 总被引:6,自引:0,他引:6
在相同池塘养殖条件下,迸行了雌核发育鲢各系(当年鱼)及与普通鲢的生长对比试验。结果表明:所选育的雌核发育鲢1系、2系间无显著差异,杂交系较1系、2系呈一般显著性差异(P<0.05);雌核发育鲢较普通鲢生长快,平均体长增长快7%以上,体重增长快14%以上,呈显著差异(P<0.01);其中雌核发育鲢杂交生长最快,其体重增长比普通鲢快23.8%,体长增长比普通鲢快12.4%,呈非常显著差异(P<0.005)。密度越稀,增长越快,雌核发育鲢各系成活率(83.4%以上)均高于普通鲢(64.8%),且雌核鲢体型较普通鲢肥厚。 相似文献