灰黄霉素高产变株与出发菌株18S rRNA基因序列的比较分析

根据真菌18S rDNA的保守序列设计引物,对灰黄霉素高产突变菌Penicillium griseofulvum F208与出发菌株Penicillium griseofulvum 3.5190的18S rRNA进行克隆测序及对比分析,并登录GenBank(序列号为EF608151和EF607282).依据18S rDNA建立的系统进化树表明突变株F208与出发菌株3.5190的遗传距离较远,而与Penicillium urticae亲缘关系最近.出发菌株3.5190与Penicillium commune亲缘关系最近.18SrDNA作为分子标记可有效地鉴别灰黄霉素产生菌(Penicillium griseofulvum)高产与低产菌株.     

纤维素分解菌——青霉和放线菌的分离选育研究

在平凉县的一蘑菇房里采集了用来种植蘑菇的潮湿木屑粉.用纤维素刚果红鉴别培养基初筛,根据水解圈与菌落直径之比大小和水解圈清晰度分离筛选出较多的产纤维素酶菌株,进一步通过测纤维素酶活力复筛,最终筛选出滤纸酶活力和羧甲基纤维素酶活力同时都较高的菌株2株,分别是27-3F (FPA:199.12U,CMCase activity:1181U)和27-1A(FPA:110.54U,CMCase activity:908.2U).经形态学鉴定菌株27-3F是青霉。菌株27-1A是为放线菌的链霉菌属.     

过表达veA对橘青霉美伐他汀生物合成的影响

在丝状真菌中,全局性调控因子VeA广泛存在并高度保守,调节多个次级代谢基因簇和生长发育.在橘青霉中克隆veA的基础上,通过农杆菌介导的转化获得了OE∷veA菌株.结果显示:veA过表达后,分生孢子产量下降61%,美伐他汀产量提高3倍.光照能促进橘青霉中veA的表达从而抑制橘青霉生长发育.这些结果提示在橘青霉中veA和孢子形成、美伐他汀合成密切相关.     

蝙蝠蛾拟青霉质量标准及免疫活性研究

目的:建立蝙蝠蛾拟青霉菌100 L发酵菌丝体质量标准,并验证其安全性和免疫调节活性.方法:采用高效液相色谱等方法,在测定菌丝体产量和腺苷含量的基础上,测定其水分、一般杂质、酸不溶性杂质和重金属含量.此外,进行了小鼠免疫增强实验.结果:菌丝体产量不少于20.80 g/L,菌丝体中腺苷含量不少于0.27%,水分含量不超过6.71%,总灰分含量不超过1.26%,酸不溶性灰分含量不超过0.15%,重金属含量少于国家标准计入质量标准正文.小鼠免疫增强实验显示,发酵菌丝体显著提高小鼠迟发型超敏反应,并对IL-10、IL-12、IL-12R、IFN-α等炎症相关因子水平具有上调作用.结论:初步建立了蝙蝠蛾拟青霉菌100 L发酵菌丝体质量标准,并证实其在小白鼠体内的安全性和免疫调节活性.     

基质pH值对青霉发生的影响

基质ｐＨ 值对肯霉（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）的发生有明显的影响，结果表明：在ｐＨ６．２～７．５的条件下，对青霉菌丝的生长及孢子的形成最为有利；但当ｐＨ超过９．５或低于４时，青霉菌丝的生长受到抑制．     

舒巴坦前体溴代青霉烷酸的工艺研究

以β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦的传统合成工艺为基础，以6-APA为原料，在氢溴酸和亚硝酸钠作用下，合成舒巴坦的前体溴代青霉烷酸，确定了最佳合成工艺．通过一系列实验，可以得出6-APA、氢溴酸、溴素、亚硝酸钠的最佳配比为1：13：4：1（物质的量比），反应温度在0℃以下，反应时间达4h以上时，产品收率可达92％，并用红外光谱对产品结构进行初步表征。     

2β-氯甲基青霉烷酸二苯甲酯合成方法的改进

6,6-二氢青霉烷酸二苯甲酯1β-氧化物同2-巯基苯并噻唑反应后,与硫酰氯作用得2β-氯甲基青霉烷酸二苯甲酯.     

高效毛细管电泳法检测牛奶中的青霉素中间体以及3种青霉素类药物

建立了高效毛细管电泳(HPCE)同时检测牛奶中青霉素类抗生素中间体6-氨基青霉烷酸(6-APA)以及3种青霉素类药物青霉素钾(PEN)、氨苄青霉素(AMP)和阿莫西林(AMO)的方法。利用正交实验设计,对HPCE中的缓冲液离子浓度和pH值、分离电压、分离温度等分离条件进行了优化。结果表明: 在采用40 mmol/L磷酸二氢钾-20 mmol/L硼砂缓冲体系(pH 7.8)、分离电压为28 kV、分离温度为30 ℃的电泳条件下,4.5 min内可以实现上述4种青霉素类药物的快速分离检测。各组分在1.56～100 mg/L范围内有良好的线性,相关系数(r2)为0.9979～0.9998,加标回收率为84.91%～96.72%,相对标准偏差(RSDs)为1.11%～9.11% (n=6)。该方法简便、快速,可以应用于市售牛奶中4种青霉素类药物的快速检测。     

简青霉对酚类和苯胺类污染物的降解研究

在培养4 d的简青霉培养体系中,分别加入不同浓度的酚类和苯胺类物质,观察这些有毒物质对简青霉生长的影响,并研究简青霉对这几种有毒物质的降解效果.结果表明:低浓度的酚类和苯胺类物质能促进简青霉的生长,高浓度的这些物质则对简青霉的生长有一定的抑制作用.同时简青霉能够很好地催化氧化苯酚,2,4-二氯苯酚和苯胺.当苯酚质量浓度...     

从桔青霉M71生产核酸酶P_1及酶活提高途径的研究

由桔青霉Ｍ７１在２８±１℃下用深层通气搅拌发酵产生的核酸酶Ｐ１能降解热变性ＤＮＡ和酵母ＲＮＡ成为５＇－脱氧核苷酸和５－核苷酸。培养过程中酶活力高峰期在７０－９５ｈ之间，该酶对热变性ＤＮＡ和酵母ＲＮＡ的活力分别高达１５５ｕｎｉｔ／ｍｌ和３６９ｕｎｉｔ／ｍｌ，其最适作用温度为７５℃，最适ｐＨ值为５．０，在７０℃以下１ｈ之内稳定。发酵过程中控制接种量、氧气供应量、ｐＨ值及添加适量的Ｚｎ２＋，Ｆｅ２＋，Ｓｎ２＋，ＳＬ－Ｃｙｓｔｅｉｎｅ，Ｔｗｅｅｎ８０，泡敌等能促使酶活性大幅度增加