6-氨基青霉烷酸在弱碱性阴离子树脂上的吸附研究

用静态法研究6-氨基青霉烷酸(6-APA)在弱碱性阴离子交换树脂D301和330上的吸附行为．在溶液pH为8．0,6-APA起始浓度介于1．5至20mg／mL条件下，测定25℃时D301树脂和330树脂的静态交换动力学曲线、吸附等温线．并求算D301树脂和330树脂的吸附等温线方程．分别用Langmuir型和Freundlich型方程对D301树脂和330树脂吸附等温线进行线性回归拟和，结果表明，6-APA在D301树脂和330树脂上的吸附更符合Langmuir型吸附．     

灰绿拟青霉U—2代谢物A组分对萝卜蚜五种酶的影响

为探讨灰绿拟青霉Ｕ－２代谢物Ａ组分杀蚜的机理,本文以萝卜蚜为试虫测定了Ａ组分对蚜体内五种酶的影响。结果显示,Ａ组分处理导致酯酶总活力,ＰＯＸ活力降低,ＳＯＤ活力有所提高,而对ＡＣｈＥ和ＣＡＴ的活力影响不明显。     

产转糖基β-半乳糖苷酶菌株F3的鉴定、产酶条件及转糖基活性研究

菌株乃从土壤中筛选得到,具有产生转糖基β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）的特性。根据形态观察及18S rDNA序列分析;菌株乃被鉴定为扩张青霉（Penicillumexpansum）。通过单因子试验和正交试验,对菌株乃产生转糖基阻半乳糖苷酶的培养基组成及发酵条件进行了优化。优化后的培养基组成为葡萄糖2％、酵母粉1％、蛋白胨1．5％、氯化钠0．3％。在初始pH6．0,28℃培养40h时,其产酶量为2245．2U／L,比优化前提高约3倍。菌株乃产生的转糖基肛半乳糖苷酶以pH4．5缓冲液配制的30％乳糖为底物,50℃反应24h,低聚半乳糖产量为30．6％,其中80％以上为三糖。     

青霉葡萄糖氧化酶的分离纯化及性质研究

从青霉(Penicillium amagasakiense)发酵液中分离纯化葡萄糖氧化酶(简称GOD),通过DEAE-32离子交换柱层析、Sephacryl S-200分子筛凝胶过滤柱层析纯化,获得比活力为472 U/mg电泳单一纯酶制剂,采用SDS-PAGE电泳,表明该酶含有两个同型的亚基,分子量为150 ku.酶学性质研究表明:该酶催化葡萄糖氧化酶反应的最适pH为5.6,最适温度为40℃.酶的热稳定性研究表明:该酶在pH 5.5～8.5区间和温度低于50℃下稳定.金属离子对酶活力的影响表明:Na+、K+、Ca2+、Pb2+、Mn2+等对酶活力基本没有影响;Al3+、Zn2+对酶有一定的激活作用;Ag+、Hg2+、Mg2+、Cd2+、Cu2+、Co2+等对该酶活力有不同程度的抑制作用.该酶以葡萄糖为底物的米氏常数Km值为122.6 mmol/L,Vm为25.52 μmol/(L·min)(pH 7.0,37℃).     

聚β-羟基丁酸酯解聚酶的分离纯化及性质研究

研究了青霉Penicillium sp.DS9713a产聚β-羟基丁酸酯(PHB)解聚酶的情况,并通过超滤浓缩、硫酸铵分级沉淀及Sepharose CL-6B凝胶色谱对PHB解聚酶进行了分离纯化,获得了解聚酶的纯酶组分,纯化倍数为59.1,回收率为20%。经检测该酶的分子量约为18000Da,等电点为7.6,化学试剂EDTA、SDS及巯基乙醇对酶活均有较强的抑制作用,而H2O2和尿素对酶活的抑制不明显;同时,对该纯酶组分的蛋白性质进行了测定,结果显示该酶天冬氨酸和谷氨酸含量较高,推测与底物结合作用相关,二级结构以α螺旋为主,不含β折叠;降解产物的质谱分析显示,该酶的作用产物为3HB单体,暗示其以外切模式对PHB进行降解。     

淡紫拟青霉IPC土壤抑菌作用影响因子分析

 用土壤平板法测定了云南省24个县代表性植烟土壤对根结线虫生防菌淡紫拟青霉IPC菌株平板培养孢子和液体培养孢子的孢子萌发率的影响,结果不同土样普遍存在抑菌作用,且土样间存在差异,液体培养孢子萌发率高于平板培养孢子萌发率.通过对7种抗生素、8种有机添加物和6种化学农药对该生防菌土壤抑菌作用影响的分析,结果表明添加7种抗生素、6种化学农药和米糠、蚕豆秸杆、玉米秸杆和烟草秸杆能部分解除该生防菌的土壤抑菌作用.     

一株有抗菌活性的云南重楼植物内生真菌的鉴定

首次从云南重楼植物中分离得到的1株内生真菌(编号c 196),发现它对多种病原菌有抗菌活性.通过进一步对其培养特征,显微形态特征,电镜扫描特征的观察以及ITS序列测定和系统发育树构建与分析,发现该菌与巴西青霉(P.brasilianum)的赫昆青霉(P.paraherquei)的亲缘关系最为接近,相似性为99.6%,但形态特征存在差别,c 196菌株的分生孢子小梗有1~3个分支,而巴西青霉和赫昆青霉[1,2]的分生孢子小梗都是4~7个分支.因此我们建议将其定为P.paraherquei的1个变种———赫昆青霉云南变种(Penicillium para-herqueivar.yunnanensisn.var Sun et Chen).     

扩展青霉TS414脂肪酶的克隆与原核表达

提取了扩展青霉Penicillium expansumTS414菌体的总RNA,并以反转录得到的cDNA为模板,成功扩增得到了脂肪酶基因;在此基础上,构建了重组表达载体pGEX-4T-1-PEL,并在大肠杆菌DH5α中实现了扩展青霉脂肪酶的表达;进一步采用低IPTG诱导浓度、低温、长时间的发酵策略等,使扩展青霉脂肪酶得以有活性的表达;同时,通过反复冻融细胞破碎法使其较好地从菌体细胞中分离出来,提取得到的酶液的活力达到0.49 U/mL。以上结果为后续脂肪酶分子进化等研究奠定了坚实的基础,亦可转化为高校或中学生物学实验教学的项目。     

EDTA、DTPA与6氨-基青霉烷酸衍生物的合成

乙二胺四乙酸二酐（EDTAD）和二乙三胺五乙酸二酐（DTPAD）分别与6氨-基青霉烷酸（6-APA）反应,合成了两个新的化合物EDTA-6-APA和DTPA-6-APA。通过UV、IR、1H NM R、元素分析对化合物的组成和结构进行了初步表征。探讨了反应物的配比、反应温度、反应时间等反应条件对产物收率的影响。结果表明,最佳合成条件为：n（酸酐）∶n（6-APA）=1∶2,反应温度25℃,反应时间7h,此时产物收率均达到70%以上。