细脚拟青霉发酵液中核苷类物质的HPLC分析及脂肪酸成分含量测定

以冬虫夏草生药做对比,采用RP-HPLC、GC法对一株细脚拟青霉菌株发酵液冻干粉中核苷类物质、脂肪酸成分进行分析测定.结果表明,细脚拟青霉发酵液冻干粉中主要含有尿苷、鸟苷、腺苷、肌苷和胸苷5种核苷,其含量分别为3.630 6mg/g、5.547 2mg/g、0.864 3mg/g、0.462 8mg/g和0.231 6mg/g;不饱和脂肪酸是优势脂肪酸,以亚麻油酸、油酸为主,其相对含量分别为38.42%、27.66%.与冬虫夏草生药相比,细脚拟青霉发酵液冻干粉中核苷类物质的含量明显高于后者,不饱和脂肪酸含量略低于冬虫夏草生药.     

雷斯青霉的复壮及水溶性离子液体对其15α-羟基化的影响

针对真菌培养过程中出现的退化问题,对雷斯青霉采用灭菌胡萝卜作为斜面培养基进行了复壮处理,并通过添加水溶性离子液体的方式提高底物的溶解与传递.结果表明:在相同培养条件下,采用胡萝卜复壮后的雷斯青霉羟基化左旋乙基甾烯双酮产15α-羟基化左旋乙基甾烯双酮.选用离子液体[EMIm][EtOSO3]代替有机溶剂作为促溶剂,促溶剂添加量为4%,底物左旋乙基甾烯双酮投料量为5,g/L,投料时间为30,h,转化时间为72,h时的产物转化率最高可达68.1%.     

淡紫拟青霉培养过程中酶及可溶性蛋白的变化

对淡紫拟青霉培养过程POD同工酶进行跟踪测定,结果表明:在淡紫拟青霉的整个液体培养过程中,共出现了4条POD同工酶酶带,其迁移率(R f)分别为0.098、0.137、0.294和0.373,总体上,培养过程POD同工酶酶带的数量呈现减少的趋势,在第3-5 d时有3条POD同工酶酶带,培养至第6 d时,酶带减少了1条,只有2条酶带,从发酵的第7-10 d都只有1条POD同工酶酶带。淡紫拟青霉培养过程β-葡萄糖苷酶活性在培养的第1-6 d时变化比较平缓,酶活的变化为7.0 u/mL-9.438 u/mL,从培养的第7 d开始β-葡萄糖苷酶活性骤然升高,达到43.875 u/mL,培养8 d时,β-葡萄糖苷酶活性达到最高值55.0 u/mL,随后,β-葡萄糖苷酶活性动态平衡状态(9 d-11 d),12 d时开始呈现逐渐下降的稳定变化,从44.438 u/mL降至18.875u/mL。淡紫拟青霉培养过程的可溶性蛋白的电泳结果表明:培养各个阶段存在着共同的蛋白质电泳条带,在1-12 d的培养过程中,蛋白质条带呈现先增多,后减少,再增多的趋势,这反映了淡紫拟青霉发酵过程中基因表达的情况。     

气升式发酵罐生产核酸酶P1发酵过程的动力学

利用15L外循环气升式反应器，初步研究了桔青霉分批式液体深层发酵生产核酸酶P1的发酵动力学过程。Logistic模型可以较好地反映菌体的生长动力学规律，Luedeking-Piret则比较好地描述了发酵过程中的核酸酶P1的活力与菌体生长的关系，并利用此模型可以判断桔青霉发酵生产核酸酶P1的过程中，核酸酶P1的产出与菌体的生长是属于部分耦联的，其发酵过程属于部分耦联型发酵。     

6-氨基青霉烷酸在弱碱性阴离子树脂上的吸附研究

用静态法研究6-氨基青霉烷酸(6-APA)在弱碱性阴离子交换树脂D301和330上的吸附行为．在溶液pH为8．0,6-APA起始浓度介于1．5至20mg／mL条件下，测定25℃时D301树脂和330树脂的静态交换动力学曲线、吸附等温线．并求算D301树脂和330树脂的吸附等温线方程．分别用Langmuir型和Freundlich型方程对D301树脂和330树脂吸附等温线进行线性回归拟和，结果表明，6-APA在D301树脂和330树脂上的吸附更符合Langmuir型吸附．     

灰绿拟青霉U—2代谢物A组分对萝卜蚜五种酶的影响

为探讨灰绿拟青霉Ｕ－２代谢物Ａ组分杀蚜的机理,本文以萝卜蚜为试虫测定了Ａ组分对蚜体内五种酶的影响。结果显示,Ａ组分处理导致酯酶总活力,ＰＯＸ活力降低,ＳＯＤ活力有所提高,而对ＡＣｈＥ和ＣＡＴ的活力影响不明显。     

常现青霉(Penicillium frequentans)β-半乳糖苷酶的纯化及其性质

从常现青霉麸曲中抽提的β-半乳糖苷酶(E.C.32。1.23,亦称乳糖酶)粗制品,经两次硫酸铵盐析沉淀和DEAE纤维素柱层析,纯度提高了近55倍,纯化酶的最适反应温度为62～65℃,最适反应pH为4.0。于pH2.2～8.0放置过夜,酶活性基本稳定。以邻硝基苯酚β-半乳糖苷(ONPG)为底物时该酶的K_m为2.06 mmol/L。Cu~(++),Fe~(++)和N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)对酶活性有明显的抑制作用,Mn~(++)为该酶的激活剂。     

固定化桔青霉气升式反应器生产核酸酶P1的研究

以玉米芯颗粒吸附桔青霉（Penicillium citrinum）孢子,再用质量分数为1.5%的海藻酸钠包埋吸附固定化细胞玉米芯颗粒,于摇瓶中进行分批培养.实验结果表明在固定化细胞产酶的条件下,培养基中淀粉水解糖浓度为9g/L,蛋白胨浓度为1g/L,采用气升式反应器,产酶发酵周期为50h,发酵液中核酸P1的活力高达8.43mmol     

扩展青霉脂肪酶的纯化及氨基酸序列测定

扩展青霉 (Pen .expansum)WMC2 0 718所产碱性脂肪酶经离心分离、硫酸铵沉淀、疏水层析、阴离子交换层析以及凝胶过滤等步骤 ,其酶纯化了 18.5倍 ,获得了比活性为 4 2 0 0U mg的纯碱性脂肪酶 ,提取得率 4 8.8%。纯化后的脂肪酶经过SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和高效反相色谱 (RP HPLC)检测 ,分别达到了SDS PAGE电泳纯和RP HPLC色谱纯。经SDS PAGE和SephadexG 15 0凝胶过滤色谱 ,分别测得酶的相对分子质量为 2 75 0 0和 2 82 0 0 ,表明该酶以单体形式存在。N末端 2 0个氨基酸残基序列测定的结果为ATADAAAFPDLHRAAKLSSA。该酶的最适作用温度为 30℃ ,在 35℃以下稳定 ,4 5℃处理 30min仅残留 30 %酶活性 ;pH稳定范围在 6 .5～ 10 .5之间 ,最适pH值为 10 .0。阴离子表面活性剂LAS对该酶活性的影响较大 ,而非离子表面活性剂AEO9对酶活性无影响。洗涤剂蛋白酶在规定的添加量范围内 ,对脂肪酶的活性影响较小。     

青霉素裂解液的高效液相色谱分析

 利用高效液相色谱法分析测定青霉素裂解液中的主要成分 6 氨基青霉烷酸 (6 APA)、青霉素G钾和苯乙酸 ,并对副产物青霉噻唑酸进行了液相色谱的定性检测。结果表明 ,实验方法简便、快速 ,结果准确 ,可以用于 6 APA生产的质量控制。