兔血清诱导Shope肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：前期实验结果已证明兔血清对Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞具有伤作用。本实验拟从细胞凋亡角度探讨兔血清杀伤该细胞的机理。方法：通过电子显微镜、激光共聚焦显微镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪检测等方法,观察了兔血清诱导细胞凋亡的可能性。结果：经１０％兔血清处理３ｈ的中等分化程度的Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞（ＳＣＢ－６ａ）在电镜、激光共聚焦显微镜下均可见典型的细胞凋亡的形态学特征;１．５％琼脂糖凝胶电泳呈现明显的“阶梯状”图谱（ＤＮＡ ｌｅｄｄｅｒ）;ＰＩ染色后经流式细胞仪检测显示大量亚二倍体细胞（凋亡细胞）。结论：兔血清诱导Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞凋亡可能是其伤细胞的作用机理之一。     

Assessment of alternated cooling and heating treatment by US combined CEUS in the VX2 rabbit liver tumor model

Inoperable liver tumors are often treated by thermal ablation that destroys the tumor in situ and spares the adjacent hepatic tissue.Thermal–physical treatment has many advantages,but treatment by freezing or heating alone has some limitations.By taking the advantages and disadvantages of cryosurgery and thermotherapy into consideration,a new thermal technique that combines cryosurgery and radio frequency ablation has been proposed,thereby overcoming the disadvantages of each treatment strategy and improving therapeutic outcomes.This new approach remains to be systematically studied in the liver;therefore,this study was performed to estimate survival after alternated cooling and heating ablation therapy in a VX2 rabbit liver tumor model.Sixteen days after VX2 carcinoma implantation into the rabbit liver,tumors were treated with alternated cooling and heating ablation therapy.Rabbits were monitored for 6 months after treatment and assessed with ultrasound(US)and computed tomography at 1,7,14,and 30 days posttreatment.Untreated tumor-bearing animals served as the control group.Our results show that alternate freezing and heating ablation therapy resulted in a good recovery of VX2 rabbits.Compared with the control group,treated rabbits lived significantly longer(P\0.05),with 70%of treated animals surviving to 196 days posttreatment without metastasis or recurrence,while none of the controls did so.There was no local recurrence in the treatment group.All rabbits in the control group developed metastasis,while metastasis was only observed in 30% of treated rabbits.These results suggest that alternate cooling and heating ablation therapy can prolong the survival time of rabbits with VX2 liver tumors and is an effective method for tumor therapy.Furthermore,we also showed in this model that contrast enhanced US is a valid follow-up approach to assess treatment effectiveness.     

油水乳化体系中分枝杆菌转化植物甾醇产9α-羟基雄甾烯酮工艺研究

为了提高分枝杆菌转化植物甾醇产9α-羟基雄甾-4-烯-3,17-酮(9-OH-AD)的转化效率,建立了油水乳化体系。结果表明:机械搅拌提供剪切力和加入吐温80作为分散剂是形成稳定乳化体系的必要因素,且油的比例须随甾醇投料质量浓度的增加而增加。在油水乳化体系中,细胞均匀分散,生物量增加,植物甾醇投料浓度和转化效率均得到提高;植物甾醇投料质量浓度可达20g/L,9-OH-AD摩尔得率达到64.06%,产率为1.28g/(L·d)。转化终止后通过离心进行相分离,可以去除大部分存在于油相中的副产物,使产物纯度从66%提高到90%。     

能藏善跑的草兔

草兔分布在我国东北、华北、华东、西北和华中的广大地区,它们食性简单,有时对农作物有一定危害,但更偏爱美味的优质牧草。它们有很多天敌,在长期的博弈中也练就了一身趋避敌害的本领,并拥有着强大的繁殖能力。且看能藏善跑的草兔是如何历经风雨仍繁盛不衰的。     

多杀性巴氏杆菌外膜蛋白单克隆抗体对兔及鼠巴氏杆菌病的保护

用兔子分离的多杀性巴氏杆菌(P.multocida)免疫小鼠得脾细胞,与骨髓瘤细胞融合后制备针对37.5KDa外膜蛋白的单克隆抗体(MAbs)。用酶联免疫吸附试验(ELISA),全细胞放射免疫沉淀试验(WCRIP),免疫印迹分析筛选所需MAbs。WC-RIP和免疫印迹试验表明,用完整多杀性巴氏杆菌吸附及洗脱的MAb1608,其识别的抗原暴露于细胞表面,抗体易于接近,其分子量为37.5KDa,蛋白酶K处理多杀性巴氏杆菌外膜,MAb1608的活性完全消除,说明此MAb结合于某一蛋白抗原决定簇。在免疫印迹试验中MAbl6108与提纯的脂多糖(LPS)无反应。被动转移研究表明与对照组比,鼻内接种MAb1608并同时鼻内攻毒的9只家兔其死亡率、肺炎严重程度、非呼吸道脏器和鼻腔中多杀性巴氏杆菌数量都明显要低。肺中多杀巴菌数量减少84.750倍。被动转移试验也表明MAb1608保护鼠免受具有该MAb识别抗原决定簇的同源或异源多杀巴菌株的攻击。但是,当用缺乏MAb1608识别抗原决定簇的多杀巴菌株攻击鼠时,MAb1608不提供保护作用。本研究表明37.5KDa外膜蛋白是保护性MAb的作用靶。     

兔圆小囊组织中抗菌肽类物质的分离纯化及抗菌活性研究

成年健康家兔,经腹腔注射猪大肠杆菌刺激后,取圆小囊组织以捣碎机捣碎,沸水浴处理后,以5％乙酸提取,调整pH值后,经SephadexG100凝胶柱过滤层析,收集各组分并用琼脂糖弥散法检测各组分的抗菌活性,获得纯化的抗菌肽类物质。纯化物经Tricine SDS-PAGE,银染后分析为一条蛋白带,分子量约为7000Da左右,经超滤分析,纯化物的分子量大于3000Da。抗菌肽粗提物和纯化物经体外抗菌实验,对大肠杆菌（078）、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均表现出较强的抗菌活性。     

黄面赭丝■雄虫及基凹长尾蜓雌虫的首次描述(蜻蜓目:丝■科、蜓科)

文内省次描述黄面赭丝(虫忽)雄虫(3 (?)云南,大理,苍山,1998—Ⅷ—21)及基凹长尾蜒雄虫(1(?)1(?),产地同上,1998—Ⅷ—26).基凹长尾蜒是中国新记录.标本存大理师专.     

P物质及其mRNA在家兔圆小囊组织内表达的研究

P物质(substanee P,SP)是第一个被发现的脑肠肽类物质。大量研究表明SP在激发非特异性免疫调节和诱发炎症等方面发挥着重要的功能。家兔的圆小囊是兔特有的肠道粘膜免疫器官,在家兔的抗感染免疫中发挥着非常重要的作用。采用免疫组化和原位杂交的方法,显示了家兔圆小囊中的SP和其mRNA的分布和表达情况。免疫组织化学结果表明:在家兔的圆小囊粘膜层和黏膜下淋巴组织中存在有大量SP免疫组化阳性反应信号;原位杂交实验结果观察到的圆小囊淋巴组织的各个部位均有SP mRNA阳性反应信号出现,表明兔圆小囊淋巴组织中确实存在着产SP的细胞。     

兔防御素基因酵母表达的研究

防御素是由动植物体内产生的一种多肽类抗菌、抗病毒活性物质,本研究根据巴斯德毕赤 酵母偏爱密码子的特性,设计兔防御素NP2基因,并构建巴斯德毕赤酵母的表达质粒pGAPZα-NP2,通 过LiCl法转入巴斯德毕赤酵母中,筛选和检测结果表明,兔防御素NP2基因已经成功地转入巴斯德毕 赤酵母,并得到表达。该实验可为兔防御素NP2抗菌抗病毒的研究和开发奠定理论和物质基础。     

干旱胁迫对长雄野生稻根际微生物群落结构的影响

干旱胁迫是影响水稻生产的主要障碍。本研究以6种长雄野生稻(Oryza longistaminata)为材料,采用盆栽控水模拟干旱胁迫,通过16SrDNA高通量测序技术,研究干旱胁迫对长雄野生稻根际微生物群落结构的影响。结果表明:细菌的优势门是变形菌门(Proteobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi)和酸杆菌门(Acidobacteria),相对丰度分别为24.3%～36.49%、11.94%～20.39%和8.9%～17.83%。古菌的优势门是泉古菌门(Crenarchaeota)和广古菌门(Euryarchaeota),相对丰度分别为0.50%～1.05%,0.17%～0.64%。与空白土壤比较,干旱胁迫后的根际土壤微生物菌群多样性未发生明显变化,但群落组成结构发生显著改变(P<0.05)。在干旱胁迫处理下,酸杆菌门(Acidobacteria)、α-变形菌(Alphaproteobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、放线杆菌门(Actinobacteria)、TM7和泉古菌门(Crenarchaeota)的相对丰度显著升高,而δ-变形菌(Deltaproteobacteria)、硝化螺旋菌门(Nitrospirae)、OD1、绿菌门(Chlorobi)、螺旋菌门(Spirochaetes)、OP11和NC10的相对丰度显著降低。这些结果表明,长雄野生稻根际微生物能对干旱环境进行响应,发生群落结构改变达到新的平衡,保持同样高的群落结构多样性,来应对干旱环境的变化。