anti-EGFR scFv-FTH1/AP1-FTH1纳米粒子的构建及其治疗哮喘小鼠的应用

采用基因工程方法分别将抗表皮生长因子受体（EGFR）的单链抗体（anti-EGFR scFv）和靶向白介素-4-受体（IL-4R）的AP1短肽分别修饰到铁蛋白重链亚基（FTH1）的N端,再通过蛋白表达、体外混合复性后成功制备了anti-EGFR scFv-FTH1/AP1-FTH1双靶向纳米粒子。结果表明：该纳米粒子能正确组装成铁蛋白的特征笼状结构,粒径为（13.2±1.3）nm。在哮喘小鼠模型中发现该纳米粒子能有效抑制哮喘多种症状,且在缓解气道高反应方面的效果优于单靶向anti-EGFR scFv-FTH1/FTH1纳米粒子。     

固氮酶与化学模拟生物固氮

我们都知道,由H2和N2合成氨需要高温、高压和催化剂。可是自然界进化出一种完全不同的不需高温、高压的更加精巧的合成路线,这就是通过固氮酶的生物固氮过程。该过程的特征,也是最诱人的地方是该合成反应可以在常温、常压的温和条件下进行。固氮酶只有在无氧条件下才能催化这种氧化一还原反应。     

MALDI-TOF质谱和电子光谱技术研究人血清铁蛋白释放铁的动力学

采用MALDI-TOF质谱技术研究血清混合蛋白质的组成,用电子光谱技术分析人血清铁蛋白(Serumferritin,SF)释放铁的动力学过程和规律.结果表明,在人血清中,以Na₂S₂O₄为电子供体时,SF释放铁的速率极快,无法采用常规分光光度法进行检测;以抗坏血酸为电子供体时,SF以一级反应动力学方式释放铁,认为人血清中其它蛋白质协助或参与调控铁蛋白进行快速释放铁反应,从而满足人体对铁的需求.     

人乳铁蛋白基因的克隆及序列分析与重组逆转录病毒质粒载体PLNCX2-hLF的构建

从正常人外周血中性粒白细胞中提取总RNA，用RT-PCR的方法扩增人乳铁蛋白（hLF）cDNA，将其克隆到pMD18-T Simple载体上并测序．用限制性内切酶Xho Ⅰ和Hind Ⅲ将目的片段与逆转录病毒载体PLNCX2进行双酶切、并用T4连接酶进行连接；然后转化到top10菌中，再次进行DNA序列测定．前后两次序列测定结果一致，没有突变，全长为2，136bp，说明所克隆的为hLF基因的cDNA序列；与GeneBank中登录的序列相比，同源性达99％以上．     

甘肃武都宫颈癌高发区妇女血清铁蛋白水平调查

目的了解甘肃武都宫颈癌高发区妇女血清铁蛋白的水平及机体血清铁蛋白的缺乏情况,探讨宫颈癌高发与血清铁蛋白是否有联系。方法采用整群抽样方法,对武都1741名31~54岁妇女进行调查,再从每一年龄随机抽取三人份,共抽取45人份为抽样调查组,用52名兰州地区体检健康的女性为正常对照组,42名宫颈癌患者为阳性对照组,用放射免疫法对血清铁蛋白进行测定。结果武都总调查人群铁蛋白含量为104.4±110.24ng/mL。抽样调查组铁蛋白含量为99.83±88.03ng/mL,而阳性对照组铁蛋白含量为188.32±142.05ng/mL,武都地区人群铁蛋白含量低于兰州地区(q=-5.18,P<0.01),阳性对照组铁蛋白含量为153.01±105.14 ng/mL,与武都妇女之间无差异(q=-1.92,P>0.05),正常对照组与阳性对照组之间无差异。武都妇女铁蛋白缺乏率为4.6%,铁蛋白缺乏率无年龄差异。结论武都妇女铁蛋白含量低于兰州地区,与宫颈癌的高发没有直接的联系,而且铁蛋白不适合作为宫颈癌早期诊断的指标。提示在宫颈癌高发区的妇女应加强对铁等营养物质的摄取。     

不同毒力的结核分枝杆菌感染巨噬细胞TfR与Lf的表达

为探讨结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株和卡介苗菌株(BCG)分别感染巨噬细胞,检测细胞内转铁蛋白受体和乳铁蛋白表达量并分析其时相性变化及意义。分别采用结核分枝杆菌H37Rv株和BCG菌株感染巨噬细胞RAW264.7细胞株,于感染后1、6、12、18、24h,应用ELISA技术检测巨噬细胞上清液中TfR和Lf的表达量;应用Western blot技术于上述时间点检测巨噬细胞内TfR的表达量。结果显示,ELISA和Western blot技术均证实感染模型组检测的TfR表达量均高于正常对照组,ELISA结果显示上清液中TfR表达量在感染12和18h差异最明显,具有统计学意义(P<0.05)。Western blot显示:于模型建成后1、6、18h、差异有统计学意义(P<0.05)。另外,ELISA证明感染可诱导巨噬细胞分泌较高水平的Lf,于感染后6、12、18、24h均高于正常对照组,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。由此可知,结核分枝杆菌感染导致巨噬细胞内的TfR和Lf表达更高。     

铁蛋白表面修饰及其应用

铁蛋白是一种广泛存在的储铁蛋白,具有纳米尺寸的水合氧化铁内核和笼形结构的蛋白质外壳。通过对铁蛋白壳的修饰或核的改造已成功构建出多功能肿瘤诊断和药物输送系统。近年来对铁蛋白的修饰研究主要集中在:(1)通过对铁蛋白内表面的修饰使铁蛋白壳内包裹上特定药物或者促进纳米材料的合成;(2)通过对铁蛋白外表面的修饰与PEG或抗体连接以扩展新的功能;(3)通过铁蛋白外表面或亚基间接触面的修饰控制铁蛋白的自组装。目前从铁蛋白修饰角度来阐明铁蛋白应用的研究较少。本文综述了近年来铁蛋白表面修饰的研究进展,介绍了铁蛋白表面化学修饰和生物修饰的方法,并进一步阐述了经修饰后铁蛋白纳米材料在生物医学、诊断学、纳米电子学等领域的应用。最后探讨了目前铁蛋白表面修饰研究方向及需解决的问题,提出了将铁蛋白生物修饰和化学修饰两种方法相结合是未来发展方向之一。本工作旨在为铁蛋白的进一步开发利用提供一些可能的思路。     

高效液相色谱-基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱分离鉴定牛乳铁蛋白素

建立了高效液相色谱-基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)分离鉴定牛乳铁蛋白素(bovine lactoferricin, LfcinB)的方法。采用胃蛋白酶酶解牛乳铁蛋白,酶解液离心后取上清液,经过离子交换色谱、反相液相色谱、透析等技术分离,对分离得到的目标产物进行抗菌活性分析、蛋白含量测定和MALDI-TOF/TOF MS鉴定。分离得到高活性的LfcinB,其相对分子质量为3124.89,蛋白含量为18.20 μg/mL。本方法具有精度高、分析速度快和分辨能力强等优点,是其他传统的分析鉴定LfcinB方法所无法比拟的,为进一步研究LfcinB奠定了基础。     

Cu（I）对马脾脱铁铁蛋白吸收Fe（II）影响的光谱研究

用紫外吸收光谱研究了Ｃｕ（Ｉ）对马脾脱铁铁蛋白吸收Ｆｅ（ＩＩ）的影响作用，结果显示低Ｃｕ（Ｉ）浓度下，Ｆｅ（ＩＩ）／（ｓｕｂｕｎｉｔ）≈４０，ｐＨ为６．５的（ＣＨ２）６Ｎ４－ＨＣｌ缓冲体系中，Ｃｕ（Ｉ）可明显促进马脾脱铁铁蛋白对Ｆｅ（ＩＩ）的吸收，同时探讨了Ｃｕ（Ｉ）与马脾脱铁铁蛋白的相互作用。     

铕（Ⅲ）对脱铁铁蛋白吸收铁（Ⅱ）的影响

应用紫外吸收光谱法观察了（Ⅲ）对马脾脱铁铁蛋白吸收铁（Ⅱ）的影响，探讨了使用马脾脱铁铁蛋白为笼腔合成稀土，过渡金属混合纳米氧化物的可能途径。