荧光法研究氧氟沙星与牛乳铁蛋白的相互结合作用

用荧光光谱法研究了稀水溶液中牛乳铁蛋白与氧氟沙星分子之间的结合作用机制.以荧光猝灭法测定了该反应的结合常数K, 结合位点数n；并依据Förster偶极-偶极无辐射能量转移机制,得到氧氟沙星和牛乳铁蛋白色氨酸残基之间结合距离r和能量转移效率E；并用同步荧光技术考察了氧氟沙星对牛乳铁蛋白构象的影响；牛乳铁蛋白与氧氟沙星分子之间有较强的结合作用,而且氧氟沙星对牛乳铁蛋白的构象有一定的影响.     

乳铁蛋白对口腔癌细胞中VEGF和bFGF表达的影响

目的探讨乳铁蛋白对口腔癌细胞中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)表达的影响.方法选用人口腔鳞癌细胞系CAL-27,分为0.006,0.013,0.025,0.050 g/L重组人乳铁蛋白实验组和空白对照组.应用RT-PCR法检测VEGF和b FGF mRNA表达水平;应用Western Blot法检测VEGF和b FGF蛋白表达水平.结果 CAL-27口腔癌细胞VEGF和b FGF mRNA均随着乳铁蛋白浓度增加表达量逐渐减少;0.050 g/L乳铁蛋白实验组VEGF和b FGF mRNA表达量明显低于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05).CAL-27口腔癌细胞VEGF和b FGF蛋白产物随着乳铁蛋白浓度增加表达量逐渐减少;0.050 g/L乳铁蛋白实验组VEGF,b FGF蛋白表达量明显低于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05).结论乳铁蛋白可有效抑制口腔癌细胞系CAL-27细胞中VEGF,b FGF的转录和表达,进而抑制血管生成,可作为乳铁蛋白抗口腔癌的机制之一.     

铁蛋白反应器储存有毒金属离子的初步研究

探讨铁蛋白反应器在模拟流动海水体系中储存有毒金属离子的能力及规律.在体外,脱铁核铁蛋白能重新构建新的铁核且核中多数铁组分经含有5% 氯化钠的海水处理后仍可稳定于蛋白壳中,只有少量对H 或OH- 较敏感的铁组分随反应体系的pH值增加或减少而被直接释放于介质中.此外,铁蛋白还能储存Co2 、Ni2 、Mn2 和Zn2 等有毒金属离子,并释放相对应的铁量,其储存离子量和释放Fe3 量的摩尔比为1:1,该储存量及能力与环境介质的pH值有关,与Na 、K 、Ca2 等非过渡金属离子无关.经改造后的铁蛋白反应器预计可用于监测流动水域的有毒金属离子.     

牛奶成分可防止放射伤害

日本专家经动物实验确认，牛奶和人类母乳中都含有的成分——乳铁蛋白具有防止放射伤害的功效。来自日本放射医学综合研究所等机构的研究人员将50只实验鼠分成数量相同的两组，只给其中一组的饲料中混入0．1％的乳铁蛋白，并持续一个月。之后，用足以导致半数以上实验鼠死亡的高剂量X射线照射全部50只实验鼠。受X射线照射30天后，未食用乳铁蛋白的实验鼠生存率为62％，而食用含乳铁蛋白饲料的实验鼠生存率达85％。     

人乳铁蛋白基因克隆及表达载体构建

通过ＰＣＲ法扩增出２３６６bp的人乳铁蛋白cDNA、８００bp的山羊β－乳球蛋白基因５′端调控序列,经ＰＣＲ反应连接后,克隆到表达载体pLNCX中,测序结果表明,与ＧeneBank中登录的序列相比,所获人乳铁蛋白cDNA序列的同源性为９９．７４％,山头β－乳球蛋白基因５′端调控序列的同源性为９９．７５％。酶切结果证明得到了正确的重组载体,可用于乳腺生物反应器的研究。利用ＰＣＲ反应直接克隆目的片段,并通过同源序列进行ＰＣＲ连接,极大提高了克隆的速度和准确性,,为基因克隆及其表达研究带来了方便。     

磷酸奥司他韦-乳铁蛋白吸入剂的制备及HPAEpiC细胞毒性与抑菌作用研究

采用喷雾干燥法制备了磷酸奥司他韦-乳铁蛋白干粉吸入剂。以m(L-亮氨酸)∶m(甘露醇)、溶液体积、进料速率、气体流量为影响因素，以收率、卡尔指数(Carr’s index)、空气动力学直径(D_a)、体外肺部细微粒子沉积率(FPF)为主要指标，设计了4因素3水平的正交试验，对制剂配方及喷雾干燥工艺参数进行优化，得到优化后的制备条件为：m(L-亮氨酸)∶m(甘露醇)=3∶0，溶液体积40 mL，进料速率约6.4 mL/min，气体流量约473 L/h。采用CCK-8法测试在优化条件下制备的干粉吸入剂对正常人肺泡上皮细胞(HPAEpiC)的毒性，并采用梯度稀释法和菌落计数法测试了干粉吸入剂对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑制作用，结果表明：当干粉吸入剂的质量浓度不高于600 μg/mL(所含磷酸奥司他韦的质量浓度约为353 μg/mL)时，HPAEpiC细胞的存活率大于90%，表明制备的干粉吸入剂在此浓度范围内对HPAEpiC细胞几乎没有损伤作用；在质量浓度为1 mg/mL时干粉吸入剂对金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用，抑菌率为22.50%。     

超氧(O_2~-)生化特性研究新进展

化学家和生物家从不同的角度对超氧(O_2)的反应活性进行了研究。提出两种截然相反的观点:一种观点认为O_2只有化学特异性而不具有反应活性;另一种观点则认为O_2具有很高的反应活性,是一种非常强的氧化剂, 而且广泛存在于生物代谢系统中。近几年,关于超氧生化特性的研究取得了突破性进展;(1)超氧可以产生单线态氧(~1O_2);(2)超氧可使铁蛋白中的铁离子以Fe~(2+)的形式释放出来。     

乳铁蛋白在动植物中的表达及应用

文章主要对乳铁蛋白的结构功能以及目前在动植物中的表达应用情况作了论述.     

动物的乳铁蛋白

乳铁蛋门是一种天然的具有多种生理功能的糖蛋白．乳铁蛋白作为转铁蛋白家族的一员，近年来越来越多地受到人们的关注．本文综述了乳铁蛋白的分子结构，生物学功能以及其基因工程研究的进展．     

反复呼吸道感染患儿铁缺乏与免疫功能的关系

目的:探讨婴幼儿反复呼吸道感染与铁缺乏及免疫功能改变的相关性。方法:收集2～3岁反复呼吸道感染患儿68例,分为2组:ρ(血红蛋白)<110g/L组(A组)28例;ρ(血红蛋白)≥110g/L组(B组)40例。另设2～3岁健康儿童30例为对照组(C组)。测定红细胞碱性铁蛋白(EF)与外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+和免疫球蛋白IgG、IgM、IgA。结果:A、B、C3组EF平均数分别为(4 07±0 58)、(5 29±0 61)、(8 04±2 20)ag/RBC,A组低于B组,B组低于C组,具有显著统计学意义(F=77 943,P<0 01)。A、B、C3组IgG、CD4+平均数及CD4+/CD8+比值分别为[(7 54±1 02)g/L、(32 12±3 72)%、(0 89±0 35)]、[(8 32±0 63)g/L、(37 80±3 35)%、(1 10±0 17)]、[(9 14±0 94)g/L、(42 36±3 07)%、(1 46±1 12)],A组低于B组,B组低于C组,具有显著统计学意义(F=64 154,P<0 01;F=97 398,P<0 01;F=41 631,P<0 01)。A、B、C3组EF含量与CD4+及CD4+/CD8+比值呈明显的正相关关系(Rs=0 67,P<0 01;Rs=0 84,P=<0 01)。结论:铁缺乏—免疫功能损害—反复呼吸道感染之间有着密切的关系。