磷酸奥司他韦-乳铁蛋白吸入剂的制备及HPAEpiC细胞毒性与抑菌作用研究

采用喷雾干燥法制备了磷酸奥司他韦-乳铁蛋白干粉吸入剂。以m(L-亮氨酸)∶m(甘露醇)、溶液体积、进料速率、气体流量为影响因素,以收率、卡尔指数(Carr’s index)、空气动力学直径(D_a)、体外肺部细微粒子沉积率(FPF)为主要指标,设计了4因素3水平的正交试验,对制剂配方及喷雾干燥工艺参数进行优化,得到优化后的制备条件为：m(L-亮氨酸)∶m(甘露醇)=3∶0,溶液体积40 mL,进料速率约6.4 mL/min,气体流量约473 L/h。采用CCK-8法测试在优化条件下制备的干粉吸入剂对正常人肺泡上皮细胞(HPAEpiC)的毒性,并采用梯度稀释法和菌落计数法测试了干粉吸入剂对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑制作用,结果表明：当干粉吸入剂的质量浓度不高于600μg/mL(所含磷酸奥司他韦的质量浓度约为353μg/mL)时,HPAEpiC细胞的存活率大于90%,表明制备的干粉吸入剂在此浓度范围内对HPAEpiC细胞几乎没有损伤作用;在质量浓度为1 mg/mL时干粉吸入剂对金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用,抑菌率为22.50%。     

转人乳基因牛会否突破防线?

近日,中国农业大学李宁院士的科研团队在PlosOne杂志发表研究成果,他的团队将编码人乳中的乳清蛋白、乳铁蛋白、溶菌酶及一些抗体基因转入牛的体细胞核,并用这些体细胞核成功克隆出17头转基因牛,可以生产出含有人乳活性成     

广西地区1641名献血员铁营养状况研究

对广西南宁、柳州、桂林、玉林四市血站１６４１名献血员进行血红蛋白、红细胞游离原卟啉、血清铁蛋白等铁指标测定，结果１０５０名男献血员及５９１名女献血员铁缺乏症患病率分别为３８．６７％及４５．８５％，其中缺铁性贫血患病率分别为２２．１％及３８．９２％；献血员铁缺乏症与年平均献血量关系较为密切。表明广西地区献血员铁缺乏症患病率较高，程度较为严重。     

马脾铁蛋白铁核表层磷铁组成稳定性

马脾铁蛋白络合Ｆｅ２＋的能力与它的铁核表层磷酸盐和Ｆｅ３＋组成含量有关．ＯＨ－参与铁核表层组成，并迫使铁蛋白释放Ｆｅ３＋．用强还原剂还原铁核表层时，铁蛋白只能释放磷酸盐．在Ｆｅ２＋、磷酸盐和氧化剂存在下，铁蛋白能贮存原铁核总磷酸盐量的６０％的磷．     

黄豆铁蛋白提取新方法及其与豌豆铁蛋白活性比较

铁蛋白是广泛存在于动物、微生物及植物体中的一种铁贮藏蛋白, 具有去除二价铁的毒性以及调节机体细胞铁代谢平衡的作用. 本文以黄豆种子为原料, 开发出黄豆铁蛋白提取新方法, 即将黄豆粗提液在55 ℃下加热15 min, 再将冷却后的上清液分别用500 mmol/L MgCl2和700 mmol/L柠檬酸三钠进行盐析. 离心得到的铁蛋白粗提液经透析后, 用DEAE-cellulose弱阴离子交换层析和Sephacryl S-300凝胶过滤层析进一步分离, 得到电泳纯的铁蛋白. Native-PAGE电泳测得分子量约为560000, SDS-PAGE电泳结果表明, 黄豆铁蛋白含有两种亚基, 分子量分别为28000和26500. 活性研究显示, 黄豆铁蛋白与豌豆铁蛋白铁氧化沉淀和还原释放反应的活性明显不同.     

电泳和质谱技术研究4种胰脏铁蛋白的亚基类型和等电点特性

采用电泳和质谱技术对所制备的鸡、鸭、牛和猪胰脏铁蛋白的亚基类型和等电点特性进行了研究。采用天然聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术研究的结果表明,上述4种铁蛋白呈现不同的迁移率,据此可知鸡胰铁蛋白的相对分子质量(Mr)>鸭胰铁蛋白的Mr>黄牛胰铁蛋白的Mr>猪胰铁蛋白的Mr,而且均大于马脾铁蛋白(HSF)的Mr。采用十二烷基硫酸钠(SDS)-PAGE技术研究的结果表明,上述4种铁蛋白均由H(heavy chain)和L(light chain)类型的亚基组成,但H和L亚基的相对数量（即H/L亚基数量的比值）有差别。采用肽指纹图谱技术分别鉴定各铁蛋白的H和L亚基。选用变性等电聚焦方法研究发现,上述4种铁蛋白分别由3～6种不同等电点的亚基聚合体组成,说明铁蛋白的H和L亚基之间呈现复杂的相互作用和不同的聚合体。不同陆生动物胰脏铁蛋白亚基之间相互作用的强度和聚合态存在着差异,这一差异特性可能与调控铁蛋白释放铁的速率有关,也与动物对铁的需求和铁解毒速率有关。     

用圆二色性和荧光光谱技术研究纳米吡啰红G核-铁蛋白的构建机理

小批量制备了电泳纯鲨鱼肝铁蛋白(Liver ferritin ofSphyrna zygaena,SZLF),对SZLF的结构与功能进行了研究.在pH=2.0~10.0条件下,选用圆二色性(Circular dichroism,CD)光谱技术研究了SZLF和脱铁核SZLF(apoSZLF)二级结构转换的基本特征和变化趋势,揭示了SZLF蛋白壳的亚基稳定性、相互作用强度和去折叠现象.利用酸碱中和方法,解离SZLF蛋白壳亚基,并再次构建成完整SZLF.用紫外-可见分光光度法和荧光光度法研究了构建纳米吡啰红G核-铁蛋白的途径.定量分析结果表明,每分子apoSZLF可捕获12分子吡啰红G于蛋白壳内,构建纳米吡啰红G核-铁蛋白.分析了apoSZLF直接捕获和释放吡啰红G的途径与速率,为后续构建高存量纳米顺铂核-铁蛋白药物载体提供了可行性技术.     

温度对二硫苏糖醇释放马脾铁蛋白铁的影响

用光谱法检测了二硫苏糖醇(DTT)在不同温度下对马脾铁蛋白(HSF)铁核铁的释放过程.在空气(21%O2)、DTT浓度为1.67mmol/L和反应时间为2h条件下,37℃时铁释放量是5℃时的19.43倍,25℃时铁释放量是5℃时的16.91倍,37℃时铁释放量仅是25℃时的1.15倍.这说明HSF分子在不同的温度下其蛋白壳结构发生了柔性改变.这种改变使HSF亲水通道在5℃时变得更为狭窄,从而使DTT进入HSF变得困难.     

鲨鱼肝铁蛋白亚基解离与组装机理的研究

小批量制备质谱纯鲨鱼肝铁蛋白(Liver Ferritin of Sphyrna zygaena,SZLF)。在弱酸介质(pH1.0)中,天然电泳结果显示,SZLF蛋白质亚基20 min后开始解离。选用透射电子显微镜跟踪SZLF亚基解离与重组装全过程和蛋白壳与铁核尺寸变化,发现SZLF在亚基酸解离过程中,随着pH值的降低,铁核和蛋白壳的尺寸呈现相同的变化趋势,这种变化趋势可能与铁核内层铁的释放和蛋白壳的解离与去折叠有关。SZLF蛋白壳的重组装过程则是一个快速过程,并且是由松散熔球态向紧密态转变的过程。SZLF由单类型亚基组成,而马脾铁蛋白(Horse Spleen Ferritin,HSF)由H和L两种亚基类型组成。在基质pH3.0条件和激光辅助下,混合HSF和SZLF仍然可释放各自的亚基且形成准亚基离子,供基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析,说明此时SZLF的亚基间相互作用强度减弱但并没有去折叠。TEM技术在铁蛋白解离和重组装过程中的应用,为进一步研究铁蛋白纳米包装的过程和机理提供新颖的、可行的和更加直观的研究手段。     

A Note on the Connectedness of the Invertible Group of a Nest Algebra

The connectedness of the invertibles question for arbitrary nest has been reduced to the case of the lower triangular operators with respect to a fixed orthonormal basis en for n 1. For each f ∈ H∞, let Tf be the Toeplitz operator. In this paper we prove that Tf can be connected to the identity through a path in the invertible group of the lower triangular operators if f satisfies certain conditions.