重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达

以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase, GS EC 6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3) (pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的各种基本参数进行了初步的研究.研究了最佳本底培养基、最佳碳源及其最佳添加比例、碳源与诱导物的最适组合,并探索了适用于改良型培养基的诱导参数.实验结果表明,对于重组目的产物蛋白,改良型M9培养基完全可以替代LB培养基;以甘油为碳源,可以避免葡萄糖对T7lac启动子的屏蔽作用.以乳糖为诱导物,目的蛋白的表达量、可溶性及酶活与以IPTG为诱导物基本接近.研究结果为酶法合成谷氨酰胺的工业化生产提供了一定的参考.     

HPLC法同时测定牛乳中3种雌激素残留量

<正>在奶生产中使用雌激素,就会在一段时间内造成乳及乳制品中残留有雌激素。人们长期饮用或食用雌激素残留的牛乳,会危害饮用者身体健康。国内外测定牛乳中激素的方法较多,其中放射免疫法[2]和酶联免疫法[3]等生物技术仅能测     

真核生物DNA聚合酶δ的研究现状

DNA聚合酶δ(DNA polymerase δ)是真核生物DNA复制的主要复制酶,同时还参与DNA修复,对保持真核生物基因组的结构完整性和遗传稳定性具有重要作用.对DNA聚合酶δ蛋白功能活性及其基因表达机制的研究因受技术上的限制而未能深入研究.由于其重要的生物学功能,目前引起人们的更多关注和重视.文中就该酶的生物学功能、亚基组成、核心酶的分子表达调控以及与其他蛋白相互作用等方面对国内外DNA聚合酶δ的研究进行简要综述.     

西藏高校学生乙型肝炎表面抗原携带情况调查与分析

目的：了解西藏高校学生的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的携带情况,并分析其相关因素。方法：应用酶联免疫法（ELISA）检测1890名入校新生的HBV血清标志物,利用SPSS15统计学软件进行数据的录入和分析,率之间采用χ2检验。结果：1890名大学新生,其中男性1011名,女性879名;藏族1100名,汉族及其他民族790名;检出HBsAg阳性者为242例,阳性率为12.8%（其中男生为14.0%,女生为11.4%）,男女阳性率差异无统计学意义（χ2=3.000,P〉0.05）。比较城乡生源的阳性率,发现不同生源地入校新生阳性率比较差异无统计学意义（其中城市12.8%、农村13.1%,χ2=0.035,P〉0.05）。藏族与汉族HBsAg阳性率比较差异有统计学意义（藏族15.8%,汉族8.5%,χ2=21.213,P〈0.001）;藏族学生HBsAg阳性率分地区比较差异无统计学意义（拉萨14.8%、日喀则5.7%、林芝13.4%、山南14.4%,χ2=0.383,P〉0.05）。结论：西藏高校学生乙肝表面抗原阳性率高于全国平均阳性率。应加强教育,定期注射乙肝疫苗,增强抗病能力,有效控制乙肝在高校的传播。     

非甾体类抗炎药的临床应用研究

目的阐述非甾体抗炎药物的临床应用.方法通过对国内外文献的比较分析,概述非甾体抗炎药作用机制、发展进程及发展趋势.结果非甾体抗炎药物是通过抑制花生四烯酸代谢而发挥作用,但对花生四烯酸代谢酶的选择性差异造成其严重的不良反应,使非甾体抗炎药临床应用受限.结论为了降低药物的不良反应,选择性COX-2/5-LO双重抑制剂及一氧化氮释放型非甾体抗炎药是临床用药的发展趋势.     

变性羊毛对微量汞的吸附和洗脱性能的研究

研究了变性羊毛对微量汞的吸附和洗脱性能，实验表明，变性羊毛对微量汞具有良好的吸附性能，饱和吸附量为２．７ｍｇ／ｇ，吸附酸度范围为５ＮＨＣｌ－ｐＨ７，洗脱条件为以ＮＨ４Ｃｌ饱和的６Ｎ－８ＮＨＣｌ。     

不同板栗品种(系)过氧化物酶同工酶的分析比较(简报)

利用垂直板型聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)对48个不同板栗品种(系)的过氧化物酶(POD)同工酶进行了比较研究。结果表明,48个品种(系)的POD同工酶酶谱在酶带数、迁移率、酶量(酶带宽窄)及酶活性(酶带深浅)等方面均存在相似性,但也有一定的差异。依酶带条数的多少,初步将48个品种(系)划分为8大类,并对其亲缘关系进行了分析,找出了几个亲缘关系最近的品种(系)。     

深黄被孢霉Mortierella isabelina粉对小鼠LPO、SOD和免疫器官的影响

以昆明种小鼠为对象分别研究了深黄被孢霉粉对小鼠LPO、SOD、抗疲劳、耐缺氧等生理指标以及对脾脏、胸腺等免疫器官的影响。昆明种小鼠分组，分别灌服深黄被孢霉粉和等量生理盐水，每d1次，15d后测定各项生理指标。结果表明，试验组动物血清LPO含量比对照组下降0.8mmol/L,SOD含量升高187u/ml，抗疲劳时间延长62min，耐缺氧能力延长6min，胸腺指数增中1.7%，脾指数增加5.6%。结果显示深黄被孢霉粉具有拮抗自由基、延缓衰老、抗疲劳、耐缺氧、抵抗不良环境和增强免疫功能的作用。     

以壳聚糖为基质对蚯蚓纤溶酶进行亲和层析

蚯蚓纤溶酶(Earthworm fibrinolytic enzymes)有多种同工酶,分离纯化相对比较困难.我们采用壳聚糖作为基质,大豆胰蛋白酶抑制剂为配体,戊二醛为偶联剂,分别研究了酸性和碱性条件下对蚯蚓纤溶酶的纯化效果.实验表明经壳聚糖为载体所制备的亲和吸附剂对蚓激酶具有较高的分离纯化选择性.并且在酸性条件下提取比在碱性条件下提取所得同工酶要少.     

立体异构和羧基甲酯化对PDZ结构域抑制剂与nNOS PDZ相互作用的影响

ZLc-002及其类似物是一系列PDZ结构域抑制剂,它们能够不同程度地阻断nNOS与CAPON之间的偶联,从而表现了不同的抗焦虑活性(PDZ指最早发现含有此结构域的三个蛋白质的首字母缩写,分别是:post synaptic density protein-95,PSD-95;drosophila disc large tumor suppressor gene,DLG;zonula occludens-1 protein,ZO-1。即:突触后密度蛋白95,果蝇光盘大肿瘤抑制剂,和闭锁小带蛋白1。nNOS:neuronal nitric oxide synthase,即神经元型一氧化氮合酶。CAPON:carboxy-terminal PDZ ligand,即神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ结合配体)。为了探究立体异构和羧基甲酯化对PDZ结构域抑制剂与nNOS PDZ之间相互作用的影响,分别应用分子对接、分子动力学模拟,以及传统的和可极化的分子力场,对比研究了3个PDZ结构域抑制剂与nNOS PDZ之间的相互作用方式和强度。研究发现,羧基甲酯化的R型构象的PDZ结构域抑制剂与nNOS PDZ结构域相互作用最强,这与实验上测得的CAPON-nNOS解偶联率相一致。还计算和分析了抑制剂与nNOS PDZ相互作用能的不同分项,结果表明:立体异构和羧基酯化对PDZ结构域抑制剂与nNOS PDZ间的氢键相互作用具有重要影响,而对二者之间的范德华相互作用影响较小。