Phen-铜(II)-氨基酸配合物的合成、表征及其SOD活性

合成了3个新的SOD模拟配合物：[Cu(Phen)(L-Gln)(H₂O)]Cl·2H₂O (1)、[Cu(Phen)(L-Ala)(H₂O)]Cl·4H₂O (2)、[Cu(Phen)(L-Thr)(H₂O)]Cl·2H₂O (3) [Phen(1，10-邻菲咯啉)、L-Gln(谷氨酰胺)、L-Ala(丙氨酸)、L-Thr(苏氨酸)]。用元素分析、摩尔电导、红外光谱、紫外-可见光谱对配合物进行了表征。用X-射线衍射对配合物[Cu(Phen)(L-Gln)(H₂O)]Cl·2H₂O的晶体结构进行了测定。用氯化硝基四氮唑蓝(NBT)光还原法对这3个配合物催化歧化超氧阴离子自由基(O₂^{- ·})的能力进行了测定。结果表明：这些配合物具有较高的SOD活性， 催化速率常数K_Q分别为1.58 × 10⁷ mol^-1·L·s^-1、5.65 × 10⁷ mol^-1·L·s^-1、0.83 × 10⁷ mol^-1·L·s^-1。     

电泳中介微分析法测定超氧化物歧化酶

基于超氧化物歧化酶(SOD)对邻苯三酚自氧化的抑制作用和电泳中介微分析(EMMA)技术建立了一种测定SOD的新方法。采用“三明治”式不同pH缓冲液部分填充法,有利于邻苯三酚的自氧化反应,便于观察SOD的抑制作用,有利于反应产物与反应物的分离。对溶液填充模式、反应条件等实验参数进行了优化。在最优条件下,邻苯三酚自氧化反应的抑制率I与SOD浓度C在1.00×102~6.00×102μg/L范围内呈良好的线性关系,回归方程为:I(%)=0.0895C(μg/L) 17.633(r=0.9973)。     

喹诺酮类药物与铜锌超氧化物歧化酶的相互作用及其对酶活性的影响

利用紫外-可见吸收光谱和荧光光谱,在pH=7.4的生理条件下,研究了喹诺酮类药物(依诺沙星、环丙沙星和诺氟沙星)与铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)的相互作用。喹诺酮类药物能使CuZnSOD的荧光发生猝灭,其猝灭机理为静态猝灭。通过实验计算了不同温度下喹诺酮类药物与CuZnSOD的结合常数和结合点数。依据Frster非辐射能量转移理论,得到供体与受体间的距离。根据热力学参数确定了它们之间的主要作用力类型是静电引力。进一步证实了活体动物兔子注射环丙沙星后,血液中铜锌超氧化物歧化酶活性显著降低。     

24元大环双核铜配合物的合成及对超氧化歧化酶的模拟

合成了三个24元大环双铜(II)配合物作为SOD模拟物, 配体由2, 6-二乙酰基吡啶与3-氧杂戊烷1, 5-二胺缩合而成, 以SCN^-, N~3^-, im^-桥联, 其中前面两个桥联双铜(II)配合物是新配合物。用多种物理方法进行了表征, 并用EPR和电子光谱研究了桥基为im^-的配合物与N~3^-, SCN^-, F^-和Br^-的键合。其中N~3^-发生轴向配位, SCN^-使im^-断裂, 与SOD的键合作用类似, F^-, Br^对模拟物无明显作用。     

水杨酸与烟草铜锌超氧化物歧化酶的相互作用

利用邻苯三酚自氧化法监测了磷酸盐缓冲体系中水杨酸（SA）对超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响。通过荧光光谱法研究了水杨酸与超氧化物歧化酶的相互作用机制，求得两者结合的形成常数和配位数，使用Forster非辐射能量转移技术求出了两者的结合位置距色氨酸残基间的距离为2.60nm。     

微透析高效液相色谱法研究金属酶与小分子的相互作用

将微透析（microdialysis)高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC)联用技术应用于定量研究超氧化物歧化酶（superoxide dismutase)与组氨酸和组氨酸－金属离子配合物的相互作用。实验结果表明： Cu2Zn2SOD酶不仅与组氨酸，而且还可以与组氨酸－Co(Ⅱ）和组氨酸－Ni(Ⅱ)相互 作用，Cu2Zn2SOD酶中的部分Cu(Ⅱ)和Zn(Ⅱ)被诱导和置换出来，并相应地影响了 酶的活性；组氨酸－金属离子配合物的作用比组氨酸强，酶活性降低也更明显；酶 中结合的外来金属离子的量比从酶上被诱导和顶替下来的金属离子的量要少，说明 在溶液中有脱辅基酶的存在。     

Expression and Characterization of an Active Chimeric Protein of Human Extracellular Superoxide Dismutase and hCuZnSOD in Pichiapastoris

Mammalian cells express two isoforms of Cu-and Zn-containing superoxide dismutases(SODs),CuZnSOD and extracellular SOD(EC-SOD),involved in the defense system against reactive oxygen species(ROS).The two SODs have structurally homologous centre domain with distinct N-and C-terminuses,resulting in the different characteristics of the structure and function of the two molecules.We generated a hybrid SOD molecule(namely hySOD) via replacing the N-and C-terminuses of hCuZnSOD with the counterparts of hEC-SOD.The...     

新型水溶性大环席夫碱锰(Ⅱ)配合物的合成及其模拟超氧化物歧化酶的活性研究

合成了-系列新型水溶性大环席夫碱配体(Lx,x=2～4)及其锰(Ⅱ)配合物(MnLx),其结构经UV-Vis,<'1>H NMR,IR,MS和元素分析表征.采用邻苯三酚自氧化法测定了MnLx的超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果表明,MnLx均具有良好的SOD活性.     

具有模拟SOD功能的大分子

生命活动中用于维持生物体内超氧阴离子自由基动态平衡的超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)是一类金属酶,属于典型的生物大分子金属络合物,因其在生命活动中所起的重要作用而备受关注。目前,有关SOD的模拟已从小分子化合物的模拟,走向大分子环境与活性中心相结合的系统模拟。本文从高分子化合物角度对模拟SOD的研究进展作一综述,以期为设计并开发具有生物相容且高活性的新型高分子抗氧化剂提供新思路。天然大分子有蛋白质与多肽、多糖、分子聚集体,目前所采用的蛋白质(多肽)是性能稳定的天然蛋白质或通过基因重组技术生物合成的蛋白质或多肽,所采用的多糖类物质主要有右旋糖酐、羧甲基纤维素、壳聚糖等。小分子活性化合物(如金属卟啉、新型肟类为配体的同核与异核复合物、salen型金属配合物等)通过与这些天然大分子结合,在提高活性的同时也改善了其稳定性。将活性小分子物质与分子聚集体(如胶束、脂质体)结合制得的SOD模拟物可以模拟天然SOD在体内的环境,提高抗氧化活性和体内循环时间。合成高分子模拟SOD的工作主要集中于高分子接枝金属配合物的研究,其中典型的合成高分子有聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)、聚L-赖氨酸、聚(苯乙烯-马来酸酐)、聚(环己烷-1,4-丙酮二亚甲基缩酮)、氯化聚苯乙烯树脂、聚乳酸和一些嵌段共聚物,其抗氧化活性与金属配体有关,是一类潜在的抗癌药物。     

水溶性席夫碱型锰配合物的合成、表征及其模拟超氧化物歧化酶活性研究

以水杨醛为母体, 与胺类化合物缩合形成席夫碱配体, 用分子自组装法合成了一系列水溶性席夫碱型金属锰单核、双核配合物. 通过元素分析、红外光谱对配合物进行了表征, 采用邻苯三酚自氧化法测定了配合物的超氧化物歧化酶(SOD)活性. 结果表明, 这些水溶性锰配合物具有良好的SOD活性.