苗药刺梨SOD测定及其保存方法探讨

本实验采用邻苯三酚(PR)自氧化法测定不同干燥方法得刺梨样品中SOD的活力, 用透析法除去样品中的VC, 同时采用碘量法检测透析液中Vc的含量. 结果表明:经冷冻干燥获得的刺梨样品中SOD的活力值最大, 样品通过24h透析后, 可基本排除Vc含量对SOD活力测定的影响.     

猪血超氧化物歧化酶纯化与分析─—一种铜盐沉淀新工艺

本文建立铜盐沉淀、选择热变性、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ—１００层析方法从猪血中提纯超氧化物歧化酶，纯化倍数１８６．５．该酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈一蛋白带．纯酶的比活性为９３２５ｕ／ｍｇ—ｐｒ（邻苯三酚—３２５法）．通过ＳＤＳ—ＰＡＧＥ法测出分子量为３００００．该酶对热稳定，纯酶液的最大吸收波长为２６０ｕｍ．     

几种经济食品超氧化物歧化酶活力的测定

利用超氧化物歧化酶(Suparoxidedismutas,e简称SOD)测试盒对市售的几种经济食品中超氧化物歧化酶的活性进行了分析测定,结果表明:玉米、大蒜、绿豆、饭豆、芝麻、黄豆等的提取液中均含有SOD,其活性分别为:216.98,184.34,117.10,171.59,144.63,60.91(U/mgprot),其中的玉米SOD活力比较高.为人们选取富含SOD而利于机体健康的经济食品提供相关线索.     

芥篮叶超氧化物歧化酶的分离提纯

本文建立硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100层析,DEAE 纤维素(DE-52)拄层析方法从芥篮(B.alboglabra Baileg)叶肉中提纯超氧化物歧化酶,纯化倍数45.2,比活力97.3u/mg-pr(肾上腺素测定).南 DEAE-DE52层折获得的 SOD 活性部分,按 Weber与 Osborn 法作 SDS-PAGE,呈现单一斑带,分子量为13,000.此酶对热稳定性不高,70℃保温90min,活力全部丧失.纯酶液的最大吸收波长为204nm,芥篮叶中有四种 SOD同工酶.     

超氧化物歧化酶模拟物--铜(Ⅱ)氨基酸配合物的初步研究

为了获得具有较高超氧化物歧化酶(SOD)活性的物质,合成了铜(Ⅱ)甘氨酸配合物[Cu(gly)2]和铜(Ⅱ)谷氨酸配合物[Cuglu·H2O];对模拟物进行了红外光谱检测和元素分析,初步确定了它的分子组成;用改进的核黄素光还原氯化硝基四氮唑蓝(NBT)法测定了同一温度下不同浓度以及相同浓度不同温度下模拟物的活性,并与天然SOD的活性进行了比较.实验结果表明:合成的配合物在水溶液中具有显著的SOD样活性.     

Cu(II)单核咪唑配合物的晶体和电子结构及生物活性

采用 X射线衍射方法测定了 Cu(II)单核配合物 Cu(II) (im) 4· 2 Cl O4 (C12 H16N8O8Cl2 Cu)的晶体结构 ,晶体学参数为 Mr=5 3 4 .78,单斜晶系 ,a=0 .83 5 (3 ) ,b=1 .6 6 4 (6 ) ,c=0 .81 8(3 )nm,β=1 1 0 .70 (6 ) o,V=1 .0 6 3 (7) nm3 ,Dc=1 .6 70 Mg/ m3 ,Z=2 ,F(0 0 0 ) =5 4 2 ,μ=1 .3 3 6mm-1,空间群为 P2 (1 ) / c.利用 Gaussian94量子化学程序包 ,在 B3 LYP/ L ANL2 DZ基组水平上对配合物进行了从头计算 .由其分子轨道能量、电荷分布和前线轨道的贡献可以预见 ,Cu(II)(im) 4· Cl O4 能与超氧自由基反应 ,与活性测试结果相符 .     

大豆黄素对美洲鳗生长及肝、肠组织中几种代谢酶活性的影响

为探讨大豆黄素对鳗鱼生长的影响,实验选用美洲鳗(Anguilla rostrata)幼鳗,分别饲喂含大豆黄素的质量比为0、5×10-6、10×10-6、20×10-6和40×10-6的饲料,测定增重率、肝脏系数、常规体成分,肠道蛋白酶和淀粉酶活性,肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性及酸性磷酸酶(ACP)活性.结果表明:大豆黄素处理组的鳗鱼肝脏系数、体增重率、鱼体成分与对照组的差异不明显;饲料中大豆黄素质量比为40×10-6剂量时肠道蛋白酶活性显著增加,随大豆黄素剂量增加,淀粉酶活性随之增加,且20×10-6、40×10-6剂量时肠道淀粉酶活性显著增加;20×10-6、40×10-6剂量时大豆黄素使肝中SOD活性显著升高,10×10-6剂量时ACP活性显著高于对照组;其余各组与对照组差异不明显.说明大豆黄素没有明显促进鳗鱼生长,但提高了消化酶活性,且通过提高体内的抗氧化活性和ACP活性而增强鱼体的抗应激能力.     

人EC-SOD的克隆及高效表达

将编码人胞外超氧化物歧化酶（EC-SOD）成熟肽的cDNA插入含T7启动子的质粒pET-28a( )中构建表达质粒pET-EC-SOD，表达菌株用1mmol/L异丙基硫代-β-D半乳糖苷（IPTG）诱导表达3h-5h后，产生较多的重组人EC-SOD，并形成包含体。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析表明，表达的重组蛋白占菌体可溶性蛋白质的26%以上。经纯化和复性后的EC-SOD比活为每毫克纯化酶蛋白1200U。将EC-SOD转染粉纹夜蛾Tn-5Bl-4细胞，经扩增后在细胞内进行表达。SOS-PAGE分析结果表明，粉纹夜蛾细胞中表达一相对分子质量约为28ku的特异蛋白质带，Western blot分析表明，该特异条带即为EC-SOD蛋白，连苯三酚自氧化法测得表达产物比活为每毫克细胞裂解物260U。     

温度对重组大肠杆菌生长及外源蛋白表达的影响

对重组大肠杆菌（E.coli）BL21（DE3）发酵生产rhCu/Zn-SOD的诱导温度进行了优化，考察了37℃和30℃下重组菌的生长规律及产物表达。在5L自控发酵罐中的发酵结果表明：较低温度时菌体的比生长速率较低，菌体活性与质粒稳定性有很大程度的改善，外源蛋白稳定性与可溶性也有一定的提高；30℃诱导时rhCu/Zn-SOD的酶活性最高，每毫升发酵液的酶活力为4757U，约为37℃诱导时的2.7倍。     

二硫苏糖醇对小鼠运动耐力、肝组织自由基代谢、肝糖原含量及血清GPT活性影响研究

研究了二硫苏糖醇(DTT)对小鼠运动能力的影响,并以牛磺酸(Tau)和维生素C作阳性对照.结果表明,与牛磺酸组和维生素C组比较,服DTT组小鼠的游泳时间明显延长(P<0.05);小鼠游泳力竭即刻肝细胞MDA含量明显降低(P<0.05),血清GPT活性下降幅度比牛磺酸组和维生素C组大;肝组织SOD活性升高幅度大于牛磺酸组,小于维生素C组.这说明含有双羟基双巯基的二硫苏糖醇是一种有效的自由基清除剂,可减少运动后因脂质过氧化而产生的内源性自由基对机体的损伤,保护细胞膜的完整性,具有增强抗氧化酶活力和提高小鼠运动能力的作用.