Hydrogen peroxide biosensor based on electrodeposition of zinc oxide nanoflowers onto carbon nanotubes film electrode

A new amperometric biosensor for hydrogen peroxide was developed based on adsorption of horseradish peroxidase at the glassy carbon electrode modified with zinc oxide nanoflowers produced by electrodeposition onto multi-walled carbon nanotubes （MWNTs） film. The morphology of the MWNTs/nano-ZnO electrode has been investigated by scanning electron microscopy （SEM）, and the electrochemical performance of the electrode has also been studied by amperometric method. The resulting electrode offered an excellent detection for hydrogen peroxide at -0.11 V with a linear response range of 9.9×10^-7 to 2.9×10^-3 mol/L with a correlation coefficient of 0.991, and response time 〈5 s. The biosensor displays rapid response and expanded linear response range, and excellent stability.     

Rhus laccase catalysis and product characterization of 1,2-dimethoxyphenol in organic solutions

Dimethoxyphenol was a widely used substrate in determination of laccases activity. It was surprised, however, that the products of it had not been completely determined until now. Studies were thus conducted on Rhus laccase （RL） and immobilized Rhus laccase （IRL）-catalyzed oxidation of 2,6-dimethoxyphenol （DMP） in water-organic solvent systems. Only one product, 3,3′,5,5′- tetramethoxy-1 ,1′-biphenyl-4,4′-diol （TMBP）, was produced by RL catalysis, and it was thoroughly characterized by FT-IR, NMR and GC-MS, etc.     

刀豆球蛋白层层自组装双酶电极对芳香胺物质的检测

基于生物识别组装方法将辣根过氧化物酶(HRP)和葡萄糖氧化酶(Gox)固定在金电极表面制备了HRP/Gox双酶多层膜电极.HRP/Gox双酶电极通过Gox催化氧化葡萄糖"原位"产生过氧化氢的方式分析检测芳香胺物质.探讨了葡萄糖浓度和酶组装层数对双酶电极电流响应的影响.在优化条件下,制备的双酶电极在p-苯二胺的浓度为7.6 ～53.2 μmol/L时有良好的线性响应,灵敏度为146.04 mA·L/mol.常见的干扰物葡萄糖和抗坏血酸对该双酶电极无干扰.     

基于可控相转变温度热敏高分子的人IgG酶联荧光免疫分析

以温度敏感高分子聚N－异丙基丙烯酰胺－丙烯酰胺[P(NIP-AA)]作为载体,建立了酶联荧光免疫分析人IgG的新方法。AA摩尔含量为8％的高分子P(NIP-AA)其临界溶解温度为37 °C。竞争型免疫测定中,被固定的IgG和标准溶液（或样品）在33 °C均相条件下竞争性地与辣根过氧化物酶标记抗体反应,升高温度分离出高分子免疫复合物,沉淀重新溶解后通过偶联过氧化氢与对羟基苯乙酸的荧光反应进行定量,线性范围为100-1000 ng/mL,检测限为2.0 ng/mL。方法灵敏、快速操作简便,且提高了免疫反应效率。此外,灵敏度与用传统微孔板做载体相似,但测定时间更快（从100-120分钟减少到30分钟）。该法用于测定人血清中IgG的含量,结果满意。     

酶在有序介孔材料上的固定化

本文回顾了近年来有序介孔材料用于酶的固定化的研究进展;对比了不同固定化方法对介孔材料固定化酶活性的影响以及各种固定化方法的优缺点;分析了影响酶在有序介孔材料上的固定化因素,并分别对这些影响因素进行了讨论;对酶在有序介孔材料上固定化的发展和潜在的应用进行了讨论,指出介孔材料固定化酶的潜在应用.     

壳聚糖-Cu^2＋复合物膜固定葡萄糖氧化酶用于葡萄糖传感

利用壳聚糖(CS)对Cu2 的配位吸附作用,制得壳聚糖-Cu2 复合膜修饰电极,进一步通过Cu2 与蛋白质的配位作用,再将葡萄糖氧化酶(GOD)固定在金电极上制得GOD-Cu2 -CS/Au电极.该酶电极检测葡萄糖的线性范围为0.03～2.5 mmol·L-1,线性相关系数为0.997,检出限(S/N=3)为1 μmol·L-1.以电化学石英晶体微天平(EQCM)技术监测了各修饰过程.     

扇形游仆虫谷胱甘肽过氧化物酶基因克隆和序列特征分析

采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术,对纤毛虫原生动物扇形游仆虫(Euplotes vannus)谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)cDNA特征进行分析.获得扇形游仆虫GPx cDNA全长序列,为672 bp,编码182个氨基酸,属硫氧还蛋白超家族,含有3个催化残基和3个特征性基序.氨基酸序列与其他纤毛虫物种同源性较高,亲缘关系较近.     

响应面法酶解剩余活性污泥中微生物蛋白质研究

从剩余活性污泥中提取及分解蛋白质是有效减少污泥二次污染的重要途径．以剩余活性污泥为原料,采用酶解法分解蛋白质,分析了体系ｐＨ值、酶解时间、酶解温度、酶用量、液固比对蛋白质分解率的影响,并应用响应面分析法优化蛋白质分解条件．结果表明:以蛋白质分解率为响应值,经实验后最终确定最优条件为:pH为7.0,液固比4.0:1.0,酶解时间为4.0h,酶解温度为58.0℃,酶用量（E:S）为3.0%,分解率达53.29%,接近响应面模型所预测的分解率．     

星海链霉菌卤化酶重组蛋白在大肠杆菌中可溶表达

大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)是表达异源蛋白的良好宿主,但常遇到蛋白表达产物不可溶的困难.在对来自星海链霉菌的卤化酶基因sinH进行大肠杆菌异源表达时,为克服蛋白表达产物可溶性低的问题,探讨了不同载体对蛋白可溶表达的影响.利用pET28a进行SinH表达时不能得到可溶的目标蛋白;使用含有泛素标签及内含肽的载体pHUIE实现了卤化酶蛋白SinH的可溶表达,但纯化后纯度不高;利用带有链霉菌分子伴侣蛋白基因的载体pET28a-SinH与pETcoco-pL1SL2在E.coli BL21(DE3)中共表达,在30℃,0.1mmol/L IPTG诱导条件下表达4h,成功获得大量可溶蛋白,使用亲和层析(Ni-NTA)纯化,获得了较纯的目标蛋白SinH,上述研究结果为在大肠杆菌中进行其他链霉菌蛋白的可溶表达提供了参考.