静电辅以激光对酿酒酵母菌的诱变效应研究

利用高压静电场辅以激光对甘蔗糖密工业生产用酿酒酵母菌进行处理.把酵母菌糖密酒精进行发酵,利用气相色谱仪对产生的乙醇含量进行分析.实验结果表明,与单一高压静电场和单一激光作用相比,高压静电场辅以激光对酿酒酵母菌具有明显的生物刺激作用.初步找到乙醇含量具有较大变化的高压静电场和激光变异菌株;将高压静电场辅以激光变异菌株的乙醇脱氢酶同工酶的比较,证实了高压静电场辅以激光对酿酒酵母菌的诱变作用明显.     

3个地理种群蛤蚧不同组织同工酶分析

采用垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法,比较泰国、广西和越南地理蛤蚧(G ekko g ecko)种群的肌肉、心、肝、肺、胃、肠、性腺、肾等8种组织的乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶(EST)和乙醇酸脱氢酶(ADH)同工酶。结果表明:广西种群和越南种群的LDH同工酶谱带在肌肉、心脏、肝脏、肺、胃和肾组织中完全相同,泰国种群各种组织中的LDH同工酶与广西和越南种群相比差异较大,主要表现在有较多的亚带,三个不同地理种群的8种组织几乎均表现出明显的5条LDH同工酶主带,但不同种群不同组织的谱带着色深浅不同;各组织EST同工酶谱无论从带型,谱带着色深浅来看,泰国种群均与其它两个种群差别较大;三个种群8种组织ADH同工酶的带型基本相同,迁移率也大致相同,但谱带着色深浅不同。     

青海湖裸鲤和鲤鱼组织乳酸脱氢酶同工酶比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)对青海湖裸鲤和鲤鱼的血清及组织乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行了比较研究。结果表明，青海湖裸鲤的血清及组织LDH共表现出LDHF4、LDHA4、LDHA2B2、LDHB4和LDHE4 5种主要同工酶，而鲤鱼共表现出LDHF4、LDHA4、LDHA2B2和LDHB4 4种主要同工酶，并且LDH同工酶在种间和种内不同组织中均表现出分布特异性。     

秀丽隐杆线虫胆固醇7,8-脱氢酶在大肠杆菌中的表达

胆固醇7,8–脱氢酶是参与胆固醇代谢的还原酶,可以将胆固醇转化为7–脱氢胆固醇(合成维生素D3的重要中间体).合成秀丽隐杆线虫的胆固醇7,8-脱氢酶基因daf-36,与具有T7强启动子的载体pET32a(+)连接后,成功构建pET32a-daf-36表达质粒,转入大肠杆菌表达系统E.coli BL21(DE3)和E.coli Rosetta(DE3),经过IPTG诱导培养,蛋白质电泳图谱及质谱结果表明此酶得到了高效表达.     

枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

利用PCR技术扩增得到来源于枯草芽孢杆菌的葡萄糖脱氢酶基因片段，并构建重组质粒pUC-T-GDH，然后将基因片段克隆于大肠杆菌表达载体pBV220中．得到表达质粒pBV-GDH．葡萄糖脱氢酶在含有表达质粒的基因工程菌株中得以诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳及薄层扫描结果表明，经诱导表达的葡萄糖脱氢酶约占基因工程菌株总蛋白的45％．葡萄糖脱氢酶活力测试表明，基因工程菌株无细胞抽提液中葡萄糖脱氢酶的活力为7.8U／毫克，约为对照组的30倍．实验结果初步说明，广泛应用于工业化生产的葡萄糖脱氢酶可以在基因工程菌株中得以大量表达并维持较高活力．     

LD含量和LDH、ACP、ALP、TCHE活性在有氧运动影响下的变化

为了探讨有氧运动对人体在不同功能状态下血乳酸（LD）代谢和乳酸脱氢酶（LDH）、酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（ALP）、乙酰胆碱脂酶（TCHE）活性的影响，对12名业余长跑大学生和12名普通大学生进行了对比研究，结果发现：安静时，血清LD含量、LDH、ACP活性无组间差异，长跑组ALP活性低于对照组，而TCHE活性高于对照组（P＞0.05）；定量负荷后，长跑组血清LD含量明显低于对照组、LDH活性明显高于对照组（P＜0.05），ACP活性高于对照组、ALP活性低于对照组（P＞0.05），TCHE活性无组间差异；力竭性运动后，长跑组LD含量和LDH活性极明显高于对照组（P＜0.001），TCHE活性高于对照组（P＞0.05），ACP、ALP活性无组间差异，以上表明长跑运动对机体在运动状态下的血乳酸代谢和LDH活性有显著的影响，但对ACP、ALP、TCHE活性无明显作用。     

引入青海省小尾寒羊和本地杂种羊心钠素含量和乳酸脱氢酶活性的测定

对引入青海省小尾寒羊和本地杂种羊心钠素含量和乳酸脱氢酶活性进行了测定,结果:心钠素含量分别为(46540±16981.25)pmol/L和(47742.5±16217.5)pmol/L;乳酸脱氢酶活性分别为(703.69±348.76)U/L和821.93±670.0U/L,差异不显著(P>0.05)。表明引入青海省的小尾寒羊已适应高原低氧环境。     

氯化钴对人eNOS基因启动子转录活性的影响

目的:建立氯化钴诱导的人脐静脉血管内皮细胞-12(HUVEC-12)缺氧模型,研究人血管内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)基因的启动子活性变化.方法:用含不同浓度氯化钴的培养基培养细胞,检测细胞培养上清中的乳酸脱氢酶(LDH)含量;将已构建的pGL2-eNOS-p质粒转染HUVEC-12细胞,利用双荧光素酶报告基因技术检测在不同浓度氯化钴和不同作用时间下的eNOS启动子转录活性.结果:氯化钴刺激下HUVEC-12细胞培养上清的LDH含量随氯化钴作用浓度增加而提高;氯化钴刺激后转染细胞的eNOS启动子活性呈现随氯化钴剂量增加而升高的趋势,随作用时间的延长而上升的趋势.结论:成功建立氯化钴诱导HUVEC-12细胞缺氧的体外模型.     

盐生杜氏藻的完整叶绿体分离

盐生杜氏藻(Dunaliella salina)是世界上最耐盐的一种单细胞真核绿藻,可在含0．1～5．0mol／L NaCl的培养液中正常生长．盐生杜氏藻细胞内的主要调渗物质是甘油,在甘油代谢途径中,3-磷酸甘油脱氢酶是一个关键酶．近年来的研究表明杜氏藻(Dunaliella tertiolecta)细胞质和叶绿体中都存在3-磷酸甘油脱氢酶的同工酶,且叶绿体上的同工酶与渗透调节作用直接相关,为了解D．satina中3-磷酸甘油脱氢酶同工酶的细胞定位和分布,我们通过冰浴超声波破碎和蔗糖密度梯度离心,获得盐生杜氏藻的完整叶绿体,用相差显微镜镜检、酶的活性分析等方法对其完整性作了初步分析。     

铜绿假单胞菌PAO1亚精胺脱氢酶SpdH的表达、纯化和初步晶体学研究

铜绿假单胞菌是一种具有很强环境适应性的机会致病菌,感染后通常很难治愈从而造成很严重的后果.聚胺类化学物质在很多种生物体内广泛存在,并且在细胞内发挥多种重要的功能.铜绿假单胞菌 PAO1可以利用聚胺类物质作为菌体生长所需的唯一的碳源和氮源,亚精胺脱氢酶(SpdH)在铜绿假单胞菌亚精胺代谢过程中发挥重要的作用.本研究在大肠杆菌中成功表达了可溶性SpdH蛋白,并经过多种方法纯化后筛选获得了蛋白质晶体,通过X射线衍射实验收集到分辨率达到0.185 nm的衍射数据,并使用 HKL2000软件对衍射数据进行了处理,这些数据为SpdH结构的解析奠定了基础.