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511.
结核分支杆菌H37Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以结核分支杆菌H37Rv基因组为模板,扩增了该菌株的莽草酸脱氢酶基因aroE,通过在大肠杆菌BL21(DE3)pLYS中表达,纯化出可溶性的重组结核分支杆菌莽草酸脱氢酶(SD). 对其酶学性质测定分析表明:在辅酶NADPH作用下该酶可催化还原3-脱氢莽草酸生成莽草酸,最适pH值为11,最适温度为63 ℃,比活性8.26×104 U/mg. Mg2+,Ni2+,Zn2+等金属离子及NP40、TritonX-100等变性剂对其酶活有一定的促进作用,而SDS则强烈抑制该酶活性. 应用圆二色仪初步测定了重组蛋白的二级结构,重组SD的二级结构中大约有29.2%的α螺旋,9.3%β折叠,32.7%β转角,28.8%无规卷曲. 结核分支杆菌H37Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆,为该酶的晶体结构分析、免疫学研究及抗结核药物靶点的筛选奠定基础. 相似文献
512.
壬基酚或双酚A对原代培养鲫肝细胞毒性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
以纯化的鲫(Carassius auratus)肝细胞为试验对象,研究不同浓度壬基酚(NP)或双酚A(BPA)对肝细胞增殖、乳酸脱氢酶(LDH)释放,丙二醛(MDA)含量,谷胱甘肽-s转移酶(GST),7-乙氧异吩噁唑酮-O-脱乙基酶(EROD)活性的影响.结果表明,鲫肝细胞暴露于不同浓度的NP或BPA 24 h后,随着NP、BPA浓度的升高,细胞增殖率明显降低(P〈0.05);肝细胞LDH的渗出量、MDA、GST及EROD活性均显著增加(P〈0.05).表明,NP或BPA对鲫肝细胞增具有一定的毒性作用.而且BPA对肝细胞的毒害作用要弱于NP(P〈0.05). 相似文献
513.
用密度泛函理论研究了新型二阶非线性光学晶体-L苹果酸脲.采用一些密度泛函理论方法计算了分子结构,比较得出PBEPBE/6-31+G(d,p)是计算分子结构的一种最佳的方法,然后给出了其红外和紫外可见光谱,并与实验结果作了比较,还结合分子轨道布局分析了紫外可见光谱. 同时结合极化连续模型利用密度泛函理论方法研究了L苹果酸脲在水中的几何结构及红外和紫外可见光谱,并指出了溶剂化效应对其性质的影响. 相似文献
514.
经过连续易错聚合酶链式反应(Error-Prone PCR)向克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)甘油脱氢酶基因中引入突变,并构建突变文库.依据突变体催化番红O显色的特性,采用琼脂平板法和96微孔板法相结合的高通量筛选方法,成功获得突变体gldA-74,其酶活力是亲本重组酶的2.73倍.通过软件对突变体gldA-74酶基因和亲本重组酶基因进行分析对比,发现突变体gldA-74酶基因发生了一处点突变(A964T),该突变使一处氨基酸被取代.将亲本重组酶和进化酶的高效表达产物经Ni柱纯化后,酶学性质的测定结果表明,甘油的Km值由0.58 mmol.L-1升高至0.63 mmol.L-1,而NAD的Km值由0.74 mmol.L-1升高至0.77mmol.L-1,并且酶的最适pH值由原来的11.5升高至12.5,而最适温度由65℃降至55℃. 相似文献
515.
目的探讨重组人Elafin对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型,给予不同浓度的重组人Elafin对其进行治疗,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)含量,并对肝脏病理组织学改变进行观察。结果缺血再灌注后大鼠肝组织损害较重,血清ALT、AST及LDH水平明显升高(P0.001),若手术前给予大鼠一定浓度的重组人Elafin可对肝脏缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。结论重组人Elafin对肝脏缺血再灌注损伤有一定的保护作用。 相似文献
516.
本文采用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳法分别分析了黄兔尾鼠(Lagurus lutcus Eversmann)和草原兔尾鼠(Lagurus lagurus Pallas)的八种组织器官(肝脏、心脏、肌肉、肾脏、胃、脑、肺和横膈)中的乳酸脱氢酶(LDH)和酯酶(EST)同工酶。实验结果表明,(1)在同种动物的不同组织中,同工酶谱带及活性表现不同,具组织特异性。(2)异种动物的相同组织中,每种同工酶的谱带和活性不同,具有种间特异性。(3)在异种动物中,EST同工酶的差异性大于LDH同工酶的差异性;因此,EST同工酶可作为区分亲缘关系相近物种的遗传指标。(4)黄免尾鼠似乎是通过增加LDH同工酶的B亚基和EST同工酶的活性来适应干旱及半干旱的荒漠生境。 相似文献
517.
518.
519.
硫酸铵沉淀及反向抽提法纯化乳酸脱氢酶 总被引:2,自引:0,他引:2
采用一种经修改的硫酸铵沉淀及反向抽提法,从猪心肌粗提液中纯化得比活性为60 u/mg的乳酸脱氢酶(LDH),纯化倍数为50倍,酶活性回收为78%。该方法成本低,特别适用于大规模纯化乳酸脱氢酶。 相似文献
520.
吡咯烷生物碱新手性合成子的合成 总被引:1,自引:1,他引:0
报道了从(S)-苹果酸出发,立体选择性地合成五个新吡咯烷生物碱手性合成子.观察到C_4-位上保护的羟基对C_5-位手性中心的形成具有良好的不对称诱导作用. 相似文献