镍离子与酵母乙醇脱氢酶的相互作用

不同体系中, 金属离子与蛋白以不同的结合方式相互作用. 酵母乙醇脱氢酶是一个含锌金属酶, 它可催化乙醇脱氢为乙醛的反应. 本文应用紫外-可见光谱、荧光光谱、差示扫描量热法等技术研究了二价镍离子与酵母乙醇脱氢酶的相互作用. 镍离子与酶结合后在320 nm出现了紫外吸收带, 同时荧光光谱反映了酶的构象变化, 紫外与荧光光谱均展现了结合过程的双相动力学. 镍离子与酶的相互作用导致了酶由四聚体向二聚体的解离; 在酶热变性过程中, 镍离子增加了乙醇脱氢酶的变性温度和变性焓. 研究工作揭示了镍离子与酶相互作用复杂和深层的作用机制.     

硫代苹果酸作为络合滴定掩蔽剂的研究

本系统地研究了硫代苹果在络合滴定中的掩蔽性能，发现它在ｐＨ１．５～１０可作为Ｓｎ＾４＋、Ｓｂ＾３＋、Ｔｂ＾３＋、Ｂｉ＾３＋、Ｃｕ＾２＋、Ｈｇ＾２＋和Ａｇ＾＋等的掩蔽剂（在ｐＨ２～３．５还可掩蔽Ｆｅ＾３＋）。掩蔽上述离子后，可在ｐＨ２．５～３用Ｔｈ＾４＋回滴ＥＤＴＡ，在ｐＨ５～６用ＥＤＴＡ滴定Ｚｎ＾２＋或Ｙｂ＾３＋等，或在ｐＨ１０用ＥＤＴＡ滴定Ｍｇ＾２＋、Ｃａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋＋Ｃａ＾２＋和Ｍｎ＾     

厌氧对植物乳杆菌R23抗逆性及枇杷酒 MLF的影响

研究了植物乳杆菌R23在枇杷酒中的生长特性及厌氧条件、 接种量对其生长及苹果酸乳酸发酵（MLF）的影响. 结果表明, 植物乳杆菌R23的菌体生物量在枇杷酒中总体呈下降趋势, 厌氧条件能明显提高R23菌细胞在枇杷酒中的存活率和MLF降酸效果; 随着接种量的增加, 菌体生物量的衰减速率和降酸速率增大. 枇杷酒生物降酸以接种菌量1×108cfu·mL-1为宜, 25±1℃、 厌氧发酵2d即可将枇杷果酒中的苹果酸完全转化为乳酸.     

Colloid of Delaminated Layered Double Hydroxides： a Novel Type of LDH-based Catalyst

<正>The colloid of delaminated layered double hydroxides(LDHs),a new LDH-based catalyst,is described. The semi-heterogeneous delaminated colloidal MgPdAl-LDH,in which the total surface of catalytic site-bearing lamellae was rendered accessible for chemical reactivity,showed excellent catalysis toward Suzuki reaction.The turnover frequency of this catalyst for Suzuki reaction between bromobenzene and phenylboronic acid is about 8000 h~(-1).     

中空纤维膜固定化甲酸脱氢酶催化CO_2合成甲酸

以紫外光表面接枝改性的聚乙烯(PE)中空纤维膜为载体,采用共价结合的方式固定化甲酸脱氢酶(FDH),考察了CO2通入方式、溶液pH值、缓冲液种类和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的浓度对酶催化CO2合成甲酸反应的影响.结果表明,与加压法相比,CO2鼓泡法更有利于甲酸的生成;磷酸盐缓冲液优于Tris-HCl和盐酸三乙醇胺缓冲液;体系pH值对反应的影响较大,固定化FDH的最佳pH值仍为6.0,但pH耐受性增强;随着辅酶NADH浓度的增加,反应初速度加快,收率下降;游离酶和固定化酶的最大酶活分别为0.246和0.138mmol/(L.h);固定化FDH在4℃贮存两周后活性仅下降4%,而游离酶活性下降50%.FDH催化膜重复利用10次后,活性没有明显降低.     

金属组学：Wood—Ljungdahl通路中的金属蛋白／金属酶

本文概述了厌氧微生物的Wood-Ljungdahl通路及通路中的一组金属蛋白／金属酶,主要介绍该通路的来源、过程及通路中的四种金属蛋白,金属酶：甲酸脱氢酶、钻铁硫蛋白、乙酰辅酶A合成酶和CO脱氢酶．甲酸脱氢酶催化CO2和甲酸的可逆氧化还原,是CO2转化为甲酸进而转化为甲基四氢叶酸的关键金属酶;钴铁硫蛋白是该通路中的甲基转换器,接受甲基四氢叶酸的甲基之后再传递给乙酰辅酶A合成酶;CO脱氢酶催化CO2与CO之间的可逆氧化还原;乙酰辅酶A合成酶通过浓缩甲基、CO和辅酶A而催化乙酰辅酶A的合成．本文重点对这四种金属蛋白／金属酶的结构、性质、功能及催化机理的研究进展进行了综述．     

两种反胶束固定化酶的催化性质研究

探讨十六烷基三甲基氯化铵(CATC)-戊醇-辛烷反胶束体系固定化乳酸脱氢酶(LDH)和醇脱氢酶(ADH)的催化作用。试验了含水量、表面活性剂以及助溶剂浓度对于酶固载量的影响。对游离酶和固定化酶催化性质研究表明:LDH酶促反应的适宜p H值分别为9.2和9.0,适宜温度为51℃和29℃,米氏常数15mmol·L-1和2mmol·L-1;ADH酶促反应的适宜p H值为8.8和8.2,适宜温度为33℃和39℃,米氏常数4mmol·L-1和17mmol·L-1。应用反胶束固定化酶测定了试样中微量组分。     

纸芯片显色法同时检测乳酸脱氢酶和碱性磷酸酶

本文建立了一种基于纸芯片的乳酸脱氢酶(LDH)检测方法。实验优化了黄递酶(DIA)/碘硝基四唑紫(INT)显色体系检测LDH的条件,考察了方法的选择性,获得了较好的线性关系,并成功用于血清样品中LDH含量的测定。同时,结合DIA/INT和BCIP/NBT显色体系,通过构建一维、三维纸芯片,实现了LDH和碱性磷酸酶(ALP)的同时检测。两者同时检测时,颜色区分明显,相互之间干扰较小。纸芯片显色法操作简单、结果直观可见、效果良好。     

酶荧光毛细管分析法测定微量血清中乳酸脱氢酶活性

基于丙酮酸/还原型辅酶I/乳酸脱氢酶(LDH)/乳酸/氧化型辅酶I荧光猝灭体系和荧光毛细管分析技术,建立了可用于微量样品中LDH酶活性测定的方法。优化的测定条件为:激发及发射波长分别为350和460nm;测定温度为25℃;酸度为pH 6.5;NADH浓度为300μmol/L;丙酮酸浓度为1.2mmol/L。本方法的测定范围为50～1500IU/L,检出限为30IU/L,相对标准偏差2.1%～2.2%(n=10),回收率在96.4%～105%范围内。本方法操作简单,每次测定仅需样品2.0μL、试剂18.0μL,分析速度约为30样/h,利用本方法测定了微量血清中LDH的活性。     

聚苯胺用作乙醇脱氢反应中的电子传递介质

脱氢酶（ADH）在电化学氧化还原反应中是很重要的一种酶,但它在催化有机分子脱氢反应时需烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）参与,后者从底物接收电子生成还原形NADH.脱氢酶电极是根据NADH的电化学氧化产生的阳极电流构成的[1－3].然而NADH与裸体炭电极和铂金电极之间的直接电子传递是非常困难的,往往需一个相当高的过电位[4].另一个问题是生成物易将电极玷污[5,6].克服这些问题的方法是使用均相电子传递介质,例如在底物溶液中加入Meldola蓝、Nile蓝A和NMP＋甲替硫酸盐等[7－9],及复相电子传递介质,例如将镍六氰基高铁酸盐固…