基于黄酮骨架的“关-开”型荧光探针用于检测活细胞内丁酰胆碱酯酶

以间苯二酚为起始原料,设计合成了一种基于N,N-二甲胺基萘取代的黄酮母核(3)为荧光报告基团的“关-开”型丁酰胆碱酯酶(BChE)荧光探针(4a),并通过核磁共振波谱(NMR)和高分辨质谱(HRMS)进行了结构表征。结果表明,探针4a能够快速地对BChE产生特异性响应,在pH=8.0的磷酸盐缓冲液(PBS)中,574 nm处荧光强度明显增强,同时肉眼可见溶液颜色的改变。通过高效液相色谱(HPLC)和HRMS对响应机理进行了探讨,发现BChE可使探针的酯键发生断裂,生成具有强荧光的黄酮母核(3)。此外,探针4a可用于检测人肝癌细胞(HepG2)中的BChE并进行荧光成像。     

Research progress of the retrospective detection of organophosphorus nerve agent exposure using point-of-care testing techniqueEI北大核心CSCD

有机磷神经性毒剂(OPNA)是一类速杀性化学战剂,人员中毒后通过溯源检测来确定OPNA种类和剂量对于毒剂使用指证和人员救治非常重要。当前大部分溯源检测方法灵敏度高、特异性好,但因依赖大型设备限于实验室,不便于现场检测。随着现场快速检测(POCT)技术的发展和新识别分子的开发,大量OPNA中毒溯源现场检测技术被建立和应用。本文主要基于胆碱酯酶活性抑制、特异性识别和直接生化反应原理从3方面分析总结了OPNA中毒溯源POCT技术的研究进展和应用,展望了其未来发展趋势。     

有机磷对胆碱酯酶作用影响的生化分析

通过对有机磷抑制人乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶以及猪和牛丁酰胆碱酯酶活性的测定，发现人乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶对有机磷较为敏感，结果表明，该方法既灵敏又稳定。     

敌敌畏在消化道不同部位吸收情况的实验研究

探讨了有机磷农药在大鼠消化道不同部位吸收速度及血清乙酰胆碱酯酶（AChE）的相关变化。取180～200g的SPF级大鼠72只,随机分成6组,A（正常对照）、B（常规灌胃）、C（胃内注药）、D（小肠内注药）、E（盲肠内注药）、F（结肠内注药）。A、B经腹腔麻醉后进行假手术,A组灌胃0.5mL灭菌水,B组灌胃敌敌畏＋灭菌水0.5mL;C、D、E、F组通过腹腔麻醉手术,分别于胃、小肠、盲肠、结肠内注敌敌畏＋灭菌水0.5mL,注药后2、4、6、8、10、12min每组随机取2只各采血3～5mL,检测血清AChE。各组血清AChE统计分析,A、C、D与各组之间两两比较有统计学意义（均P〈0.05）,B、E、F组两两比较无明显差异（P〉0.05）。流涎、肌颤出现时间单因素方差分析,A、B、C、D分别与各组之间两两比较均有统计学意义（均P〈0.05）,E、F组比较无明显差异（P〉0.05）。各组2、4、6、8、10、12min血清胆碱酯酶比较,除E、F组之间比较无明显差异（P〉0.05）外,各组比较及各组两两比较均有统计学意义（均P〈0.05）。敌敌畏在小肠吸收最快,盲肠和结肠次之,胃内吸收速度最慢,常规灌胃后早期已经有一部分毒物进入小肠,而小肠是毒素被持续吸收并引起中毒危害的重要源头。     

乌鳢尾部神经分泌系统组织化学和HRP法研究

采用辣根过氧化物酶(HRP)法结合乙酰胆碱酯酶(AChE)和单胺氧化酶(MAO)组化方法,对乌鳢尾部神经分沁系统进行了研究。结果如下: 1.在尾部脊髓中可以观察到一些HRP标记的神经分泌细胞和HRP标记末梢。有些标记末梢终止于脊髓中央管,少量终止于腹面脊膜。尾垂体中也有许多HRP标记末梢。2.神经分泌细胞细胞体中的HRP颗粒在电镜下呈圆形、短管状和哑铃状。3.神经分泌细胞体显示AChE活性,并定位于核膜、粗面内质网上。4.神经分泌细胞体周围尚显示MAO活性。