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基于细胞-细胞融合的HIV进入抑制剂非感染性筛选方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立一个基于细胞-细胞融合的HIV进入抑制剂非感染性筛选方法.方法:将稳定表达HIV包膜蛋白gp160的效应细胞与含有或稳定表达HIV受体和辅助受体的靶细胞混合,观察合胞体的形成.用特异性的HIV进入抑制剂对检测方法进行验证.结果:本研究比较了2种效应细胞与5种靶细胞的10种组合,发现将CHO-WT和MT-2细胞混合,可形成明显的合胞体.进一步发现特异性的HIV进入抑制剂能够抑制合胞体的形成,且具有剂量依赖性.结论:这一方法能特异性地筛选作用在HIV进入阶段的抗HIV药物,操作简单方便,且无感染性,可望发展成为一个无感染性的多靶点高内涵药物筛选模型,用于天然和合成来源的小分子HIV进入抑制剂的筛选. 相似文献
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目的:建立Der p 2(屋尘螨Ⅱ类变应原)杂交瘤细胞株,并对其分泌的Der p 2单克隆抗体进行鉴定.方法:用重组Der p 2蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和3次克隆化,制备出单克隆抗体.采用间接ELISA法、Western blot法确定单克隆抗体的免疫球蛋白的类型和亚类、相对亲和力、特异性,对单克隆抗体进行鉴定.结果:获得3株能稳定分泌高效价Der p 2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,1B6为IgG1类,1G11、4B1为IgG2a类.间接ELISA法检测细胞上清效价为104~105,腹水效价为105~106.Westernblot试验证明3株单抗与Der p 2蛋白均有特异性反应.结论:成功制备了3株抗Der p 2的单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立Der p 2蛋白检测和纯化的方法奠定了基础. 相似文献
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以meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉为抗原,通过动物免疫、细胞融合等技术筛选细胞株3E4.该细胞株产生的抗体具有结合铁卟啉的能力,且表现出过氧化物酶的活力.该抗体对抗原和铁卟啉的亲和常数为3.65×10-9和8.20×10-8.抗体-铁卟啉复合物催化反应时,得到比活力为46.875U/mg,为天然HRP的18.99%. 相似文献
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紫罗兰与桂竹香原生质体培养及电激细胞融合的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
采用电激细胞融合的方法 ,对紫罗兰MatthiolaincanaR Br与桂竹香CheiranthuscheiriL 原生质体培养及电激细胞融合效率导入最适条件作了探讨。紫罗兰的子叶原生质体分裂初期培养最适条件 :培养基为 1 2MS。培养基组成中 ,蔗糖质量分数为 4%、甘露糖醇浓度为 0 6mol L。加入谷酰胺酶无机态氮源时 ,效果明显。次之 ,加入植物生长调节物质 1mg LBA也达到高分裂率。再者 ,添加玉米素时效果也甚好。根据原生质分离前的子叶在 5℃预处理分裂率最高 ,培养温度 2 4~ 30℃为宜。电激细胞融合 (singlepairs)产生效率高的条件为 :紫罗兰原生质体密度 1× 10个 mL ,高周波电强度 1MHz ,15 0V cm ,脉冲幅 70 μs;桂竹香原生质体密度 1× 10个 mL高周波电强度 1MHz,10 0V cm ,脉冲幅 30 μs。 相似文献
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以具有黑色分生孢子与抗N_aN_3遗传标记的鲍鱼菇原生质体,经碘乙酰胺灭活后与佛罗里达侧耳、Cr02原生质体融合,已取得种间融合子。同时,以佛罗里达侧耳与香菇Cr02采用碘乙酰胺双灭法,取得属间融合子,并经酯酶同工酶酶谱分析证实。 相似文献
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孙毅 《科技情报开发与经济》2006,16(12):145-146
简介了细胞工程的概念及基本操作,论述了其在若干重要领域研究取得的重大进展,并展望了其发展前景。 相似文献