用于单细胞RNA分析的循环肿瘤细胞团捕获和单细胞分离方法的质量评估

循环肿瘤细胞团（Circulating tumor cell cluster, CTC cluster）的单细胞分析对CTC cluster的生物学效应分析极其重要。为了使CTC cluster单细胞分析可以获得最有效的结果,分析前的捕获和单细胞分离的过程必须能够保持CTC cluster的完整性和细胞内部RNA的完整。本研究通过单细胞RNA测序中的逆转录方法逆转录并定量3个看家基因进行RNA质控,同时测量CTC cluster的横向直径用于评估CTC cluster的完整性,从而测定CTC cluster捕获和单细胞分离过程对CTC cluster单细胞分析结果的影响。分别采用胰酶-EDTA和非酶细胞解离溶液（Non-enzymatic cell dissociation solution, NECDS）分离CTC cluster中的单细胞,并考察了单细胞分离过程对胞内RNA的影响。考察了负向富集、正向富集和膜过滤捕获方案中不同操作流程对CTC cluster完整性和单细胞内RNA完整性的影响。结果表明,NECDS可快速分离CTC cluster中的单细胞且不会对细胞内RNA产生影响...     

A new cytotoxic 2-（2-phenylethyl）chromone from Chinese eaglewood

A new compound 8-chloro-5,6,7-trihydroxy-2-（3-hydroxy-4-methoxyphenethyl）-5,6,7,8-tetralaydro-4H-chromen-4-one （1） was isolated from the Chinese eaglewood [Aquilaria sinensis （Lour.） Gilg]. Its structure was elucidated on the basis of spectral data. Compound I showed cytotoxicity against human gastric cancer cell line （SGC-7901） in vitro by MTT method with the IC50 value of 14.6 μg/mL.     

Purification and Characterization of the Catalytic Domain of Protein Tyrosine Phosphatase SHP-1 and the Preparation of Anti-ΔSHP-1 Antibodies

This study is focused on the expression of an SH2 domain-truncated form of protein tyrosine phosphatase SHP-1（designated ΔSHP-1） and the preparation of its polyclonal antibodies. A cDNA fragment encoding ΔSHP-1 was amplified by PCR and then cloned into the pT7 expression vector. The recombinant pT7-ΔSHP-1 plasmid was used to transform Rosetta（DE3） E. coli cells. ΔSHP-1 was distributed in the exclusion body of E. coli cell extracts and was purified through a two-column chromatographic procedure. The purified enzyme exhibited an expected molecular weight on SDS-gels and HPLC gel filtration columns. It possesses robust tyrosine phosphatase activity and shows typical enzymatic characteristics of classic tyrosine phosphatases. To generate polyclonal anti-ΔSHP-1 antibodies, purified recombinant ΔSHP-1 was used to immunize a rabbit. The resultant anti-serum was subjected to purification on ΔSHP-1 antigen affinity chromatography. The purified polyclonal antibody displayed a high sensitivity and specificity toward ΔSHP-1. This study thus provides the essential materials for further investigating the biological function and pathological implication of SHP-1 and screening the inhibitors and activators of the enzyme for therapeutic drug development.     

细胞学方法评价9种抗溃疡药的寒热药性

以9种抗溃疡药为例研究西药中药化,评价寒热药性的实验方法。用噻唑蓝(MTT)比色法检测9种抗溃疡药对SMMC7721以及MCF-7细胞增殖的影响,同时用倒置显微镜观察加药后细胞形态特征的变化。氢氧化铝、碳酸氢钠、西咪替丁、奥美拉唑、泮托拉唑为寒性;雷尼替丁、法莫替丁、兰索拉唑、雷贝拉唑为热性。形态学观察表明,氢氧化铝、碳酸氢钠、西咪替丁、奥美拉唑、泮托拉唑使细胞密度减小,固缩变圆;雷尼替丁、法莫替丁、兰索拉唑、雷贝拉唑则在低浓度时使细胞密度增加,结构致密、生长旺盛。细胞学方法能够用于西药寒热药性的评价,这为西药中药化提供了一种简单实用的评价方法。     

氯化钴对人的eNOS基因启动子SP1改构体转录活性的影响

目的:构建改造的人血管内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子,利用氯化钴诱导的人脐静脉血管内皮细胞-12缺氧模型研究其基因启动子活性的变化.方法:用不同剂量的氯化钴体外处理细胞复制缺氧模型,PCR点突变技术构建突变启动子pGL2-eNOS-insSP1,分别将pGL2-eNOS-insSP1和pGL2-eNOS-p载体导入HUVEC-12细胞,双荧光素酶报告基因技术用于检测启动子转录活性的变化.结果:DNA测序显示人的eNOS基因启动子SP1改构体的序列正确;改构体eNOS启动子活性在一定范围内随氯化钴刺激剂量的增加而升高.结论:SP1插入改造的方法显著提高了eNOS基因启动子的转录活性.     

红酒为何能抗衰老

芝麻养发,喝红酒能软化血管,不过人们对于其详细机制却未必能说清楚日本研究人员表示,这是因为芝麻和红酒的成分能够延长细胞寿命。细胞老化后异常蛋白质会在细胞内堆积,容易发生损伤细胞的氧化应激反应,最终导致细胞死亡此前有研究显示,芝麻和红酒具有防老化效果,这是由于红酒中的白藜芦醇和芝麻中的芝麻素具有抗氧化作用,不过科学界对这两种成分在细胞内发挥作用的详细机制则没有完全弄清。     

60周年校庆巡礼·学科建设篇

学位点的建设与发展情况 1998年,国务院学位委员会批准我校为新增博士学位授予单位,“发展与教育心理学”专业获博士学位授予权;2000年,“物理化学”博士点获批;2003年,“教育学原理”“马克思主义基本原理与思想政治教育”和“人文地理学”3个博士点获批;2006年,“中共党史”“马克思主义中国化研究”“体育教育训练学”“中国现当代文学”“理论物理”“自然地理学”和“细胞生物学”7个博士点获批,“马克思主义基本原理与思想政治教育”博士点被批准拆分为“马克思主义基本原理”和“思想政治教育”2个博士点;2011年,国务院学位委员会批准我校“教育学”“心理学”“中国史”“物理学”和“地理学”5个学科为博士学位授权一级学科,实现了我校一级学科博士点零的突破．     

2-(4-氯苯基)-4-(4-甲氧基苯基)喹唑啉抑制微囊藻生长的研究及应用前景探究

近年来,随着水体富营养化程度加剧,蓝藻水华现象已成为世界性的灾难问题,有效地控制蓝藻水华对于保证水体水质安全和水体生态修复至关重要.喹唑啉类化合物,作为一类生态安全性好且易于降解的生物碱类化合物,具有广谱的抗菌生物活性和药用价值,最近研究发现这类化合物具有潜在的抑制微囊藻生长和控制蓝藻水华的能力.通过2-(4-氯苯基)-4-(4-甲氧基苯基)喹唑啉(CMQ)对群体状的铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)的生长影响实验,发现CMQ在大于5.0 mg·L-1的浓度条件下,对微囊藻有强烈抑制效果,4 d内CMQ对微囊藻细胞的50%生长抑制浓度(EC50)为1.93 mg·L-1.通过对微囊藻的群体形态和大小的变化观察,结果表明CMQ能够降解M.aeruginosa群体并引起群体颗粒变小,导致明显的群体沉降.     

氯化1-辛基-3-甲基咪唑对EMT6细胞的毒性及其DNA损伤作用

研究了氯化1-辛基-3-甲基咪唑([C8mim][Cl])对EMT6细胞的毒性大小及其可能的遗传机制.不同浓度(0.06、0.25、1.00mmol·L-1)的[C8mim][Cl]对EMT6细胞染毒12h,WST-1比色法检测了细胞活力,ELISA方法检测了Bcl-2蛋白的表达,Hoechst 33342染色检测了细胞核形态的变化,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测了细胞DNA的损伤,流式细胞仪检测了细胞周期和细胞DNA的含量.结果显示,经[C8mim][Cl]染毒后,EMT6细胞活力下降,并且呈剂量依赖关系.当[C8mim][Cl]浓度高于0.25mmol·L-1时,与对照相比,差异显著.[C8mim][Cl]染毒使Bcl-2蛋白表达下调,引起了细胞核形态改变,造成了DNA的断裂损伤和含量下降,诱导了细胞凋亡.从而可以得出结论,DNA损伤参与了[C8mim][Cl]诱导的细胞凋亡.     

基于变分水平集的显微注射过程细胞分割

对于显微注射过程中的细胞质分割问题,传统水平集模型无法在多个目标连成一体的情况下分割出细胞质,且分割速度慢.为此,文中首先依据形状差异性特点获取细胞和注射针的联合轮廓,而后结合变分水平集理论增加边缘约束条件,改进能量泛函模型,实现对细胞质的完整分割,同时大幅提升水平集收敛速度.实验结果表明,文中算法可以快速实现细胞质的独立分割,同时避免对其他目标的错误分割.