一种产紫杉醇内生菌的发酵研究

通过红豆杉内生菌发酵的方法培养出一种产紫杉醇内生菌,并对其发酵过程进行了详细的研究,确定了不同碳源和氮源对其生长产生紫杉醇的影响,以及不同前体对产生紫杉醇的不同影响.     

工业色谱法分离制备7-木糖基-10-去乙酰紫杉醇酶解产物10-去乙酰紫杉醇

基于工业色谱法分离制备抗癌药物紫杉醇的半合成前体10-去乙酰紫杉醇(10-DAP)。7-木糖基-10-去乙酰紫杉醇(10-DAXP)在我国特有红豆杉品系(中华红豆杉)枝叶中含量丰富,以其为原料可制备紫杉醇最理想的半合成前体——10-DAP。本研究以部分纯化后的7-木糖基-10-去乙酰紫杉烷为原料,通过β-木糖苷酶水解该粗提物中的主要成分10-DAXP及其两个微量类似物7-木糖基-10-去乙酰三尖杉宁碱(10-DAXC)和7-木糖基-10-去乙酰紫杉醇C(10-DAXP C),脱去其C-7位上的木糖基,水解产物采用大孔吸附树脂吸附,正相快速柱分离和反相制备色谱分离,可获得高纯度的目标物10-DAP,产物纯度为96%,整个工艺的收率大于75%。该方法适合以10-DAXP为原料大规模制备紫杉醇的半合成前体化合物10-DAP,为工业化生产紫杉醇开辟了一条新途径。     

几种胁迫因素对中国红豆杉细胞培养的影响

中国红豆杉细胞培养过程中,在第10d添加0．6mg/mL的真菌F5提取物可使紫杉醇的合成量达300μg/g干重细胞;在培养第20d添加20mg/LAg^ ,紫杉醇的合成量达83μg/g干重细胞;在培养第20d添加4mg/Cu^2 ,紫杉醇的合成量达35μg/g干重细胞。     

铈诱导悬浮培养的东北红豆杉细胞发生凋亡

以悬浮培养的东北红豆杉（Taxus cuspidata)细胞为材料,加入一定浓度的Ce^4 ,在不同培养时间取样,超薄切片透射电镜观察发现细胞核膜完整,染色质凝聚,趋边化,核酸电泳显示DNA发生特异性降解并形成阶梯状电泳条带（DNA ladder); 应用TUNEL检测方法发现DNA的3′－OH断端可被特异性标记。Ce^4 能诱导东北红豆杉细胞发生凋亡。     

水解血清白蛋白对紫杉醇的化学修饰

紫杉醇对卵巢癌和乳腺癌有良好的疗效 ,但它不溶于水 ,使临床应用很不方便 .用水解的牛血清白蛋白修饰紫杉醇 ,可提高其水溶性     

紫杉醇类似物的电子结构与抗癌活性关系的研究( Ⅰ )

应用MM3分子力学方法对R6=H的13个紫杉醇类似物进行几何优化,并采用MNDO法计算了化合物的电子结构,应用回归分析、神经网络等方法寻找其量化指数与抗癌活性的关系,结果表明,R2取代基、2-OBz中苯甲酰基（Bz)的碳氧原子的净电荷之和∑QBz、核-核排斥能Ep对活性影响较大,并得到显著性较好的QSAR：ID50（A）/ID50（T）（act)=71.20535 155.35016∑QBz,表明随着∑QBz减小,ID50（A）/ID50（T）值将减小,而化合物活性将增大,神经网络（BP网络）算法的结果表明,神经网络计算值R=0.992,神经网络的结果可精确地预测化合物的抗癌活性。     

中国红豆杉细胞紫杉醇合成期特异表达新基因TS1-FL的部分cDNA克隆

采用mRNA差异显示技术(DDRT—PCR)比较了悬浮培养的中国红豆杉细胞合成紫杉醇前后的基因表达差异,并从紫杉醇合成期细胞中分离出一个特异表达的cDNA克隆TS1．TS1长度为638bp,序列相似性分析结果表明它代表一新基因序列(Genbank登录号：AF426429),将此新基因命名为TS1-FL．开放读框分析结果表明Tsl拥有一个不完整的开放读框,蛋白质同源性检索没有发现与TS1翻译序列有较大同源性的蛋白质．对此基因的进一步研究可揭示它在紫杉醇生物合成中所扮演的角色．     

生态因子对红豆杉中紫杉醇含量的影响

研究了生态因子对红豆杉中紫杉醇含量的影响.结果表明:紫杉醇含量与海拔高度、坡位、河距以及土壤中有机质和氮的含量相关性显著;在海拔1 000～1 300m的范围内及土壤中有机质含量为≤100g/kg中生长的红豆杉中紫杉醇含量显著较高.对11个因子进行主成份分析显示,影响红豆杉中紫杉醇含量积累的因素依次为:有机质、氮、磷、钾、海拔高度、河距、坡位、植被类型、坡度、坡向、pH.在红豆杉种植中,通过合理搭配不同生态因子,可以提高紫杉醇的含量.     

肝素-紫杉醇抗癌药物系统的合成及其对癌细胞生长抑制的研究

为解决紫杉醇作为抗癌药物水溶性差毒性大的缺点,采用天然生物大分子肝素为载体,利用其具有良好的生物相容性、生物降解性以及良好的水溶性特征,选用三种带有不同a-取代基的氨基酸作为连接臂,设计合成了一类新型肝素-氨基酸-紫杉醇药物输送系统,目标产物用1H NMR进行了结构表征.体外水解动力学测试结果表明该系统水溶性好,MTT法测试结果表明所有化合对MCF-7(乳腺癌细胞)细胞毒活性优于紫杉醇.