鸡卵黄抗体的制备及其不均一性

介绍了免疫期卵黄液中白蛋白（牛）抗体效价和亲合力的变化。研究了ＰＨ对稀释卵黄液去脂效果,以及硫酸铵浓度对ＩｇＹ浓缩、纯化效果的影响。探讨了抗白蛋白ＩｇＹ的异质性。实验表明稀释卵黄液酸化处理和ＩｇＹ盐析的最适合条件分别是ＰＨ５．１和２．２ｍｏｌ／Ｌ。经免疫亲和柱层析或金属螯合亲和柱层析后,白蛋白抗体样品均出现多个不同层析行为的抗体峰。实验提示免疫卵黄液中不仅可能存在不同亲合力、特异性的白蛋白抗体,还     

石墨烯在金电极上固定方法的选择及免疫传感器的构建

分别利用重氮化法、滴涂法、非共价键合法及偶联法将石墨烯固定于电极表面,并对所得到的修饰电极进行电化学表征,分析结果显示重氮化法制备的石墨烯修饰电极性能更稳定,信号更灵敏,所以将其用于免疫传感器的制备.首先在金电极上制备对氨基苯硫酚和苯硫酚的混合自组装单分子膜(MSAM),再利用重氮化法将石墨烯固定在MSAM修饰电极表面,然后在其表面电沉积纳米金,最后通过金-氨键固定抗体(羊抗小鼠IgG),并对小鼠IgG进行了初步检测,线性范围为0.001～400μg/L,检测下限达到0.0014μg/L.结果表明,该传感器具有检测范围宽、灵敏度高的优良性能,在临床检验中具有广阔的应用前景.     

基于整体柱的固定化胰蛋白酶反应器及其在水解β-乳球蛋白中的应用

采用胰蛋白酶水解β-乳球蛋白备受关注。然而,该酶成本高昂,无法在食品工业中得到广泛应用。固定化不仅可提高游离酶的稳定性还可通过重复使用降低其成本。本研究分别采用2.1与6 μm的大孔有机整体柱为载体,通过共价固定制备固定化胰蛋白酶反应器 (monolith based immobilized trypsin reactors, MITRs) ,并比较了不同还原剂对固定化得率及酶比活的影响。相较于氰基硼酸,以2-甲基吡啶硼烷为还原剂的固定化方案虽提高了酶的比活,但导致固载量减少了32—50%。此外,孔径大小对酶的比活无显著影响。MITRs可有效水解β-乳球蛋白,且水解效率随着循环流速的增加而提高。其中使用2.1 μm-MITR的水解产物主要为分子量小于3 KDa的小肽。在18次重复实用过程中,6 μm-MITRs表现出更高的稳定性。     

Construction and Expression of Human Survivin and Preparation of Its Polyclonal Antibody

Survivin, a novel member of inhibitor of apoptosis（IAP） protein family, is aberrantly expressed in cancer but undetectable in normal, differentiated adult tissues. The cancer-specific expression of survivin, coupled with its importance in inhibiting cell death and in regulating cell division makes it a useful diagnostic marker of cancer and a potential target for cancer treatment. Survivin cDNA amplified from the total RNA of 293 cells through RT-PCR was cloned into prokaryotic expression vector pRSET-B. The recombinant plasmid pRSET-B-Surv was expressed in E.coli BL21, and the relative molecule mass（Mr） of expressed fusion protein was approximately 21000. The recombinant protein was purified through Ni^2＋ affinity chromatography column and characterized by SDS-PAGE and Western blot. The purified recombinant protein was then injected into rabbits, and antisurvivin polyclonal antibody with a high titer was obtained.     

异硫氰酸荧光素标记抗体的固体基质室温磷光性质研究

研究了异硫氰酸荧光素（FITC）标记的羊抗人抗体（GAHAb-FITC)和兔抗羊抗体9RAGAb-FITC)，及其以三种免疫方式与人免疫球蛋白（IgG)反应所得免疫复合物在多种固体薄膜基质上发射室温磷光（RTP）的适宜条件及其光谱，强度和寿命等性质。研究发现，标记抗体及其免疫复合物保留了FITC优良的固体基质室温磷光性质，λ m0643em^(max)=525/650nm，其RTP强度与其浓度线性相关，并有很高的灵敏度，更为重要的是，免疫反应及其RTP检测能结合于同一基质，方便地相继完成，在聚酰胺膜（PM）上，以Pb(Ac)2为重原子微扰剂，稀释比为1：10（ψ）的GAHAb-FITC,RAGAb-FITC及其与人IgG形成的免疫复合物均能发射较强制 RTP信号并有较长的RTP寿命，本结果为建立相应的固体基质室温磷光免疫分析（SS-RTP-IA）新方法奠定了相应的实验基础。     

妇产科部分疾病病变筛查的意义及管理策略

目的:获得妇产科部分疾病病变筛查的方案,并探讨其相关的意义和管理策略.方法:对妇产科宫颈病变筛查;妊娠期糖尿病糖化血红蛋白(HbAlc)联合空腹血糖(FPG)检测筛查;妊娠早期甲状腺功能筛查;妊娠早期唐氏综合征筛查及三维超声在产科筛查等方面的统计结果为分析对象,获得相应的筛查方案,并探讨其可行性、有效性和研究的意义.结果:(1)HR-HPV基因检查结合宫颈TCT检测可有效筛查早期发生宫颈病变的过程;(2)妊娠期糖尿病筛查可以HbAlc联合FPG作为可靠的指标;(3)甲状腺功能减退症患病率明显高于正常组甲状腺功能减退症发病率显著低于高风险组(5.3％:16.3％,p＜0.01).甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)显阳性(p＜0.01)和(或)甲状腺疾病个人史(p＜0.01)都可以使甲状腺疾病患病风险提高;(4)用三维超声对40例妊娠期胎儿进行筛查,其中正常的胎儿占75％,畸形的胎儿占25％.后期对该40例妊娠妇女分娩后进行回访,其结果与前期三维超声筛查的结果一致;(5)联合筛查是传统早孕期唐氏综合征筛查方案中筛查功效最高的,最有经济性的是血清学筛查方法;而染色体非整倍体检测技术(NIFTrY)筛查被认为是早孕期唐氏综合征筛查的潜在发展方向.结论:建立、健全妇产科部分疾病在妊娠期的筛查方案,重视对ASC-US及以上级别患者的干预,是预防妇产科部分疾病发生的有效措施,并且可降低新生儿的发病率.     

基层医院开展抗CCP检测在诊断RA中的价值

目的:观察抗CCP检测在诊断类风湿性关节炎(RA)中的价值,方法:检测了710例RF阳性和阴性患者血清中的CCP抗体,其中RF阳性满足美国风湿病学会(ACR)的诊断标准的125例;RF阳性但不满足ACR的诊断的205例;正常对照组即RF阴性380例;结论:开展anti—CCP抗体检测,对RA的早期诊断有积极的意义。     

甲状腺冰对蜡块与冰剩蜡块免疫组织化学染色效果比较

目的通过对甲状腺冰对蜡块与冰剩蜡块免疫组织化学染色效果进行对照观察．发现冰对蜡块与冰剩蜡块对免疫组织化学染包效果的差异，为选择冰对蜡块与冰剩蜡块做免疫组织化学提供理论实践依据。方法3冰对蜡块与冰剩蜡块分别切片用EnVision法做TTF-1，CK19，Gal—3，HBME—1．TPO,TG免疫组织化学染色。结果对TTF—1．CK19．Gal-3，HBME-1，TPO，TG免疫组织化学染色结果的背景．定位进行分析．冰对蜡块与冰剩蜡块免疫组织化学染色各项指标阳性率完全一致。结论冰对蜡块与冰剩蜡块分别做免疫组织化学染色结果无明显差别．在没有冰剩蜡块或冰剩蜡块不符合要求时选择冰对蜡块做免坡组化．结果对诊断无影响。     

甲状腺功能亢进症合并甲状腺癌9例报告

目的总结甲状腺功能亢进症合并甲状腺癌患者的诊治经验。方法回顾性总结甲状腺功能亢进合并甲状腺癌9例患者的临床资料，并结合文献对相关性问题进行了分析。结果9例甲状腺功能亢进症合并甲状腺癌患者术前均漏诊，均经术中快速冰冻切片确诊后改行甲癌根治术。结论甲状腺功能亢进症合并结节时，临床上应高度怀疑有合并甲状腺癌之可能。本病确诊有赖于病理学检查，手术是甲状腺功能亢进症合并甲状腺癌的首选治疗方法。     

基于核酸分子杂交的免疫芯片抗体固定新方法

基于核酸分子杂交原理构建了一种新型抗体固定方法.先将抗体与寡核苷酸单链交联,再将两者的复合物与固相载体表面上的互补寡核苷酸链结合,从而将抗体固定到载体的表面.在磁珠表面对该固定方法进行实验,证明了方法的可行性.以本方法构建了针对转基因Bt Cry1Ac蛋白的免疫芯片,用Cy3标记二抗对其探针固定效果进行分析,并且在芯片上对Bt Cry1 Ac蛋白进行梯度浓度检测试验.结果表明,以本方法构建的抗体芯片,探针分布具有良好的特异性;探针层分布均匀,非特异吸附小;检测灵敏度达到0.01 ～ 0.05 μg/L;此外,通过杂交核酸双链的解离成功实现了芯片的再生,有助于解决传统抗体固定方法中芯片不可再生的问题.