异甘草素减轻小鼠离体心脏缺血再灌注损伤

本文旨在探究异甘草素(Isoliquiritigenin,ISL)对小鼠离体心脏缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的保护作用及其对心肌线粒体的影响,为其治疗心肌缺血再灌注损伤性疾病提供理论依据.实验采用改良的Langendorff离体心脏灌流装置,停灌30 min,复灌45 min,复制小鼠离体心脏I/R损伤模型.将实验小鼠随机分为3组:正常对照组,I/R组和ISL加药处理组,每组6只.利用多导生理记录仪连续监测左心室内压,实时记录心率(HR)、左室发展压(LVDP)、左室最大压力变化速率(±dp/dt)和左室舒张末压(LVEDP);分离心肌组织线粒体,JC-1荧光探针染色后用流式细胞仪检测线粒体膜电势;采用化学发光法测定心肌组织中ATP含量.结果表明,ISL处理组心脏的LVDP、+dp/dt明显高于I/R损伤对照组(P 0. 01),心肌线粒体膜电势以及心肌组织ATP含量也明显高于I/R损伤对照组.表明ISL可保护I/R致心脏线粒体功能损伤,改善心脏I/R损伤后功能恢复.     

超临界CO2萃取异甘草素的提取工艺

采用正交试验与单因素试验相结合方法对异甘草素的超临界CO2提取工艺进行了研究,并与常规索氏提取法的实验结果进行了对比。得到的最佳工艺参数为:萃取压力30 MPa、萃取温度45℃、夹带剂85％乙醇、液固比为5:1、CO2流量10 kg／h、分离压力5．5 MPa、分离温度35℃。实验结果表明,在优化的条件下,超临界CO2萃取异甘草素的提取率为0．035％,异甘草素在提取物中的质量分数为0．84％,分别是索氏提取法提取率的3．5倍,质量分数的3．0倍。超临界CO2萃取异甘草素所用时间短、溶剂用量少、提取效率高、环境友好,是一种高效、快速提取异甘草素的方法。     

电堆集-非水毛细管电泳分离测定甘草次酸和阿魏酸的研究

建立了电堆集富集-非水毛细管电泳(NACE)同时分离测定甘草中甘草酸和阿魏酸的新方法.系统研究了电压、非水溶剂、乙酸钠浓度、氢氧化钠浓度、样品溶剂等因素对电堆集和分离效果的影响,确立了分离和富集的最佳条件.以甲醇-乙腈(体积比4 : 6)为非水介质,30 mmol·L-1乙酸钠-2.5 mmol·L-1氢氧化钠为背景电解质;分离电压-20 kV,检测波长254 nm.在优化条件下,甘草次酸在0.80 ～12.80 mg·L-1(r＝0.999 6),阿魏酸在0.77 ～45.60 mg·L-1(r＝0.999 6)质量浓度范围内线性关系良好,回收率分别为97% ～102%,98% ～102%;甘草次酸检出限为0.069 mg·L-1,阿魏酸检出限为0.087 mg·L-1,RSD均不大于4.6%.     

异甘草素及其类似物的合成

以2,4-二羟基苯乙酮和取代苯甲醛为原料,在微波辅助下,以KOH为催化剂,以C2H5OH为溶剂,较高产率（65%～89%）合成了10种异甘草素及其类似物.经1 H-NMR,IR,MS波谱分析确定了合成化合物的结构,并分别考察了辐射功率、辐射时间、反应的原料配比以及溶剂用量等因素对反应产率的影响.     

甘草水通道蛋白PIP1基因正义和反义表达载体的构建

根据已报道的GuPIP1基因序列设计特异引物,克隆甘草水通道蛋白GuPIP1基因cDNA序列,将该片段正向、反向分别插入植物表达载体pMBW330的CaMV35S启动子和OCS终止子之间,构建了正义、反义表达载体．通过双酶切、PER和DNA测序鉴定后,分别导入农杆菌EHA105中．     

11-脱氧甘草次酸乙酯3-单糖链皂苷的合成及其活性研究

合成了5种11-脱氧甘草次酸3-单糖链皂苷并初步探讨其生物活性.以苯甲酰基保护的糖基三氯乙酰亚胺酯为供体,在三氟甲磺酸三甲基硅脂(TMSOTf)的催化作用下与11-脱氧甘草次酸乙酯C(3)位羟基发生糖苷化反应,以较好的产率制备得苯甲酰基保护的11-脱氧甘草次酸乙酯3-单糖链皂苷7a～7e,用NaOMe/MeOH溶液脱除苯甲酰基得11-脱氧甘草次酸乙酯3-单糖链皂苷8a～8e.合成的5个11-脱氧甘草次酸3-单糖链皂苷均为新化合物,结构经1H NMR、质谱、元素分析确证,活性实验表明化合物8a对高浓度N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中枯草芽孢杆菌的生长具有保护作用,化合物8e对高浓度DMF中大肠杆菌、酵母菌的生长具有保护作用.     

乌拉尔甘草种子硬实率的近红外光谱分析

以收获年份不同、收获地点不同的112份乌拉尔甘草种子为材料,其硬实率分布范围为0.3%～99.3%,根据3:1的比例划分校正集和检验集,采用近红外光谱技术结合定量偏最小二乘法对其硬实率进行了分析。研究结果表明,光谱范围采用5 000～6 000 cm~(-1),主成分数为6时,校正集和检验集的决定系数分别为90.85%和91.51%,相关系数分别为0.953 2和0.957 9,平均绝对误差分别为7.73%和6.96%,标准差分别为9.98和9.57。采用该方法建模时,即使采用不同的建模样品,校正集和检验集的决定系数均在90%以上,校正标准差和预测标准差在10.00左右,平均绝对误差在7.90%左右。该研究旨在利用近红外光谱法提出乌拉尔甘草种子硬实率的快速检测方法,以促进硬实种子在生产上的利用。     

甘草的红外光谱研究

利用傅里叶变换红外光谱法对59份来自中国6个不同产地的野生和栽培甘草原药材及其提取物进行了分析研究。通过比较甘草原药材及其提取物与甘草的指标成分甘草酸和甘草苷的一维及其二阶导数光谱,发现1 100～1 000 cm-1范围内的峰是甘草多糖类成分的特征峰;1 318 cm-1是草酸钙的特征峰;1 745,1 386和1 612,1 512 cm-1分别是甘草酸和甘草苷的特征指纹峰;特征峰的强度可代表相应化学成分的含量。根据上述特征峰强弱对所有样品进行横纵向比较,结果显示：野生甘草特征峰强,相应指标成分含量高;栽培甘草特征峰弱,相应指标成分含量低;甘草药材质量与生长年限密切相关。     

甲基莲心碱与人血清白蛋白相互作用的研究

荧光光谱、圆二色谱等多种光谱技术研究甲基莲心碱(NF)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用,以Stern-Volmer和Lineweaver-Burk方程处理数据。甲基莲心碱对人血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用并为静态猝灭,主要作用力为疏水作用和静电作用。309K下NF与HSA相互作用的结合常数为1.39×104L.mol-1,NF-色氨酸残基之间的距离为2.70nm,热力学参数ΔH0=-13.0KJ·mol-1,ΔS0=37.2J.(K.mol)-1。NF的结合使蛋白α-螺旋百分数增加。中药活性成分甘草次酸等和内源脂肪酸对结合的影响较少。     

阴离子耗尽进样胶束扫集毛细管电动色谱法在线富集测定甘草黄酮类化合物

建立了一个毛细管胶束电动色谱(MEKC)在线富集阴离子耗尽进样(ASEI)联用扫集(sweeping)技术测定3种甘草黄酮化合物(异甘草素、甘草素和甘草苷)的方法。考察了MEKC的分离条件和富集体系的优化条件,其中样品基质、水塞进入时间、进样时间对目标化合物的富集效果有较大的影响。在优化实验条件下,异甘草素、甘草素和甘草苷的富集倍数分别提高了110、120、300倍,检出限分别为0.015、0.014、0.011mg/L。该方法用于中药制剂中甘草素、异甘草素和甘草苷含量的测定,回收率在90.6%～107%之间,相对标准偏差(RSD)均小于4.5%(n=3)。实验证明,该方法可成功地应用于实际样品中甘草素、异甘草素和甘草苷含量的测定