β-K4H3[SiW9O37(CpTi)3]·11H2O环戊二烯钛多酸衍生物与DNA作用研究

某些过渡金属配合物具有特异性催化DNA和RNA断裂的功能, 因而研究过渡金属配合物对DNA和RNA的断链反应对新型抗肿瘤、抗艾滋病化学药物的定向设计及其基因治疗和分子生物学中DNA和RNA的高度专一性定点断裂、 DNA定位诱变和构象识别具有重要意义和应用前景[1,2]. 我们对二茂钛多酸有机金属衍生物合成及抗肿瘤活性研究表明, 环戊二烯钛多氧金属酸盐衍生物具有很高的抗肿瘤活性和较好的水溶性及稳定性, 有潜在的抗肿瘤药用价值[3].     

水-乙醇溶液中肌红蛋白在琼脂糖膜中的电化学研究

用琼脂糖(agrose)将肌红蛋白(Mb)固定在玻碳电极(GCE)表面,制备了Mb-Agrose膜修饰电极.在乙醇亲水性有机溶剂与水的混合溶液中,包埋在Agrose中的Mb可与电极发生直接电子传递,且能催化还原过氧化氢、氢过氧化异丙基苯、氢过氧化叔丁基异丙苯、过氧化丁酮等过氧化物.Mb-Agrose膜修饰电极可用于上述过氧化物的定量检测.     

基于NMR技术的溶菌酶在琼脂糖凝胶中的动力学研究

运用脉冲梯度场测量自扩散系数及自旋自旋弛豫时间测量核磁共振技术对鸡蛋清溶菌酶(HEWL)在琼脂糖凝胶中的动力学进行了研究.试验结果表明,HEWL在琼脂糖凝胶中的自扩散系数及自旋自旋弛豫时间较其在纯乙酸钠溶液中变小,说明琼脂糖凝胶的三维网状结构使HEWL分子整体运动及局部运动都受到阻碍.并且随着琼脂糖浓度的增大,凝胶网孔尺寸不断减小,HEWL分子运动受限程度加剧,从而蛋白质分子可以较长时间内停留在高浓度区,分子间更容易互相碰撞,发生反应,晶核生长得以促进.同时琼脂糖凝胶较小流体力学网孔尺寸抑制聚晶或沉淀的出现,晶体质量获得提高.     

琼脂糖珠富集β-actin蛋白实验条件的优化

研究不同反应条件(样品初始浓度、温度、时间)下,protein A+G agarose对小鼠脑组织中β-actin蛋白富集的影响.结果在样品初始浓度为0.5g/L,4℃条件下偶联反应2h,Protein A+G agarose对小鼠脑组织中β-actin蛋白的富集效果最好、并且稳定性与重现性良好.     

光谱法结合凝胶电泳和荧光显微镜研究萘与DNA的相互作用及其应用

通过紫外光谱、荧光光谱、共振散射光谱、圆二色谱、粘度实验、琼脂糖凝胶电泳和荧光显微镜研究了多环芳烃类化合物萘(NAP)与DNA之间的作用机理。紫外光谱结果表明,NAP通过嵌入结合与DNA形成了稳定的复合物。加入NAP后DNA的热熔温度增加了21.49℃,说明NAP的嵌入使DNA双螺旋结构的稳定性增加。粘度实验结果显示,随着NAP浓度的不断增加,DNA相对粘度逐渐增大,说明二者是通过嵌插方式发生相互作用。圆二色谱进一步证实NAP与DNA的作用模式是嵌入结合。荧光光谱结果表明,DNA能有效猝灭NAP的荧光,猝灭机制以静态猝灭过程为主,常温下结合常数和结合位点数分别是2.9×10⁶ L/mol和1.32。根据共振散射光谱数据计算得到NAP与DNA的结合饱和值为2.5。通过结合过程的热力学参数表明,NAP与DNA之间的主要作用力为氢键和范德华力。琼脂糖凝胶电泳和荧光显微镜结果直观地揭示了NAP与DNA是以嵌入模式相结合。此外,基于NAP嵌入结合DNA的原理,利用DNA与磁珠选择性捕获NAP,其去除率为99.35%。该研究为建立基于多环芳烃(PAHs)-DNA相互作用清除P...     

新疆大无核白葡萄原生质体培养

从新疆大无核白葡萄基叶愈伤组织游离的原生质体,用改良MS培养基培养,得到了再生细胞的高频率分裂。经比较试验发现,先用液体浅层培养后转入琼脂糖珠包埋培养最适于新疆大无核白葡萄愈伤组织原生质体培养。     

小檗碱和溴化乙锭与DNA的光谱学作用研究

利用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱、琼脂糖凝胶电泳方法研究了小檗碱(berberine)和溴化乙锭(EB)与ct-DNA的光谱学作用.在ct-DNA存在时,berberine和EB的荧光强度都有较大的提高,pH的改变对二者荧光光谱的发射峰位与强度影响不大;紫外-可见吸收光谱随ct-DNA浓度的增加,表现出减色效应;二者都使ct-DNA的圆二色谱正负峰的吸收强度有所增加;琼脂糖凝胶电泳实验表明,EB-DNA体系的发光强度高于berberine-DNA体系.在DNA的定量测定中,可用无毒、副作用的小檗碱代替有致癌性的溴化乙锭,为安全、无环境污染、定量测定DNA提供了新试剂使用基础.     

活化琼脂糖多胺化材料作为基因的转染载体

将琼脂糖氧化降解,再用环氧氯丙烷活化琼脂糖,与乙二胺反应引入胺基,最后结合pEGFP-C1.红外光谱、元素分析法、琼脂糖凝胶电泳和zeta电位分析实验表征了胺化琼脂糖的性质及其作为基因载体的效果.红外光谱及元素分析表明琼脂糖成功连接胺基;琼脂糖凝胶电泳显示胺化琼脂糖能够有效保护基因.以上结果为胺化琼脂糖制备基因载体提供了依据.     

组织蛋白酶L及其酶学特性研究

组织蛋白酶L很难通过常规的肌动球蛋白提取方法完全去除.由琼脂糖凝胶6B凝胶层析图谱显示,组织蛋白酶L的活性主峰明显偏离肌动球蛋白主峰,表明该酶是肌动球蛋白非结合型酶.凝胶柱层析后测定L型组织蛋白酶粗酶液(Lmix)的活性,结果表明Lmix的热稳定性与pH和温度密切相关,其最适pH为5.0,最适温度为45℃.在最适pH5.0时,Lmix的活性随NaCl浓度的增加而增大.专一性底物及酶激活剂、抑制剂影响研究表明,Lmix为内含巯基的半胱氨酸型组织蛋白酶.     

微型琼脂糖凝胶电泳槽的简易制作

以有机玻璃板等材料 ,制作出成本低廉的微型琼脂糖凝胶电泳槽。经试用 ,具有操作简便、使用安全、节省试剂等优点 ,能满足教学与科研的需要。