改良CTAB法对蒜头果基因组DNA提纯效果的影响

用改良的CTAB法从我国稀有植物--蒜头果种仁中提取基因组DNA,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测所提取基因组DNA的纯度.结果表明用改良的CTAB法所提取的蒜头果基因组DNA的A260/A280比值都在1.8～2.0之间,电泳条带清晰无拖尾,获得了纯度较高的基因组DNA,为蒜头果分子生物学研究及下游操作奠定了基础.     

DNA与CdS-NH2纳米粒子的相互作用研究

采用荧光光谱、紫外光谱(UV-vis)、圆二色谱(CD)、透射电镜(TEM)、原子力显微镜(AFM)、琼脂糖凝胶电泳等技术研究Cd S-NH2-EcoRI复合物与DNA的相互作用.研究发现:Cd S-NH2纳米粒子与p BR322DNA结合后会延迟EcoRI的酶切反应.DNA的曲率和纳米粒子的粒径都是影响结合作用的因素,曲率较大的环状DNA比线性DNA能更好地与纳米粒子结合,小粒径的Cd S-NH2纳米粒子则更易结合到DNA上.并研究了DNA与Cd S-NH2纳米粒子之间的作用机理.     

基础知识与应用相结合的综合性实验教学实践

为培养医学院学生动手能力和创新能力,训练学生的科研思维以及严谨的科研素养,血管紧张素转化酶基因多态性分析综合性实验被引进课堂.学生通过提取自己口腔粘膜上皮细胞基因组核酸、 经多聚酶链式反应扩增血管紧张素转化酶基因中具有多态性的片段、 凝胶电泳检测分析这一系列实验,得到自己的基因诊断结果的同时,全面、 深入、 系统地学习...     

重组人DNaseⅠ不同表达模式的下游工艺研究

研究了诱导温度对重组人DNaseⅠ(rhDNaseⅠ)在大肠杆菌中可溶表达的影响,发现加诱导剂后在37℃培养时,rhDNaseⅠ融合蛋白以包涵体形式存在;而20℃培养,rhDNaseⅠ融合蛋白有62.3%分泌到周质,并且具有酶活性。对这两种不同表达模式表达的rhDNaseⅠ融合蛋白进行分离纯化,发现前者最终酶活为592.2 U/mg,回收率为32.1%;后者酶活为1283U/mg,回收率为24.1%。比较这两种纯化工艺,分泌表达模式的分离纯化工艺较好。     

2-甲基-1,4-萘醌对DNA光敏损伤的诱导作用

选择波长337 nm的激光作为激励光源,借助凝胶电泳研究了2-甲基-1,4-萘醌诱导的DNA光敏损伤.结果表明:在氧气饱和、脱氧条件下光敏损伤显著,DNA损伤主要与光子剂量、核酸与萘醌浓度比及DNA存在形式有关.     

固定化肌红蛋白在水-乙醇混合溶液中的类酶活性电化学

用琼脂糖将肌红蛋白(Mb)固定到玻碳电极(GC)表面,制备了Mb-琼脂糖膜修饰电极。包埋在琼脂糖膜中的Mb在缓冲溶液和乙醇混合溶液中与电极直接传递电子,得到一对对称的Mb辅基血红素Fe(III)/Fe(II)电对的可逆氧化还原峰。其式电势随缓冲溶液pH值增加而负移,且呈线性关系,这说明Mb的电子传递过程伴随有质子的转移。在缓冲溶液和乙醇混合溶液中,固定化肌红蛋白表现出类似细胞色素P450的催化活性,能快速催化还原氯乙烷(六氯乙烷、五氯乙烷、四氯乙烷)脱氯,Mb-琼脂糖膜修饰电极具有较好的稳定性和重现性,可用于这些物质的定量检测。     

分离DNA的琼脂糖凝胶电泳技术

介绍在现代生物学中十分重要的琼脂糖凝胶电泳技术的化学原理,涉及胶体电泳、琼脂糖凝胶的多级结构、DNA分子结构和粒子的电荷作用等化学和生物学基础知识,旨在为高中教育提供一级学科层面的知识联系,供一线高中化学教师和生物学教师用于教学实践。     

一种孔雀石绿免疫亲和柱及其制备方法和用途

<正>申请公布号:CN104174185A申请公布日:2014.12.03申请人:北京美正生物科技有限公司摘要本发明涉及一种孔雀石绿免疫亲和柱制备方法及其用途。该免疫亲和纯化柱利用蛋白G偶联到琼脂糖凝胶上载体,然后用抗孔雀石绿的抗体与琼脂糖上的蛋白G偶联。再利用交联剂对结合孔雀石绿抗体的蛋白G–琼脂糖凝胶载体进行交联。用交联后的载体制备免疫亲和柱。该纯化柱     

DEAE-纤维素法从琼脂中分离制备琼脂糖工艺研究

采用DEAE-纤维素法静态和动态两种工艺从琼脂中分离制备琼脂糖,并考察了最佳工艺条件。静态吸附的最佳工艺条件为:在80℃下,浓度为40g/L的琼脂溶液与25g DEAE-52纤维素进行4h的离子交换,制得的琼脂糖凝胶强度为1028g/cm2,硫酸根含量为0.208%,透明度为64.0%,凝固温度为36.0℃,融化温度为90.2℃,得率为57.2%;动态吸附的最适工艺条件为:在80℃下,浓度为8g/L的琼脂溶液,以1.5m L/min的上样流速流经填充60g DEAE-52纤维素的层析柱,制得的琼脂糖凝胶强度为1040g/cm2,硫酸根含量为0.159%,透明度为65.8%,凝固温度为36.5℃,融化温度为89.8℃,得率为50.3%。DNA Marker电泳实验表明,自制琼脂糖具有优异的电泳性能,能满足生化实验要求。     

柱亲和介质用于内毒素去除的研究

以琼脂糖凝胶为基质,采用不同方法活化后,键合多粘菌素B配基,制备了3种用于内毒素去除的亲和介质。亲和介质的配基键合量及对内毒素的去除率随间隔臂长度的增加而增加。考察了盐浓度、pH、温度及流速对亲和介质3去除内毒素的影响。结果表明,亲和介质3在NaC l浓度为0.05~0.5 mol/L,pH为6~10,温度为25~55℃,流速为0.20~0.80 mL/m in范围内对内毒素去除效果最佳,去除率大于90%。