铝胁迫对油菜生长及叶绿素荧光参数、代谢酶的影响

以铝敏感(华油2790,简称华油)和耐性(中双7号,简称中双)油菜品种为材料,在水培条件下,研究了0,50,100和200 μmol/L铝胁迫处理7 d后对油菜根和叶的各项生理指标的影响.结果表明:随着铝处理浓度的增加,油菜的相对根长逐渐减小,华油的抑制率大于中双,但两者相对株高的变化不大;根的总长和总表面积等均随着铝处理浓度的增加而减小,但根系直径在200 μmol/L铝处理时都略有增加;叶的各项指标则变化不大.此外,各项叶绿素荧光参数,如最大荧光(Fm)、PSⅡ潜在活性(Fv/F0)、光化学量子产量(Yield)等均随着铝浓度的增加而降低,而初始荧光(F0)与上述指标的变化趋势相反,中双的变化幅度小于华油.铝处理下,油菜根尖的酸代谢酶--柠檬酸合成酶(CS)、苹果酸脱氢酶(MDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)和乌头酸酶(ACO)等的活性均高于对照,且随着铝处理浓度的增加而增加.表明铝胁迫对油菜根和叶均造成了一定的伤害,且对根的影响更明显.随着铝浓度的增加,根尖各代谢酶的活性增加,可能是铝胁迫促进了油菜的生理代谢,是对铝毒的一种生理响应机制.     

重叠PCR-酶切连接法人工合成风疹病毒E1基因及其重组质粒构建

目的:利用重叠PCR-酶切连接法人工合成风疹病毒E1基因的全长序列.方法:对风疹E1基因进行生物信息学分析,根据大肠杆菌密码子偏爱性对其密码子进行优化;设计多对寡核苷酸引物,以重叠PCR法分别合成该基因的3个片段,测序鉴定后以酶切连接法将各段拼接成全长为1 443 bp的RV rE1,将E1基因的全长序列克隆导入原核表达载体pET32a.结果:分别进行8轮、5轮和6轮的重叠PCR扩增,合成风疹基因3个片段;以酶切连接法将3个片段拼接成全长rE1基因并克隆入pET32a构建成载体pET32-RV rE1,PCR、酶切和测序鉴定结果表明,合成的E1基因大小、序列与预期相符;构建获得重组质粒pET32-RV rE1.结论:成功合成了密码子优化的风疹病毒E1基因并构建其重组质粒pET32-RV rE1.     

酶解双醛淀粉固定化脲酶的酶学性质

采用酶解双醛淀粉固定化脲酶,并对相应的固定化脲酶的性质进行了研究.扫描电镜分析表明,酶解双醛淀粉固定化脲酶后,载体之间形成较大的团状.研究发现:酶解双醛淀粉固定化脲酶量达到24.3%;酶解双醛淀粉固定化脲酶的最适pH值为6.0,最适作用温度为70℃;固定化脲酶具有很好的储存稳定性和较高的米氏常数,且重复使用10次后的活力仅下降约25%.说明酶解双醛淀粉能有效固定化脲酶,是一种高效的固定化酶载体.     

猪皮胶原肽-锌螯合物的制备工艺研究

研究猪皮胶原肽-锌螯合物的制备工艺。以猪皮为原料,制备猪皮胶原肽-锌螯合物;以螯合率为指标,研究了猪皮胶原肽与锌质量比、pH、温度、时间对螯合率的影响;通过单因素试验、响应面法试验考察优化猪皮胶原肽的富锌工艺。结果显示,猪皮肽-锌螯合的最佳工艺为猪皮肽与锌质量比2:1,螯合pH 7.0,螯合温度50 ℃,螯合时间50 min,在此条件下,试验螯合率最佳,为69.27%,与模型预测值69.92%相近。该研究为新型生物肽 锌螯合物的研制、猪皮的高值化利用提供了依据。     

Quantitative structure-activity relationships of selected phenols with non-monotonic dose-response curves

Particular non-monotonic dose-response curves of many endocrine disrupting chemicals （EDCs） suggest the existence of diverse toxicity mechanisms at different dose levels. As a result, the biological activities of EDCs cannot be simply exhibited by unique EC50/LD50 values, and the quantitative structure-activity relationship （QSAR） analysis for non-monotonic dose-response relationship becomes an unknown field in the environmental science. In this paper, nine phenols with inverted U-shaped dose-response curves in lymphocyte proliferation test of Carassius auratus were selected. The binding interactions between the phenols and several typical EDCs-related receptors were then explored in a molecular simulation study. The estrogen receptor （ER）, androgen receptor （AR）, thyroid hormone receptor （TR）, bacterial O2 sensing FixL protein （FixL）, aryl hydrocarbon receptor （AhR）, and the peroxisome proliferator-activated receptor （PPAR） were the target receptors in the study. Linear regression QSAR models for the low and high exposure levels of the compounds were developed separately. The results indicated that the lymphocyte proliferation in the low-dose range might involve ER-mediated process, while the proliferation inhibition in the high dose range was dominated by the acute toxicity of phenols due to receptor occupancy and cell damage.     

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在儿科疾病中的临床应用

尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）是在临床应用最广泛的诊断肾脏病变的酶之一,NAG主要来自近曲小管的溶酶体,尿中含量相对稳定,其排泄异常提示肾脏损害,因此是肾小管损伤的敏感标志物,在很多儿科疾病中可以判断是否有肾脏损害和（或）严重程度。     

低温对两种油茶的生理生态效应

以广西油茶和湖南油茶为试验材料,研究在温度梯度下,两种油茶幼苗叶的最大光化学效率(Fv/Fm)和油茶中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)等抗氧化物酶的酶活性变化.结果表明:(1)温度使两种油茶的最大光化学效率(Fv/Fm)有所下降,但影响不明显.(2)低温处理后,广西油茶过氧化氢酶活性在20℃时最高,湖南油茶过氧化氢酶活性在15℃时最高;两种油茶中的超氧化物歧化酶活性均在20℃时最高;广西油茶中过氧化物酶活性在15℃时最高,湖南油茶过氧化物酶活性在10℃时最高.     

钒酸铵对肝微粒体谷胱甘肽过氧化物酶活性影响

研究钒酸铵对小白鼠肝微粒体中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响.采用钙沉淀法制备小白鼠肝微粒体,用GSH-PX试剂盒测定GSH-PX的活力.结果表明试验组与对照组相比,最小剂量组差异不显著(p＞0.05),其余试验组差异均极显著(P＜0.01),并且酶活性随着钒酸铵剂量的增大而降低.证明钒酸铵能降低小白鼠肝微粒体中GSH-PX的活性.     

PF6/缓冲液两相体系中固定化 β-葡萄糖醛酸苷酶催化特性研究

利用1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([BMIM]PF6)/缓冲液两相体系为介质,固定化β-葡萄糖醛酸苷酶催化甘草酸(GL)合成单葡萄糖醛酸甘草次酸(GAMG),以期改善酶催化效能.实验表明,当反应条件固定化酶为0.25g,两相体系中[BMIM]PF6的体积分数为35%,pH为5.0,反应温度为40℃时,酶活力最高达1 000U,远大于纯缓冲液单相体系中的最高酶活力450U.离子液体重复利用实验表明,[BMIM]PF6回收率高于85%,在含有重复回收的[BMIM]PF6介质中,固定化酶相对活力大于93%.     

Preparation of monoclonal antibody based indirect competitive ELISA for detecting 19-nortestosterone residue

19-Nortestosterone (NT) has been illegally used in horse racing to boost physical performance, and in animal husbandry to accelerate weight gain. To monitor the abuse of NT, our goal was to develop a commercial enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) kit. For this purpose, hybridomas were prepared by fusing NS0 mouse myeloma cells with splenocytes isolated from immunized BALB/c mouse. Noncompetitive and competitive indirect ELISA were used to screen positive cell clones. To optimize the indirect competiti...