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71.
人的基因组及DNA序列分析:过去,现在及将来(下) 总被引:7,自引:0,他引:7
对DNA序列分析方法如毛细管电泳、阵列毛细管电泳、超薄层板电泳作了详细评述。并对正在研究开发不用电泳分离的直接测序新技术和新方法,如质谱法、原子探针法(扫描隧道显微镜、原子力显微镜)、杂交法、流动式单分子荧光检测法等进行了评论。 相似文献
72.
采用固相萃取(SPE)纯化、富集,高效毛细管电泳(HPCE)分离和紫外光谱检测同时分离并测定水体和土壤样品中13种抗生素的含量。所采得的土壤样品需先经规定方法制成固态分析样品,并取此样品4.000g,用二乙胺四乙酸二钠0.8g、Mcllvacine缓冲溶液和乙腈(1+1)混合液提取样品3次(每次加入混合液20.0mL)。合并3次所得提取液(上清液),用0.22μm滤膜过滤后,按与水的体积比为1∶2.5加水稀释。此溶液待SPE纯化及富集。所采集的水样经0.22μm滤膜过滤后,用0.1mol·L~(-1) HCl溶液调节pH至5.0。此溶液继续进行SPE纯化及富集。分取上述土壤(或水样)样品溶液150mL,流经HLB SPE柱,用甲醇-水(10+90)混合液淋洗SPE柱除去杂质,随即用甲醇-乙腈(1+1)混合液2mL洗脱柱上吸附的抗生素,收集洗脱液,吹氮至近干,加入水300μL溶解残渣,所得溶液进入HPCE柱进行电泳分离,选择由65.0 mmol·L~(-1)硼砂和50.0mmol·L~(-1)硼酸组成的pH 9.0的缓冲溶液和甲醇及异丙醇(88+10+2)的混合液作为电泳介质,在分离电压为19kV,柱温为23℃,压力为3.45kPa条件下进样7s,13种抗生素可在25min内完全分离。选择在波长210nm处进行检测。13种抗生素的线性范围均在150μg·L~(-1)以内,检出限(3S/N)在0.40~1.0μg·L~(-1)之间。以空白基质进行加标回收试验,测得回收率在78.5%~107%之间。 相似文献
73.
74.
采用温和条件下的溶胶-凝胶技术,成功制备了阴离子交换-反相混合模式硅胶基质毛细管电色谱整体柱。通过调整反应液中不同前体的比例,优化了整体柱的制备条件。通过扫瞄电镜,对柱床进行了表征和分析。实验发现,所制备的整体柱电渗流的方向和大小可随流动相pH值的改变而改变,在酸性和中性条件下,具有从阴极流向阳极的电渗流;当流动相pH值升至约7.5时,电渗流方向发生了反转(由阳极流向阴极)。在优化的实验条件下,用所制备的整体柱对所考察的酸性(中性)化合物实现了快速分离,并获得了高达160,000N/m的柱效。 相似文献
75.
76.
在毛细管电色谱中,由于溶质在输运过程中所具有的电性质,常会产生一些特殊的现象。这些现象,如离子交换毛细管电色谱中产生超高柱效峰的现象,已经不能用一般的色谱理论加以解释。基于弛豫理论所建立的基本模型,在考虑溶质在两相中皆有可能发生正、反向迁移的情况下,得到了流出曲线一阶原点矩和二阶中心矩的理论表达式,并通过对溶质在两相中电扩散速率与电泳速率、电渗流速率关系的分析结果证实:溶质在固定相表面的电扩散行为可以使其保留变弱,出峰加快;而这种电扩散导致的超常柱效峰的出现具有不稳定性,只有在多方面因素综合影响匹配的情况下才可能出现。 相似文献
77.
78.
PengZHANG JiCunREN ZuoJunSHEN 《中国化学快报》2004,15(9):1091-1094
In this paper, we first presented a novel method for quantification of circulating DNA in human serum based on capillary zone electrophoresis with laser-induced fluorescence detection (CZE-LIF). The serum was digested by proteinase to release free DNA, and then CZE-LIF system was used for the quantification of total circulating DNA. This method was successfully used to quantify the circulating DNA levels in sera from healthy individuals and certain cancer patients.We found the significantly elevated circulating DNA levels in certain prostate cancer patients. Our results demonstrated that CZE-LIF system has good linearity, excellent sensitivity (0.5 ng/mL DNA),satisfactory reproducibility (RSDs in one day and between days were both less than 5%) and reliability, and is well suitable to the quantification of the circulating DNA in human serum or plasma. 相似文献
79.
动力学涂层毛细管电泳分离双链脱氧核糖核酸片段 总被引:2,自引:0,他引:2
以异丙醇为聚合反应链转移试剂,水相法合成了短链聚N,N-二甲基丙烯酰胺(PDMA),研究表明,该聚合物能在毛细管内壁形成稳定的动力学涂层,从而有效地抑制电渗流和毛细管内壁与DNA的作用。这种介质被成功地应用于DNA片段的高效分离。 相似文献
80.
QianWANG XuXU 《中国化学快报》2003,14(12):1278-1280
The mixtures of two polymers, poly (N,N-dimethylacrylamide) (PDMA) and polyvinylpyrrolidone (PVP) were synthesized and used as the separation medium for double-stranded and single-stranded DNA fragments by capillary electrophoresis with UV detector. On optimal conditions, 2%w/v PDMA 2%w/v PVP can be used to separate the doublet 123/124bp in pBR322/Hae Ⅲ Markers. 相似文献