桑园春季管理技术

桑园春季管理技术措施是：做好肥水管理，病虫害防治，中耕除草，桑树降杆，间作套种．以提高桑叶质量和产量，为养好蚕奠定良好的基础。     

人工饲料育家蚕/杆状病毒表达猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2基因

以重组病毒Bm-BacPAK6-E2接种全龄人工饲料育及5龄桑叶育家蚕皓月×菁松幼虫、蛹,观察重组病毒的感染发病情况,调查病蚕、蛹的采血量并进行SDS-PAGE分析.结果表明,全龄人工饲料育家蚕接种重组病毒的成功率、采血量等指标均与5龄桑叶育相近,SDS-PAGE蛋白质电泳在家蚕幼虫、蛹血淋巴中均检测到1条与目的蛋白理论分子量(63 kD)相符的特异性蛋白条带,初步认为是重组病毒Bm-BacPAK6-E2的融合表达产物.     

中药中α-糖苷酶抑制剂的筛选

本文通过在α—糖苷酶水解麦芽糖的体系中加入一定量的中药提取物，并采用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的释放量，建立了一个中药中α—糖苷酶抑制剂的筛选模型．应用该模型对糖尿病治疗中药的筛选结果表明，桑白皮、桑枝以及桑叶等十种中药被证实有α—糖苷酶的抑制剂活性，可以有效地抑制或延缓淀粉和麦芽糖水解为葡萄糖，揭示了中药降糖的另一种机理，并为开发安全有效的糖尿病治疗中药提供了新的思路。     

桑叶中脂肪酸的GC-MS分析

用正己烷提取桑叶中的脂肪酸,经皂化、酯交换法处理后,气相色谱-质谱(GC-MS)联用分析和鉴定脂肪酸的化学成分。结果是,共分离出24种化合物,鉴定了其中的19种脂肪酸,占脂肪酸总含量的93．18％。桑叶中脂肪酸的成分以棕榈酸(26．87％)、亚麻酸(22．99％)、亚油酸(13．40％)、硬脂酸(6．99％)、油酸(3．17％)、花生酸(3．43％)、棕榈油酸(3．05％)、山萮酸(2．93％)、蜡酸(1．63％)等为主。     

差示分光光度法测定桑叶总黄酮含量

以芦丁为观测指标,差示分光光度法测定桑叶总黄酮化合物的含量,以控制桑叶的品质。在420nm波长下,芦丁对照品在2.575-15.450μg/mL范围内,差示吸收值(△A)与浓度呈良好线性关系(r=0.9997),回归方程为△A=0.0055 0.03579C,平均加样回收率为102.64%,RSD为1.08%(n=6)。差示分光光度法具有操作简单、结果真实准确、重现性好等优点,可作为桑叶品质控制检测方法。     

桑叶总黄酮对蛋白质硝基化的抑制作用及其机理

研究了桑叶总黄酮对蛋白质硝化反应的抑制作用及其抑制机理.以牛血清白蛋白(BSA)为硝化底物、ONOO-为硝化试剂,pH 7.2的PBS缓冲溶液为反应体系,根据428nm处吸光度的变化来反映硝基蛋白含量的变化.实验研究发现,在37℃,pH 7.2,反应时间90min以及BSA与ONOO-终浓度比为1∶6,桑叶总黄酮的浓度为3.640×10-3 g.L-1时,对硝化反应的抑制作用最强,抑制率可达55.70%.推测其抑制机理可能是桑叶总黄酮与ONOO-直接作用或清除ONOO-均裂产生的.OH和.NO2,进而抑制硝化反应的进行,而不是还原硝基化产物.桑叶总黄酮对硝化反应较强的抑制作用,为开发桑叶总黄酮为蛋白质硝化反应的抑制剂提供了理论依据.     

桑叶提取物中槲皮素和山萘酚的含量测定

建立HPLC法测定桑叶提取物中水解槲皮素和山萘酚的含量．先用甲醇-盐酸混合液（甲醇终浓度50％,盐酸终浓度2．0mol·L^-1）水解桑叶提取物中的黄酮类成分成槲皮素和山萘酚,以HPLC法测定槲皮素和山萘酚含量．色谱柱为Diamonsil钻石C18柱,流动相为甲醇-0．2％磷酸（63：37,体积分数）,流速为1．0mL·min^-1,检测波长为370nm．结果表明槲皮素在0．84～26．8μg·mL^-1之间,山萘酚在0．44～14．2μg·mL^-1之间呈良好的线性关系,平均回收率分别为101．3％和99．5％．该测定方法准确、重复性好,可用于桑叶提取物中槲皮素和山萘酚的含量测定．     

桑叶HILIC特征指纹图谱研究

应用亲水色谱法(HILIC)建立了桑叶药材的指纹图谱,并对10批桑叶样品进行分析,为桑叶药材的真伪鉴别及质量控制提供了新方法。采用HILIC XBridgeTMAmide色谱柱,以乙腈-水(含0.2%甲酸、20mmol/L甲酸铵、20%甲醇)为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,柱温为25℃,检测波长为322 nm,进样量为20μL。该方法具有良好的精密度、重现性和稳定性,检测的10批桑叶指纹图谱有17个共有峰,4个特征峰,采用ESI-TOF/MS对4个特征峰进行了指认,结合相似度分析可以用于不同产区桑叶药材的鉴别。桑叶HILIC指纹图谱有望成为桑叶药材真伪鉴别及质量控制的有力工具。     

超高压提取桑叶芦丁

考察了常温下超高压提取桑叶芦丁的提取工艺,观察了不同提取溶剂、提取压力、溶剂与原料比、提取时间及桑叶颗粒大小等因素对桑叶芦丁提取率的影响,并对提取工艺进行了优化。桑叶芦丁的最佳萃取条件为:70%乙醇水溶液为提取溶剂,提取压力为500MPa,提取时间为8min,桑叶颗粒大小为0.18～0.25mm,溶剂与原料比为20∶1,桑叶芦丁提取率达23.9mg/g。     

桑叶不同溶剂提取物对DPPH自由基的清除作用

采用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯4种有机溶剂冷浸提取,分别得到了甲醇提取物(ME)、乙醇提取物(EE)、丙酮提取物(AE)和乙酸乙酯(EAE).然后采用二苯代苦味酰肼自由基(DPPH)法对不同质量浓度的各提取物进行了自由基清除实验.结果表明,4种溶剂提取得到的桑叶提取物对DPPH自由基均有一定的清除作用,不同溶剂所得提取物对自由基的清除作用有差别,其中以丙酮提取物的效果最佳.桑叶可作为抗氧化物质资源开发利用.