基于转录组高通量测序分析白光对杜仲愈伤组织中绿原酸含量的影响

利用Illumina HiSeq 2500平台对光暗培养的杜仲愈伤组织进行了转录组高通量测序,利用BLAST软件进行差异表达基因的功能注释和富集分析,就白光(光强为12 000 lux,16 h 光照,8 h 黑暗)对杜仲愈伤组织中绿原酸含量的影响进行了研究.结果表明:通过Trinity软件合并组装后共获得62 030个Unigenes,通过BLASTX比对,共获得25 417(40.98%)个有注释信息的Unigenes.通过对KEGG通路进行深入分析表明,白光(光强为12 000 lux,16 h 光照,8 h 黑暗)培养杜仲愈伤组织18 d,与绿原酸合成相关的3种酶基因上调表达,它们分别为苯丙氨酸解氨酶(EC 4.3.1.24,phenylalanine ammonia-lyase,PAL)、肉桂酸-4-羟基化酶(EC 1.14.13.11,trans-cinnamate 4-monooxygenase,C4H)、奎宁酸羟基肉桂酰转移酶(EC 2.3.1.133,Shikimate o-hydroxyl-cinnamoyltransferase,HCT).由此推断,白光能促进杜仲愈伤组织中绿原酸的积累.研究结果为获取高产绿原酸资源和杜仲遗传分析提供有价值的资料.     

药材醇提物对骨质疏松小鼠生化指标影响的比较

研究淫羊藿、杜仲、骨碎补单味药材醇提物对实验性骨质疏松症小鼠骨代谢生化指标的影响．采用维甲酸灌胃造成小鼠实验性骨质疏松症模型,同时灌服杜仲、淫羊藿、骨碎补单味药材醇提取物,检测小鼠血清总碱性磷酸酶、血清骨钙素、血清游离钙、血清羟脯胺酸／肌酐值指标的变化．与模型组相比,淫羊藿醇提物可以使骨钙素和血清游离钙的水平显著下降;杜仲醇提物可以使血清总碱性磷酸酶显著升高;骨碎补醇提物可以使血清羟脯胺彰肌酐值显著下降．淫羊藿、杜仲、骨碎补单味药材醇提物对维甲酸所致小鼠骨质疏松症有一定的防治作用．但作用方式有一定的差别．     

高效液相色谱法测定杜仲壮骨丸中马兜铃酸A

建立反相高效液相色谱法测定杜仲壮骨丸中马兜铃酸A含量的方法。取50粒杜仲壮骨丸样品,碾细,称取样品粉末1.0 g至具塞锥形瓶中,加入40 mL甲醇溶液,称重并记录,超声40 min (功率为500 W,频率为40 kHz),冷却后再次称重,用甲醇溶液补足损失的重量,摇匀,用0.22 μm过滤膜过滤,得样品溶液,采用Phenomenex Luna C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)为分离柱,流动相为水–甲醇溶液(体积比为1∶4),流量为1.0 mL/min,检测波长为315 nm,柱温为35 ℃。马兜铃酸A的质量浓度在0.007 5～0.150 μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数为0.999 8,方法检出限为0.001 μg/mL。测定结果的相对标准偏差为0.96%(n=6),样品加标平均回收率为99.27%。该方法专属性强,适用于杜仲壮骨丸中马兜铃酸A的含量测定及质量控制。     

杜仲叶中绿原酸类物质的提取研究

该文首先采用Ｅｔ２Ｏ－ＥｔＯＨ回流法从产于江西九连山自然保护区的杜仲叶中提取绿原酸类物质、然后用铅盐沉淀，酸化，ＥｔＯＡｃ萃取，重结晶等手段对绿原酸类物质进行纯化，平均得率为０．３１％，取得了预期的结果。     

杜仲对运动疲劳大鼠肾脏的保护作用研究

探讨杜仲提取物对运动疲劳大鼠肾脏组织的保护作用以及对相关生理生化指标的影响。建立运动疲劳动物模型,测试与大鼠肾脏组织抗氧化水平相关的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量等系列指标;测试表征肾脏结构与功能相关的尿液总蛋白(TP)、尿液白蛋白(Alb)、尿液β2-微球蛋白(β2-MC)含量。与安静对照组比较,运动对照组SOD,GSH-Px,CAT活性及GSH含量下降,总抗氧化能力(T-AOC)降低,MDA含量上升(P0.05或P0.01);与安静对照组比较,运动对照组TP,Alb和β2-MC含量升高(P0.01)。服用杜仲提取物组大鼠力竭运动后肾脏组织SOD,GSH-Px,CAT酶活性显著高于运动对照组(P0.05/P0.01);肾脏组织GSH含量显著高于运动对照组(P0.05),总抗氧化能力(T-AOC)提高,MDA含量显著低于运动对照组(P0.05);TP,Alb和β2-MC含量低于运动对照组(P0.05)。杜仲提取物可以改善长时间大强度耐力运动中肾脏组织的氧化应激水平,保护肾脏组织抗氧酶活性,维持运动训练大鼠肾脏组织结构和功能,降低尿蛋白含量,提高大鼠抗疲劳能力。     

邻体干扰推广模型及其在林草生态系统的应用

在对邻体干扰指数模型进行推广的基础上,将其应用于分析林草生态系统（杜仲－三叶草,杜仲－黑麦草,杜仲－蒿类）中杜仲生长速度与草本植物邻体干扰强度的定量关系。     

杜仲中松脂醇二葡萄糖甙的提纯

对杜仲中活性成分松脂醇二葡萄糖甙(PinoresinolDiGlucoside,即PDG)提取、纯化工艺进行了研究,并使用高效液相色谱法测定PDG含量.结果表明:杜仲粉用体积分数为60%的乙醇水溶液,60℃,提取2次,每次1h,PDG提取率可达90%以上.分别采用4种大孔树脂对提取液进行分离纯化处理,以不同浓度的乙醇水溶液进行梯度洗脱,发现S型树脂对此种活性成分选择性好、吸附量大,用体积分数为40%的乙醇水溶液洗脱可将其完全解吸附,PDG的收率达45.2%.在C18色谱柱上,以体积分数为26%的甲醇水溶液为流动相,流速为1.0mL/min,在λ=228nm处,对杜仲原料中PDG进行了测定,结果表明炮制后的杜仲皮的PDG质量分数较高,为0.497%.     

高温下杜仲胶的激光喇曼光谱研究

本文研究了高温条件下杜仲胶的激光刺曼光谱。发现在５６℃，６５℃、１００℃下杜仲胶的刺曼散射峰的位置和强度与其它温度相比有明显的差别。在１５００ｃｍ＾－１至１６００ｃｍ＾－１的中频振动区域出现了三个新的喇曼峰。讨论了杜仲胶的喇曼光散射光谱随温度变化的一般规律，并利用简正坐标分析方法说明了新峰产生的结构因素。     

两种醇沉方式对杜仲水提液中氯原酸含量的影响

对一次醇沉及多次醇沉后杜仲水提液中氯原酸的含量做了对比分析。结果表明，分次醇沉比一次醇沉所得的产品纯度高，当乙醇浓度最终为９０％时，一次醇沉的损失率为１８．９％，而分次醇沉的损失率仅为６．８％。     

近红外光谱技术结合化学计量学快速测定杜仲中松脂素二葡萄糖苷和京尼平苷酸的含量

应用近红外光谱技术并结合化学计量学建立杜仲中松脂素二葡萄糖苷(PDG)和京尼平苷酸(GPA)含量测定模型。以积分球漫反射方式采集近红外光谱数据,应用一阶微分、多元散射校正(MSC)等优选光谱数据预处理方法和竞争自适应加权采样(CARS)筛选最优波长变量,采用偏最小二乘法(PLS)和交叉验证法建立PDG和GPA的定标模型。PDG和GPA的定标模型显示出良好的预测效果,其校正集的相关系数分别为0.961 5和0.958 3,交互验证均方差分别为0.001 5和0.006 4。表明此快速预测模型准确可靠,适合快速测定杜仲中的PDG和GPA,为杜仲质量控制在线化提供了新思路。