水稻OsGASR4基因及其启动子的克隆与表达分析

对前期克隆的水稻GAST基因家族新成员OsGASR4开展研究,利用DNAMAN软件分析水稻OsGASR4进化树;检测GA处理野生型和d 18水稻突变体后OsGASR4表达变化;利用RT PCR方法分析该基因的时空表达特性;克隆了该基因上游长约2 082 bp调控序列,并利用网络工具预测启动子顺式作用元件,构建OsGASR4启动子GUS融合表达载体,通过农杆菌介导的水稻遗传转化.结果表明:OsGASR4蛋白具有典型的GASA保守结构域,启动子里含有多个与激素响应元件、光诱导相关元件以及逆境胁迫响应元件;GA_3处理降低了OsGASR4转录水平;RT PCR检测和GUS染色的结果表明,OsGASR4在水稻茎和幼穗的表达量相对较高.表明OsGASR4可能作为GA信号途径的抑制因子参与水稻茎和穗的早期发育.     

草鱼原肌球蛋白基因的克隆及其组织表达

为揭示原肌球蛋白基因在草鱼肌肉中的作用,利用RT-PCR和RACE技术克隆获得了草鱼原肌球蛋白基因c DNA,并对该基因在普通草鱼和脆肉鲩不同组织中的表达情况进行研究分析。结果表明原肌球蛋白基因c DNA全长序列为1 705 bp,包含387 bp的5′UTR序列,1 307 bp的3′UTR序列和855 bp开放阅读框(ORF)。其ORF编码284个氨基酸。系统进化分析表明普通草鱼与斑马鱼、墨西哥脂鲤的原肌球蛋白基因核苷酸同源性分别是93%和87%,氨基酸同源性分别是96%和93%。在聚类上普通草鱼原肌球蛋白基因与其他鲤科鱼类同源性较高,表明亲缘关系最近,与传统分类相一致。Real time-PCR结果表明原肌球蛋白基因在所检测的普通草鱼和脆肉鲩7个组织中均有表达,原肌球蛋白基因在普通草鱼腹肌中表达最高,其次为前肠。原肌球蛋白基因在脆肉鲩腹肌中的表达低于普通草鱼,而脆肉鲩中肌肉、肝脏、肾脏、前肠、后肠中原肌球蛋白基因表达量大于普通草鱼相对应组织,但差异不显著。     

抗原化抗体及其应用

抗原化抗体是在抗体分子可变区的互补决定区中插入外源蛋白寡肽的人工构建抗体，综述了抗原化抗体的性质，构建方法，应用及展望。     

外源基因在转基因油菜后代中的表达及遗传学分析

以转基因油菜后代（Ｒ１和Ｒ２代）株系为材料，系统地研究了苏云金杆菌杀虫蛋白基因ＣｒｙⅠＡ和选择标记基因ｎｐｔⅡ导入油菜后的遗传规律，表达强度和抗虫效应。结果表明：Ｒ１代卡那霉素抗性为３：１分离方式，在Ｒ２代卡那霉素抗性植株中，有三分之一为ｎｐｔⅡ基因纯合型（Ｔ：Ｔ）另三分二为复合型（Ｔ：Ｏ），其遗传方式符合孟德尔单因子显性遗传；转化植株可耐受１５０ｍｇ／Ｌ那卡霉素的选择压力，约一半的转化植株具有杀     

一个新的PMA诱导相关基因在Pichia pastoris酵母系统中的表达

利用包含 40 96条各种人类基因的DNA芯片研究了代谢增强剂PMA(phorbolmyristateacetate)激活的人单核巨噬细胞HTP 1的早期应答基因 ,根据已有的旧基因信息 ,实验结果基本反映了人单核巨噬细胞早期应答基因的表达谱 .选取其中一条候选早期应答基因为后续研究对象 ,并进行蛋白质的酵母表达 ,为下游的基因功能研究奠定一定的基础 .     

λ噬菌体的溶原和溶菌过程与基因表达的时序控制

本文从λ噬菌体的生活周期入手，介绍了λ噬菌体的基因组结构及基因的表达过程和方式，展示了λ基因组表达的时间流程．     

Expression and Emmprin Regulated Function of Aquaporinl in SMMC7221 Cells

<正>Herein lie the crosstalk and regulation between AQP1 and Emmprin in SMMC7221 cells by means of siRNA technology and deglycosylation method.Firstly,HAQP1,rather than hAQP3,was selectively upregulated in SMMC7221 cells by FBS,flollowed by the upregulated expression of Emmprin.Emmprin gene silencing caused a remarkable change in the expression of AQP1 gene,just like its downstream gene,MMP9,meanwhile the water permeability and cell migration were also descended prominently.Furthermore,when treated with tunicamycin, Emmprin was deglycosylated,which made the expression of AQP1 significantly declined,followed by remarkably decreased cell membrane water permeability and cell migration.Taken together,all the data indicates the expression level and the modification of Emmprin by glycosylation are the key factors in regulating the expression of AQP1.     

微型腺病毒载体的扩增和纯化研究

微型腺病毒（mAd)是去除所有编码基因，仅保留两侧反向末端重复序列（ITR）及包装信号（ψ）的新型腺病毒载体。它具有包装容量大，免疫原性小等优点。在大量扩增时，需与缺失E1区及包装信号的辅助腺病毒共转染入包装细胞（293细胞）内，CsCl超离心纯化，将二者分开。再通过琼脂糖覆盖挑斑、在包装细胞内大量扩增、CsCl超离心纯化等步骤，最终得到较为纯净的mAd。但因mAd结构不稳定，易与辅助病毒发生同源重组，在CsCl超离心时不能完全与辅助病毒分开，导致外源基因表达逐步下降。     

基因表达系统与转基因动物乳腺反应器

出于研究、医疗或工业目的，常常需要大量置备各种生物活性蛋白质，为此已经建立了多种基因工程表达系统，如微生物发酵系统、真核细胞培养系统、转基因植物表达系统和转基因动物表达系统等。近几年，利用转基因动物作为生物反应器由乳汁中生产蛋白药物的研究取得了很大进展，有多种动物可被用于转基因。基本过程是将基因构件显微注射到单细胞期受精卵，基因构件以一定几率整合到受体基因组中。通常转基因和其表达模式可忠实地遗传。许多蛋白将以高浓度低成本由转基因家畜的奶中生产。这些转基因动物与传统的动物细胞培养和细菌发酵技术相比尤显高效。乳腺能完成包括二硫桥形成、酰胺化、羧基化和糖基化在内的翻译后修饰，１头转基因羊就是１套发酵罐。据预测，到２０１０年由转基因动物生产的蛋白药物占全部基因工程药物的比率将增长到９５％以上。