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111.
抑制性消减杂交方法的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
为建立研究基因表达差异的抑制性消减杂交(SSH)方法,以未加诱导剂处理的结肠癌LoVo细胞提取的mRNA为模板合成的cDNA作为驱赶子(driver),联合使用10.0μmol/LATRA和0.1μmol/L1,25-(OH)2D3诱导2d的LoVo细胞提取的mRNA为模板合成的cDNA作为测试子(tester)进行SSH实验,结果为:消减产物与未消减样品(对照)在琼脂糖凝胶电泳图谱上明显不同,前者可见一些扩增条带,其大小范围在100-1000bp之间,本实验说明SSH方法对于识别差异表达的基因具有高效性。 相似文献
112.
金属离子和热激处理对菊芋(Helianthus tuberosus L.)类金属硫蛋白基因htMT2表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
使用不同金属离子及热激对菊芋进行了处理,并对菊芋不同组织器官中类金属硫蛋白基因(htMT2)mRNA水平的变化进行了研究.结果表明,htMT2在根中不表达,而且其表达不受金属离子的影响.Cu^2 降低叶中htMT2的表达,Cu^2 浓度与茎、叶中的htMT2 mRNA水平呈负相关性.在低浓度范围内,Zn^2 浓度与茎、叶中的htMT2 mRNA水平呈正相关性,而在高浓度范围内,Zn^2 浓度与htMT2 mRNA水平呈负相关性.Ca^2 对叶中htMT2表达的影响与Zn^2 的作用相似,但Ca^2 诱导茎中htMT2 mRNA水平升高.热激处理对不同组织中htMT2的表达无显著影响.研究的结果表明,htMT2表达受金属离子影响的特征与植物MT基因一致,进一步证实了我们前期工作中分离到的htMT2是一个新的植物MT基因. 相似文献
113.
目的:构建可溶性白细胞介素6受体(IL-6R)β亚基(sgp130)重组痘苗病毒,感染动物细胞使其表达sgp130,用重组病毒免疫动物产生特异性抗sgp130抗体。方法:将sgp130基因导入痘苗病毒载体pJSA1175,用脂质体转染法将重组载体与野生型痘苗病毒在TK-143细胞中发生同源重组,用BudR和X-gal双重选择,得到带有人sgp130的重组病毒(Vsgp130)。结果:采用IDA和WesternBloting法证实,感染Vsgp130的TK-143细胞上清中有较强的sgp130表达,表达产物分子量为100000左右。用重组病毒免疫家兔和Balb/c小鼠,可刺激抗体产生。结论:sgp130在痘苗病毒载体系统中的表达成功及抗sgp130多克隆抗体的产生为进一步研究IL-6等细胞因子信号传导机理及研制抗sgp130单克隆抗体奠定了基础。 相似文献
114.
植物生物反应器瞬时表达外源蛋白的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
植物生物反应器瞬时表达外源蛋白是一种经济的生产方式。而且此种方法安全性高,实验周期短,见效快,为实现医用蛋白的产业化生产提供了一条捷径。本文综述了植物生物反应器瞬时表达体系的种类、特点、接种方法和研究现状。 相似文献
115.
为了探讨水体重金属铜对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的生长和免疫的毒性作用,分别将草鱼在不同质量浓度的Cu~(2+)溶液中暴露30、60和90 d,检测了草鱼的均重和增重率的变化,以及草鱼肾脏中6种免疫相关基因表达的变化.结果表明:与对照组相比,各质量浓度Cu~(2+)暴露均使草鱼在30、60和90 d后的均体质和增体质率下降;0.40和0.60 mg·L~(-1)质量浓度Cu~(2+)暴露60和90 d后,IL-1β,CCL4和TNF-α基因在草鱼肾脏中的表达量均极显著升高(P0.01),而IFN-γ和IgM基因在草鱼肾脏中的表达量均显著或极显著下降(P0.05或P0.01);Cu~(2+)暴露30、60和90 d后,草鱼肾脏中MT基因表达量均随着Cu~(2+)质量浓度的增加先升高后下降,在Cu~(2+)质量浓度为0.10 mg/L时达到最大值.综上,高质量浓度和长时间的Cu~(2+)暴露阻碍了草鱼的生长,引起了草鱼肾脏细胞的炎症反应,降低了草鱼的免疫功能. 相似文献
116.
拟南芥开花基因FT对根毛生长的影响研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为进一步研究成花素(FLOWERING LOCUS T,FT)基因对植物营养生长的影响,通过结合qRT-PCR和生理学实验的方式对FT过表达及突变体植株进行比对分析.研究发现,FT过表达植株与野生型相比,其根毛短且稀疏,且具有分叉型、膨大型、波浪型等极性生长缺陷表型;相反,突变体ft-10的根毛相对长且密集,略优于野生型,无极性生长缺陷表型.通过实时定量PCR分析与根毛起始伸长过程相关基因KOAJK、SCN1、RHD2、LRL3、RSL4、RHD6的表达量,FT过表达植株显著低于野生型,而突变体ft-10略高于野生型.结果表明,FT基因在根毛起始伸长过程中起负调控作用,影响根毛的极性生长及数量分布.本研究增加了对FT基因在营养生长过程中功能的认识,同时也为深入研究根系发育的分子机理奠定了基础. 相似文献
117.
118.
2010年研究生数学建模竞赛A题综述 总被引:1,自引:1,他引:0
第七届全国研究生数学建模竞赛A题是生物信息学中的一个急需解决的问题.虽然有关问题的研究已经经历了十多年,但由于问题的复杂性,人们的认识还很局限,基本的结论大多还以定性的为主,定量的探讨正方兴未艾.对参赛队员来讲解决该问题是一个极大的挑战.研究生们在讨论该问题时,大多直接进行分类.然而对于一个小样本的学习问题,显然这样做是行不通的.所以问题的关键是从数学和生物学角度减少用于分类的特征数目.同时,对于获取的基因标签,需要从临床上或生物学角度找到验证.该问题的求解过程引导研究生们从数学建模走向解决实际问题. 相似文献
119.
基于神经网络MIV值分析的肿瘤基因信息提取 总被引:1,自引:0,他引:1
运用统计学及数据挖掘相关知识,以结肠癌基因表达图谱为研究对象,综合运用GB指数、BP神经网络、小波变换等方法对问题给出求解的过程和结果.首先采用GB综合指数对无关基因进行筛选,选择两组备用基因的交集(114个)作为信息基因,降低基因维度.其次,用基因间的强相关性剔除冗余基因,利用BP神经网络对基因进行错判数计算,选取错判率最低、基因子集中基因数量最少的基因特征组,再利用平均影响值(MIV)方法进行基因筛选,最后进行错判数计算,最终确定含有12个基因的子集为最优基因组合.第三步,将每组基因表达值看做基因信号,运用小波转换法对基因数据进行去噪,去噪后特征基因减少为8个. 相似文献
120.
干旱已成为小麦生长发育、产量与品质最重要的限制因素之一.为探究独脚金内酯(SLs)对小麦幼苗干旱胁迫的缓解效应,笔者以20%PEG-6000作为中度干旱胁迫处理水培的小麦品种百农207,以0.8μmol·L-1人工合成的独脚金内酯类似物GR24(rac-GR24)进行灌根处理,对干旱胁迫下小麦幼苗的长势、叶片相对含水量、叶绿素含量、抗氧化系统和渗透调节物质,以及SLs信号转导和脱落酸(ABA)等激素相关基因表达谱进行分析.研究结果表明,GR24能有效缓解干旱胁迫对小麦幼苗生长的抑制作用,与干旱胁迫相比,GR24处理后干物质含量增加了40.9%,总叶绿素含量和PSⅡ的最大光化学效率Fv/Fm分别提高了23.6% 和84.3%,脯氨酸含量降低了41.7%,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性分别增加了8.4%,6.2%,12.6%,还原型谷胱甘肽(GS H)的含量和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GS H/GSSG)比值分别提高了43.9% 和84.2%,活性氧水平显著降低,过氧化氢(H2 O2)和丙二醛(MDA)含量分别降低了26.3% 和31.6%,根部SLs信号转导基因TaD14,TaMA X2,TaD53的表达量显著上调了18.4%,23.5%,12.3%,叶片ABA合成基因TaNCED1的表达量显著上调了12.5%,而ABA分解基因TaHYD1的表达量显著下调.因此,独脚金内酯提高了干旱胁迫下叶绿素含量和光合效率,增强了叶片的抗氧化能力,促进了SLs信号转导和ABA积累,从而促进了小麦幼苗的生长,有效提高了小麦幼苗的抗旱性.上述结果可为进一步研究SLs调控小麦耐旱胁迫的分子机制奠定基础. 相似文献