重构新型血管内皮生长因子在毕赤酵母中的表达、纯化与功能鉴定

血管内皮细胞生长因子为内皮细胞特异的刺激因子,在缺血治疗中具有应用前景.本文通过PCR的方法将VEGF165纤溶酶酶切位点突变并将肝素结合域融合到VEGF165的C末端,且将其进行了酵母表达,并纯化了酵母表达产物,对它的生物活性进行了初步鉴定.结果表明,改构的VEGF可形成蛋白二聚体,且仍保留体外刺激血管生成的能力.VEGF的重构成功与表达产物的获得,为进一步研究其功能奠定了基础.     

UPLC-MS/MS法测定22种农产品中杀螺胺乙醇胺盐残留

建立了超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定22种农产品中杀螺胺乙醇胺盐残留的分析方法。样品采用改进的QuEChERS方法进行前处理,使用1%甲酸乙腈提取,利用弗罗里硅土进行净化,采用C18色谱柱进行分离,电喷雾离子源负电离方式和多反应监测模式检测,基质外标法定量。结果表明,22种农产品基质中杀螺胺乙醇胺盐在0.005～0.10μg/mL范围内均呈现良好的线性关系;在茶叶中的检出限为0.003 mg/kg,定量下限为0.01 mg/kg,在其它基质中的检出限为0.002 mg/kg,定量下限均为0.005 mg/kg。在低、中、高3个加标水平下,平均回收率为77.3%～115%,相对标准偏差（RSD）小于10%,符合残留分析方法要求。该方法简单快速,试剂消耗较小,可满足农产品中杀螺胺乙醇胺盐的检测需求。     

嗜酸乳杆菌和青春双歧杆菌的最佳酸奶发酵条件的微量量热法研究

利用微量量热仪研究了嗜酸乳杆菌和青春双歧杆菌的发酵条件.首先绘制了各菌的热功率-时间曲线,计算出各菌的生长速率常数,确定了嗜酸乳杆菌、青春双歧杆菌及它们的混合菌生长的最佳pH和最佳温度.最后对发酵酸奶的质量进行了评价.     

双价酵母在15-30kg小猪饲料中的应用效果研究

本文选用15kg左右的大×长×太三元杂交瘦肉型小猪56头,设1个对照组,3个实验组分别在对照组的基础上添加不同剂量的双价酵母,以探讨双价酵母饲料添加剂的饲养效果。结果表明：双价酵母饲料添加剂1%添加量可明显促进15-30kg仔猪生长速度,提高饲料利用率,提高仔猪的抗病能力（尤其是由细菌性引起的胃肠道疾病）,替代饲料中的生长促进剂。同时改善养殖环境,降低饲养成本。     

新型酵母使植物纤维转化的两种糖同时发酵

随着世界能源短缺趋势的日益严重,生物燃料作为一种可再生能源,成为解决能源危机的途径之一。以植物纤维素为主要原料的第二代生物能源不仅使用的是玉米秸秆、谷物秸秆等农业废弃物,以及锯屑和纸浆等工业废弃物,而且可以减少二氧化碳的排放量高达89％,减缓传统生物能源对粮食作物消耗的压力。     

管囊酵母D-21木糖乙醇发酵条件的优化

对一株能利用木糖产乙醇的管囊酵母D-21进行了发酵条件的优化,研究了接种量、氮源、碳源和维生素对乙醇产量和还原糖利用率的影响。结果表明:接种量过高会影响乙醇产量,以6%(体积分数)为宜;当木糖质量浓度为50 g/L,碳氮质量比为20∶1,使用酵母膏和尿素组成的复合氮源时(质量比为2∶1),发酵72 h后所得乙醇质量浓度为12.5 g/L,达到理论产量的55%;当木糖与葡萄糖的质量比为3∶1时,乙醇质量浓度为15.72 g/L,为理论产量的69%;在发酵培养基中添加质量分数为2×10-5维生素B6可使乙醇产量提高18.3%。     

表达牛肉风味强化肽P.postoris GS115(pGAP9-16BMP)摇瓶发酵条件的优化

从碳源种类及质量浓度、氮源质量浓度、温度、pH等方面对构建的工程菌P.postoris GS115(pGAP9-16BMP)摇瓶发酵条件进行了优化.结果表明,最佳表达条件为:甘油30 g/L,蛋白胨40 g/L,酵母粉20 g/L,挡板三角瓶装液量为30%,菌体生长阶段控制温度32℃,初始pH 6.0,培养96 h.在此条件下,牛肉风味强化肽BMP(Beefy Meaty Peptide)表达量最高为41.9 mg/L.     

解淀粉芽孢杆菌中性植酸酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

采用PCR法从解淀粉芽孢杆菌BA11中克隆到一个中性植酸酶phyc基因,将该基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K上并电转化至宿主细胞GS115后进行诱导表达。SDS-PAGE试验表明:该重组中性植酸酶在毕赤酵母宿主细胞中实现了高效分泌性表达。植酸酶活性测定结果显示阳性克隆子在诱导72h酶活性达到最高值,活性为2330U/L。     

人肝中硒蛋白K相互作用蛋白的筛选与验证

以硒蛋白K(SelK)突变体为"诱饵", 采用酵母双杂交系统对人肝cDNA文库进行筛选, 得到一个与SelK相互作用的蛋白──环腺苷酸应答元件结合蛋白3(CREB3). 将SelK与CREB3共同转染酵母细胞, 验证了SelK与CREB3的相互作用; 并采用受体漂白、敏化发射和荧光寿命3种荧光共振能量转移方法进一步验证了二者间的相互作用, 发现其不受SelK中硒代半胱氨酸(Sec)的影响. 推测SelK可能通过其Sec之前的区域与CREB3发生作用, 参与CREB3介导的内质网相关降解过程, 影响相关癌症的转移和发展.     

(S)-1-苯基-1,2-乙二醇的合成

手性醇作为重要中间体可广泛用于药物﹑农药及食品添加剂等的合成,国内外已有许多相关的合成报道[1,2].二元手性醇具有光、热和化学稳定性,是材料科学及药物开发的重要原料,如(S)-1-苯基-1,2-乙二醇,它不仅是液晶中不可缺少的重要原料和手性添加剂,而且已成为制备具有光学活性的医药、农药和功能材料的重要中间体[3,4].