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31.
Beclin 1是哺乳动物自噬相关基因, 调控自噬起始和自噬体成熟. 在肌肉分化过程中, Beclin 1 基因表达上调, 自噬增加; 此外 MEK5-ERK5 信号活化并调控成肌细胞分化. 因此, 在肌肉分化过程中, MEK5-ERK5 信号通路可能调控 Beclin 1 基因表达. 目的是阐明 MEK5 对成肌细胞 Beclin 1 基因启动子活性的调控. 将不同长度 Beclin 1 启动子片段克隆至荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic并转染成肌细胞C2C12. 双荧光素酶报告基因检测实验结果显示, 含 Beclin 1 基因起始密码子上游 586 碱基对 DNA 片段的载体(p-354)具有强荧光素酶活性. MEK5$\alpha $显著增加 p-354 荧光素酶活性, 并有剂量依赖性; 而 MEK5$\beta $ 显著降低 p-354 荧光素酶活性. MEK5$\beta $能够拮抗 MEK5$\alpha $对 p-354 荧光素酶活性的调控. 与 MEK5 对 Beclin 1 基因启动子调控结果一致, MEK5$\alpha $CA 上调细胞Beclin 1 mRNA 表达, MEK5$\beta $DD 下调 Beclin 1 mRNA 表达, 并且 MEK5$\beta $DD 抑制 MEK5$\alpha $CA 对 Beclin 1 mRNA 表达的促进作用. 此外, 转录因子 CREB 家族成员 CREB3, CREBP 和 CREBL1 能够显著上调 p-354 荧光素酶活性. CREB3 呈剂量依赖性显著上调 p-354 荧光素酶活性, 并与 MEK5$\alpha $ 具有协同效应. MEK5$\alpha $ 和 MEK5$\beta $ 对 Beclin 1 启动子具有不同调控作用, CREB 可能是其下游效应因子. 相似文献
32.
借助于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法,对乳糖诱导的由乳糖启动子控制的大肠杆菌RNA聚合酶σ70因子基因表达过程进行了优化研究.结果表明,含此融合基因的大肠杆菌菌株BL21(DE3)pGEMD的生长量达到OD600nm=1.0时,用终浓度为0.08%的乳糖进行连续5h的诱导,可使大肠杆菌RNA聚合酶σ70因子基因的表达量达到最大,并达到IPTG同样的诱导效果.流加低浓度的乳糖溶液能增加σ70因子的合成量,但是促进作用不很显著. 相似文献
33.
直接从序列水平识别启动子(Promoter)有重要的学术价值和可观的经济价值。但是一直没有一个第一、二类错误都小于30%的识别软件。在统计基础上,本文指出了简单利用权重矩阵或保守序列识别启动子的传统方法效果不佳的原因,提出了以转录因子结合位点(Transfactor Binding Sites,TFBSs)的相互作用的信息为基础的启动子识别模型;本文首次指出了7-tuple在启动子识别中的重要作用,提出了无需TFBSs数据库的自学习方法。本文给出了基于上述思想进行的一些统计,并设计了一套启动子识别方法。其在多个检测集上的平均识别结构为:第一类错误小于24%,第二类错误小于21%;最差识别结果为:第一类错误26%,第二类错误24%。 相似文献
34.
【目的】研究BpTCP7启动子的表达模式,为深入分析BpTCP7基因功能提供一定参考。【方法】克隆了BpTCP7基因上游1 791 bp启动子序列,通过PLACE和Plant CARE网址对顺式作用元件进行分析,然后转入拟南芥,并分析BpTCP7启动子的组织表达特性及盐、旱胁迫应答反应。【结果】BpTCP7启动子序列中含有与细胞周期、开花、叶片发育、激素及胁迫响应等相关的顺式作用元件。该启动子在拟南芥中的表达模式呈现为营养生长阶段和生殖生长阶段均有表达,且在叶片中表达明显,与此同时,BpTCP7启动子在幼嫩、成熟叶片的边缘均有表达。与对照相比,NaCl、PEG胁迫诱导处理后BpTCP7基因表达量有升高的现象。【结论】BpTCP7基因参与白桦的叶片发育、激素应答、胁迫响应(盐、干旱)等生物学过程,对营养、生殖生长阶段各组织器官的发育也有一定的调控作用。 相似文献
35.
甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(GAP)作为常见的持家基因在微生物中普遍表达,因而其启动子(PGAP)被认为是一个强的组成型启动子;首先,预测并克隆了双叉双歧杆菌的GAP启动子,并利用葡萄糖醛酸苷酶基因为报告基因,分析了PGAP在大肠杆菌和双歧杆菌中驱动表达的强度;不同碳源的发酵实验表明:PGAP在葡萄糖培养基中强度最高,而3种底物类似物对PGAP强度的影响各不相同;对PGAP预测的-10区进行了系列点突变,具有更接近sigma 70启动子共有序列的突变体p MGAP3表现出更高的驱动强度;最后,通过对代表性双歧杆菌PGAP序列的比对,表明在一些核心区域,如可能的TATA盒、转录起始位点、核糖体结合位点高度保守。 相似文献
36.
酵母snoRNA基因簇启动子的比较分析 总被引:1,自引:1,他引:0
报道对酿酒酵母snoRNA基因簇启动子序列的研究结果.通过计算机分析,发现酿酒酵母中Z2Z8和SnR190U14snoRNA基因簇有相似的启动子结构.这两个snoRNA基因簇都是由一个上游的启动子负责整个基因簇的转录,产生多个顺反子snoRNA的前体,然后再加工成熟为各个独立的snoRNA.在启动子保守序列TATAbox的上游还发现2个RAP1序列,表明snoRNA基因簇的表达可以通过RAP1元素与核糖体蛋白基因的表达协同调控.这是在snoRNA基因的启动子中首次发现RAP1调控元素.对snoRNA基因簇的进化特点也进行了讨论. 相似文献
37.
鸡痘病毒载体强启动子的构建和筛选 总被引:10,自引:0,他引:10
根据痘苗病毒天然启动子P7.5关键区的结构,人工合成4条寡核苷酸,形成早,晚期启动子,把合成的启动子进行不同组合,得到10个较有代表性的不同启动子组合PS1~10,用P7.5作对照构建成表达LacZ基因的表达载体pFBS1~10以及pFBS7.5。利用脂质体介导转染鸡痘病毒中国疫苗株282E4,获取重组病毒,经纯化后,分别测重组欠代CEF后10,24,36,48,72h,表达β-半乳糖苷酶的活性, 相似文献
38.
以大肠杆菌启动子探测质粒pKK232-8为载体经三亲本杂交用4组限制性内切酶分别消化古生菌盐生盐杆菌R1的染色体DNA,在体外进行重组,转化E.coliDH-5α感受态细胞,得到12个转化子(T1 ̄和2),其抗性水平分布在10 ̄500mg/L的区间内,将这些转化子所含质粒分别命名为PSX1 ̄PSX12,限制性酶切分析表明,这些质粒各插入了一段不同的外源DNA片段,杂交分析表明,抗性最强的转化子T1 相似文献
39.
利用启动子探钍型载体pSUPV4 直接在大肠杆菌细胞中克隆到多个来自白腐丝状真菌-黄孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium )的基因启动子片段.这些基因启动子片段能在大肠杆菌细胞中启动重组卡那霉素抗性基因(rkanr)的表达,不同片段赋予宿主细胞以不同的卡那霉素抗性水平,最高的可达1000μg/m L,最低的则为50μg/m L.琼脂糖凝胶电泳显示这些重组质粒DNA 中均有不同大小的插入片段,其范围是0.5~6.0kb.选取一个插入3.9kb 的重组质粒pPC33 所作的Southern 杂交结果表明,插入片段以单拷贝形式存在于P.chrysosporium 的基因组中.当此片段5′-端被除去1.8kb 后,余下的2.1kb 片段可使融合的Kanr 基因的表达效率提高60% . 相似文献
40.
选取3种总蛋白含量差异较大的水稻为材料,在分析其谷蛋白含量的基础上,克隆它们的Gt1启动子,并采用vector NTI软件对这3个Gt1启动子序列进行比较.结果显示,在不同总蛋白和谷蛋白含量的水稻品种中,Gt1谷蛋白基因启动子是有差异的. 相似文献