A型口蹄病毒VP1免疫活性肽基因串联片段的化学合成及克隆…

Ａ型口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）ＶＰＩ蛋白的１４１－１６０位和２００－２１３位氨基酸序列是决定ＦＭＤＶ免疫原性的抗原决定簇片断，人工合成一个免疫活性肽基因的串连片段（２０ＡＡ－１４ＡＡ－２０ＡＡ），全部选用２大肠杆菌偏爱密码子，在５端带有有ＥｃｏＲ１位点和一个起始密码子ＡＴＧ，在３端带有ＢａｍＨＩ位点和一个终止密码子ＴＧＡ，利用这两个酶切位点把该基因连接到ＰＷＲ５９０质粒上，并筛选高表达的菌株，结果表明     

浅谈新时期动物的预防免疫

在新时期，高致病性禽流感在全球蔓延，猪链球菌病在我国个别省份发生并引起人的发病死亡；口蹄疫在我国许多地方出现并变异出新的种型。所有这些，都严重危害着我国养殖业的健康发展和人民群众的生命安全，给国家和人民带来巨大损害。因此，努力做好新时期的动物防疫工作尤为重要。下面本人结合自己的亲身经历，就新时期动物的预防免疫，谈谈个人的看法。     

LPB—ELISA对新生牛血清中口蹄疫抗体的检测

口蹄疫是由于口蹄疫病毒(FMDV)感染引起的一种急性、热性、高度接触性和可快速远距离传播的动物疫病,被国际畜疫局(OIE)列为A类传染病之首.为了掌握新生牛血清中口蹄疫抗体的情况,从而为口蹄疫疫苗企业提供不含该抗体的优质新生牛血清.本试验采用液相阻断酶联免疫(LPB-ELISA)方法对20个批号新生牛血清样品中口蹄疫O型和亚洲I型抗体进行了检测,其中O型病毒抗原对照平均D492nm值50%值(临界值)为0.432;亚洲I型病毒抗原对照平均D492nm值50%(临界值)为0.897;20个新生牛血清样品亚洲I型和O型的D492nm值均大于临界值,表明各样品均显阴性,来自没有感染口蹄疫病毒或没有接种疫苗的动物.     

猪口蹄病毒VP1活性肽融合蛋白的纯化

在猪口蹄疫病毒活性肽ＶＰ１融合蛋白基因工程菌Ｅ．ｃｏｌｉＣ５００构建成功的基础上，确定了融合蛋白的分子质量约为７１．０ｋｕ。     

病毒：杀手还是救星 为何病毒的材料与生物细胞的相同，却被排斥为“异类”

最近，新型流感病毒、诺瓦克病毒、口蹄疫病毒等等病毒大肆蔓延，媒体报道层出不穷。同时我们惊喜地发现，临床上利用病毒进行治疗的方法研究也在火热开展。病毒就是这样，与细胞生物亦敌亦友。     

猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)免疫攻毒保护试验

口蹄疫是一种由口蹄疫病毒感染引起的偶蹄动物,如牛、羊、猪、骆驼、鹿等共患的急性、热性、高度接触性和可以借助空气传播的传染病。口蹄疫疫苗是防治口蹄疫的发生、流行最主要的武器之一。猪O型口蹄疫灭活疫苗系用猪源强毒接种BHK-21或IBRS-2细胞单层,收获细胞毒液,经二乙烯亚胺(BEI)灭活,与油佐剂混合乳化制成。本研究选用3批猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)进行免疫攻毒保护试验,即疫苗免疫效力检验。实验结果表明,用O/MYA98/BY/2010株攻毒,3批疫苗每头份疫苗分别含有10.32、10.81、11.84 PD50,3批疫苗1头份免疫动物LPB-E抗体效价≥1︰64的均在80.0%以上。可以看出,猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)对我国目前流行的猪O型口蹄疫MYA98流行毒株具有良好的免疫保护效果。     

矢车菊甙-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系及其在酶联免疫传感分析中的应用

以一种天然色素矢车菊素-3-葡萄糖苷（Cyanidin-3-glucose,CAG）为辣根过氧化物酶（HRP）底物建立了矢车菊甙-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系.CAG在540nm处有一个吸收峰（AP1）,在HRP催化下被H2O2氧化,AP1降低;同时,其氧化产物在482nm处产生一个新吸收峰（AP2）,并且反应体系中两峰值的比值R（AP2/AP1）与HRP量在一定浓度范围内呈线性相关.根据此原理,以猪口蹄疫病毒蛋白（food and mouth disease virus antigen,FMDVAg）为分析模型,建立了检测猪口蹄疫病毒的酶联免疫传感分析新方法.该方法利用伴刀豆蛋白（Conconvalina,ConA）对糖蛋白的识别特性固定HRP-猪口蹄疫病毒抗体连接物（HRP-FMDVAb）,由ConA介导和磁性分离实现了免疫反应特异性组分和非特异成分,以及反应免疫磁性珠与没反应免疫磁性珠的分离.运用制备的传感体系测定猪口蹄疫病毒的线性范围为1.5×10^-8～2.7×10^-6g/mL,抗原检出限为3.1×10^-9g/mL,相对标准偏差为3.7%（n=11）.底物CAG及其产物的水溶性好,对人体无毒副作用,在临床上可代替传统HRP底物进行免疫检测.     

口蹄疫病毒抗原表位的编码序列在大肠杆菌中表达

为在大肠杆菌和牛分枝杆菌 BCG中表达口蹄疫病毒 ( Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV) O、A、C三种血清型抗原表位的编码序列 ,我们优化筛选了这三种血清型主要抗原表位的序列 ,设计合成了其编码 DNA序列 ,并将此序列克隆到细菌表达载体 p QE4 1中 ,转化大肠杆菌 M1 5 [p REP4 ],经 IPTG诱导 ,在 SDS-PAGE中得到 34 k D的小鼠二氢叶酸还原酶( DHFR)基因与 FMDV的三型抗原表位编码序列的融合表达的蛋白质带 .     

绿色保健食品特种野猪肉

随着人们生活水平的不断提高，自然保健意识不断增强，传统的消费观念已发生了质的变化。特别是近年来震惊世界的二恶英、疯牛病、口蹄疫和瘦肉精中毒事件，引起了全球消费者的恐慌与不安，食品安全，绿色消费成为热门话题和焦点．