O型口蹄疫病毒VP1基因重组山羊痘病毒活载体疫苗的研究

旨在构建能够表达O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因的重组山羊痘病毒(GPV),并以此为活载体疫苗,评估其免疫效力.将FMDV的VP1基因插入转移质粒pTKfpgigp中,构建重组转移质粒pTKfpgigp-VP1,并转染已感染GPV的羔羊睾丸(LT)细胞,产生重组GPV(rGPV),筛选纯化rGPV,检测rGPV在LT细胞中VP1基因的表达情况.将获得的rGPV皮内接种山羊,检测抗山羊痘(GP)和口蹄疫(FMD)特异性抗体水平.结果表明,获得含有FMDV的VP1基因重组毒株rGPV/FMDVVP1,在LT细胞中VP1基因进行正常转录,其表达产物能与FMDV抗血清产生特异性反应.rGPV能诱导产生不同水平的抗GP和FMD的特异性抗体.可为FMD重组标记疫苗的研制提供参考.     

猪O型口蹄疫母源抗体消长规律的测定和免疫效果观察试验

本试验测定了6窝母猪免疫后产小猪0、1、7、14、21、28、35、42日龄O型口蹄疫母源抗体消长情况和首免、二免免疫抗体测定。结果表明:未吃初乳的0日龄仔猪均无母源抗体,1日龄仔猪母源抗体滴度达到高峰,以后逐渐降低;口蹄疫母源抗体对1～14日龄的仔猪有保护,部分仔猪在21日龄还有保护。28～35日龄首免后21日其免疫抗体合格率低于70%,28日后达到峰值86.7%,一个月后再免一次,则有效免疫抗体水平可维持较长时间,以后逐渐降低,至5个月后已不能保护,种猪此时须再次免疫接种猪口蹄疫疫苗。     

多个发夹RNA的混合使用抑制O型和AsiaⅠ型口蹄疫病毒的复制

通过对国内流行的口蹄疫病毒(FMDV)毒株的序列分析,锁定RNA干扰的3个目标基因即3D,VP4和2B, 分别编码聚合酶POL,病毒结构蛋白VP4和非结构蛋白2B,这3个靶基因序列在不同流行毒株之间相对保守.分别设计合成靶向这些基因序列的发夹RNA(short-hairpin RNA,shRNA)表达模板,构建了5个shRNA表达质粒p3D-NT56,p3D-NT19,pVP4-NT65,pVP4-NT19和p2B-NT25.进行单独应用或混合应用,于细胞水平和乳鼠水平检测其抗病毒活性.结果显示,3D-NT56/19,VP4-NT65/19和2B-NT25 shRNA对O型FMDV均有抑制作用,但是对AsiaⅠ型FMDV,仅2B-NT25 shRNA具有较显著的抑制作用.3个shRNA表达质粒的混合使用(p3D-NT56+pVP4-NT65+p2B-NT25,p3D-NT19+pVP4-NT19+p2B-NT25),不仅能够交叉抑制不同血清型FMDV的复制,而且这种抑制作用较单一shRNA延续更长的时间.     

中药方剂对家兔注射FMD疫苗部分生理指标影响试验

对家兔注射FMD疫苗前后,服用中草药制剂,观察其对部分生理指标影响。试验选取健康家兔16只,随机分为4组;A组:阴性对照组;B组:每只家兔肌注苗0.5mL,不口服中药制剂;C组:每兔注苗0.5mL,30min后口服中药剂量5mL;D组:每只家兔注苗0.5mL,注射前1h口服10mL中药制剂,观察不同时间段家兔血液部分生理指标的变化。实验结果表明:注射FMD疫苗能引起家兔的白细胞、红细胞、淋巴细胞、粒细胞数量显著增加;心率、血压下降。使用僵蚕、蚕蜕等中药,可抑制试验组家兔的白细胞、粒细胞、淋巴细胞数量;心率、血压有所上升。     

猪口蹄疫和水泡病的鉴别及防治措施

近几年在我国多个省、市都有发生猪口蹄疫病,但是你所不知道的是有些属猪水泡病,猪水疱性疹是由猪水疱疹病毒引起的一种急性热性并具有高度传染性的病毒性传染病。主要特征为猪的口、鼻、乳腺和蹄部形成水疱性病变,猪口蹄疫是国家规定的一类动物传染病,以秋末、冬春等寒冷季节多发。上面介绍猪口蹄疫病,现在再介绍一下猪水泡病。猪水泡病是由猪水泡病毒引起的一种接触传染性的病毒性疾病。其临床特征是在蹄、鼻、口腔粘膜和母猪的乳头周围皮肤出现水泡。病程10-15天,一般能自愈。病毒对外界不良因素的抵抗力很强,在污染的猪舍内可存活2个月以上。各种年龄、品种、性别的猪一年四季均可发生本病。在潮湿天气,特别是猪群密度大,卫生条件差,调运频繁等情况下易发病。发病率高达70%-80%,而病死率很低。本病的传播方式主要是直接接触,粪便、屠宰生猪的污水及未煮沸的泔水是主要传染源。典型的病初体温升高至40-42℃,在蹄冠、蹄叉、蹄踵出现水泡,水泡约有米粒至黄豆大小,数量不等,若有细菌感染,局部化脓,严重的可使蹄壳脱落,病猪趴卧。约有5%-10%病猪的鼻盘、口腔粘膜、齿龈有水泡和溃疡。部分母猪乳房有水泡出现。轻型的少数猪全身症状较轻、传播缓慢、隐性型的猪不表现任何临床症状,不易发现。猪水泡病与猪口蹄疫病极为相似,症状难于区别。为合理正确地对猪口蹄疫病和水泡病做出鉴别,我们应充分掌握两病的基本知识,便于对症下药、药到病除,更好地把动物疾病防控工作做到位。     

山东省奶牛A型口蹄疫免疫抗体检测与分析

应用ELISA方法对山东省内应用了口蹄疫A型灭活疫苗34个奶牛饲养户进行了免疫抗体跟踪监测与分析．结果：对18家养牛户进行了免疫抗体检测,各牛场平均抗体合格率为42．4％其中抗体合格率最高的奶牛场其合格率只有65％,低的只有12．5％,一免后所有18个奶牛场均未达到免疫合格标准;二免后16个奶牛场平均抗体合格率为69．4％,其中,抗体合格率至70％的有10个牛场,达到免疫合格标准二次免疫后有62．5％（10／16）的达到免疫合格标准．研究表明对于A型口蹄疫疫苗的免疫。首免后必须进行加强免疫．     

Immune response in cattle inoculated with the recombinant complete polyprotein of foot-and-mouth disease virus from Bombyx mori larvae

The intact open reading frame (ORF) of foot-and-mouth disease virus (FMDV) Asia I/XJ strain was am- plified by RT-PCR and inserted into the transfer vector pVL1393 to generate plasmid pVL-ORF. Bm-N cells were transfected with pVL-ORF and linearized Bm-BacPAK6 DNA, and the recombinant silkworm baculovirus Bm-ORF containing the full ORF of FMDV was obtained. The results of indirect im- munofluorescence assay (IFA) showed that Bm-ORF could be expressed efficiently in Bm-N cell. After inoculating the early 5th instar larvae of silkworm, the polyprotein of FMDV could be detected by sandwich ELISA and empty capsid-like particles could be observed under the electron microscope. Expression products from silkworm were used as the antigen to immunize the cattle. The specific an- tibody was induced in all vaccinated animals. The immunized cattle were challenged with the virulent FMDV Asia I/XJ strain, two of the four cattle were completely protected and clinical symptoms were alleviated and delayed in the others. The results suggest that this strategy might be used to develop the new subunit FMDV vaccine.     

含T细胞表位和B细胞表位的抗O型FMDV基因工程疫苗诱导豚 …

用ＦＭＤＶ疫苗免疫接种是预防口蹄疫的主要手段之一,研制既含Ｂ细胞表位又含Ｔ细胞表位的基因工程疫苗对口蹄疫的防治具有更强的保护能力,用化学方法合成Ｏ型口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）外壳蛋白ＶＰ１中２１～４０位肽段的Ｔ细胞表位基因,与１４１～１６０肽段的Ｂ细胞表位基因串联后,与β－半乳糖苷酶基因相边,构建成一重组质粒,并在大肠杆菌中表达出融合蛋白疫苗,动物实验表明,该疫苗不仅能诱导豚鼠产生滴度很高的中和抗体,     

口蹄疫抗原决定簇融合基因转化胡萝卜的研究

利用转基因植物生产疫苗是目前植物基因工程的一个研究热点，具有生产简单、成本较低、使用安全方便、易贮存等优点．本实验通过农杆菌介导的遗传转化．以O型和A型口蹄疫抗原决定簇基因O21-O14-A21转化胡萝卜．通过筛选．获得潮霉素抗性愈伤组织。经胚状体再生得到156棵抗性苗．通过GUS染色检测．GUS报告基因在部分转化的愈伤组织中瞬时表达．并在部分抗性苗中稳定表达．对部分抗性植株进行PCR和PCR—Southern杂交检测．证实目的基因已经成功整合到胡萝卜基因组中．     

利用EAN·UCC系统进行食品的跟踪与追溯

“民以食为天，食以安为先”，食品的卫生与安全问题是关系到人类生死存亡的大事。近年来，由于疯牛病、口蹄疫、禽流感、二恶英、苏丹红1号等重大食品安全事件的暴发，食品安全问题引起了全世界的广泛关注。欧盟管理法规No．178（2002）要求从2004年起，在欧盟范围内销售的所有食品都能够进行跟踪与追溯，否则就不允许上市销售，该法令实际上对食品制造业形成了新的技术壁垒。