幽门螺杆菌粘附素基因的原核表达

目的：构建幽门螺杆菌粘附素（hpaA）基因的原核表达载体，并诱导表达。方法：用PCR扩增hpaA目的基因片段，克隆至pQE-30表达载体中，构建含目的基因的表达质粒pQE-hpaA，转化E．coli DH5α，经IPTG诱导表达蛋白HpaA；Western blot分析其免疫反应性。结果：经测序hpaA基因片段由783bp组成，可编码260氨基酸残基的多肽。经SDS—PAGE分析相对分子量（Mr）约为30000。可溶性表达占全菌的42％以上。Western blot分析能与Hp全菌抗血清反应。结论：成功构建了粘附素hpaA基因的原核表达载体并能高效表达，为研制Hp疫苗提供理论依据。     

浅谈英语公共演讲课中的信心培养

针对如今公共演讲课上常以理论知识讲述为主导的教学方法,文章分析了自信因素在大学英语公共演讲课堂上的重要作用,以及教师该如何从听、说、读、写四个方面来帮助学生克服自身的心理障碍问题,让他们大胆自信的走上讲台,畅所欲言。     

我国改革受阻深层原因分析

在改革过程中,我国利益表达主体多元化导致利益表达要求的多样性,利益表达客体角色错位引起利益表达信息的失真,利益表达能力的差异性及利益表达渠道畅通的有限性,利益表达效果与成本的不成比例性等,这些就是目前我国错综复杂的利益表达局面。它对处于攻坚阶段我国的改革产生一定阻力,并在一定程度上延缓了改革的进程。     

走出英语学习的误区

东西方文化的差异，加之中国人缺乏适宜的英语学习环境，英语学习者常常会按汉语的思维模式、表达习惯、字面理解等陷入学习误区。在多年教学实践中，归类分析学习汉英语的典型范例，引导英语学习者尽快走出英语学习的误区，即：习惯用语错误理解，社会用语不当，汉语负迁移的干扰，词汇搭配混乱等，从而达到正确理解和运用英语的目的。     

大黄鱼生长激素基因的克隆与表达

采用RT-PCR方法从大黄鱼脑垂体总RNA中克隆编码生长激素基因序列,并与数据库中鱼类生长激素基因进行比较.扩增获得的生长激素基因定向克隆到表达质粒pET-22b(+),并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达.表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占细胞总蛋白的5%.     

苜蓿花叶病毒RNA23''''端cDNA转基因烟草的研究

将克隆的苜蓿花叶病毒中国分离株(AIMV—Ch)RNA23′端cDNA重组到植物表达载体pROKⅡ中，用三亲融合法导入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404，采用叶圆片法转化普通烟草，诱导再生小植株．经卡那霉素抗性筛选和PCR检测，证明AIMV RNA23′端基因已整合到转基因烟草的基因组DNA中．     

hsBLyS分泌型表达载体构建及CHO表达

本实验引物延伸合成人红细胞生成素信号肽序列；信号肽序列和人可溶性B淋巴细胞刺激因子(human soluble B Lymphocyte Stimulator，hsBLyS)基因重叠延伸拼接成融合基因；融合基因插入pcDNA3、pcDNA3．1、pEFneo质粒；信号肽引物设计时，突变同义密码，最终重组质粒成为分泌表达质粒；磷酸钙共沉淀将表达质粒和标志质粒pSV-dhfr，共转染CHO-dhfr^-细胞；选择培养液筛选，氨甲喋呤扩增表达，获稳定表达rhsBLyS细胞株；ELISA检测浓缩表达上清，结果表明：rhsBLyS表达量由0．13μg/mL上升至0．55μg/mL。     

按大肠杆菌高表达序列设计的入干扰素α—2b基因的化学合成和克隆

根据大肠杆菌高表达序列重新设计了人干扰素α—2b基因编码区的核苷酸序列，应用化学合成的方法合成了多个互补DNA片段，经互补片段分别退火和连接后，将完整编码区分两段分别克隆于pUC19质粒中，进行DNA序列分析，分别选取序列完全正确的两种克隆片段进行重组，获得了与设计序列完全一致的含有完整编码区的人干扰素α—2b基因。     

水杨酸对菜豆不同器官抗氰呼吸诱导与交替氧化酶表达的比较研究

作者研究了水杨酸(SA)处理对菜豆幼苗不同器官抗氰交替途径容量(Valt)、实际运行活性(ρValt)与AOX表达量的影响。结果表明：SA未处理的菜豆幼苗不同器官中均存在抗氰呼吸，其中真叶的Valt和ρValt最高，其次是子叶，而下胚轴的最低；SA处理24h以后，均可使菜豆幼苗3种器官Valt与ρValt显著提高，但不改变三者抗氰呼吸活性的大小顺序。显然，SA对菜豆抗氰呼吸只起到诱导作用，并不改变它们不同器官间的呼吸特异性。Western杂交分析结果显示：菜豆不同器官Vah与ρValt的差异与AOX蛋白水平的变化相关，真叶中AOX的表达量最多，下胚轴的AOX表达量最少；SA处理时，诱导菜豆幼苗不同器官抗氰呼吸增高的程度与AOX合成表达量的增加一致，二者紧密相关。