核酶的发现及其在基因治疗中的应用

核酶是具有催化功能的结构性RNA分子,且大多数核酶具有剪切RNAs的功能,可以利用它们剪切信使RNA(mRNAs)调节基因表达,从而作为基因治疗的新手段.阐述核酶的发现历程,以及其在艾滋病、肝炎、肿瘤和生殖道系统感染等基因治疗的研究进展.最后,分析核酶在基因治疗中的技术优势及存在问题,并对核酶领域包括更多核酶晶体结构的确立、酶切机理的理解、核酶新的生物学功能的发现等研究进行展望.     

基于单克隆抗体G250修饰的肿瘤细胞靶向基因载体研究

用宫颈癌细胞Hela表面高表达G250抗原的单克隆抗体G250修饰非病毒基因载体, 获得肿瘤靶向基因载体. 通过注射G250杂交瘤细胞于小鼠腹腔, 制备富含G250mAb的腹水, 用正辛酸-硫酸铵沉淀法和Protein A Agarose分离纯化, 获得高纯度的G250mAb. 通过二硫键将PEI与G250mAb偶联, 得到修饰的基因载体G250mAb-PEI, 研究其转基因靶向性. 结果表明, G250mAb-PEI对Hela细胞的基因转染具有显著的靶向性, 对Hela细胞的转基因效率是肝癌细胞HepG2(G250阴性)的2倍; 而对正常血管平滑肌细胞(SMC)的基因转染效率比Hela低近20倍, G250mAb修饰与否对SMC没有靶向性; 对3T3细胞的毒性显著低于未修饰的PEI, 表明G250mAb-PEI是一种高效、低毒和具有靶向性的基因载体.     

野蔷薇内源多胺的HPLC测定方法及其组织变化规律

以野蔷薇为材料，提取内源多胺，用高效液相色谱法HPLC进行腐胺、亚精胺、精胺含量测定.结果表明，多胺提取过程中，样品用量0.2 g、冰浴浸提液300μL、苯甲酰化反应37℃,提取效率最高.HPLC检测参数：流动相为V（甲醇）∶V（水）(60∶40),进样量15μL,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长254 nm,保留时间15 min时，3种内源多胺可完全分离并定量测定，相关系数均大于0.99,测定加标回收率为87.17%～103.64%,表明该方法可靠.在野蔷薇体细胞胚胎发生过程中，叶片培养3 h,内源多胺无明显变化，培养3 d后，多胺总量和腐胺含量显著增加，5 d后，亚精胺和精胺含量显著增加，亚精胺含量最高，精胺其次，腐胺含量极显著下降，同时多胺总量下降，说明在野蔷薇体细胞胚胎发生的启动阶段，腐胺向下游产物亚精胺和精胺发生了转化；在培养25 d的愈伤组织中，多胺总量显著下降，腐胺和精胺含量很低，说明在野蔷薇愈伤组织增殖阶段，可能精胺作用不大.该试验建立了内源多胺的2 mL提取体系，该方法降低了样品材料的用量，多胺提取过程更简便高效，并初步探索了野蔷薇...     

美国重组DNA咨询委员会的演变史

 重组DNA技术于1972年诞生于美国高校实验室。重组DNA咨询委员会（简称RAC）问世于1974年，并于2019年退出历史舞台，为美国基因操作技术的风险规制立下了汗马功劳。RAC在美国基因操作技术风险规制中跌宕起伏的演变史，是美国基因操作技术的风险规制由稚嫩逐步走向成熟的印证。通过探究RAC及其监管权是在哪些力量的作用下问世，还原RAC在基因操作技术风险阴霾笼罩下被政府当局质疑能力的历史图景，呈现美国基因治疗的基本规制路径，描述RAC审批首次基因治疗的经过以及RAC在首次基因治疗致死事件中的应对表现，阐述RAC退出历史舞台的过程和缘由，从而描摹一幅美国重组DNA咨询委员会演变历程的脉络图。     

热带假丝酵母二型性菌体细胞的形态和结构差异

用光学显微镜和电子显微镜研究热带假丝酵母（Candida tropicalis)的二塑性，菌丝体（M）和单细胞酵母（Y）形态差异很大，M是长管状多,细胞 相连，Y则是球形的单个细胞，内部结构上也体现了与其形态的相适应性，M菌丝顶端大的液泡为菌丝的延伸提供压力，但当顶端生长芽管时，大液泡会分裂成小液泡，部分小液泡进入芽管；菌丝顶端和侧面的泡囊，与其顶端生长和侧枝发生有关，单细胞酵母中，靠近母细胞和子细胞相连的部位，有些囊泡和颗粒物质，可能与细胞的新壁形成和分开有关。