不同苜蓿栽培品种再生体系的差异性比较

通过对10种不同苜蓿的栽培品种再生体系的比较研究,以及再生条件的优化,筛选出易于再生的费纳尔,金皇后,赛特6号3个苜蓿栽培品种．结果表明：胚性愈伤组织诱导培养基：改良Ms＋2,4-D2mg／L＋6-BA0．5mg／L＋蔗糖3％,胚性愈伤组织诱导率为65％～92％;胚状体诱导培养基：SH＋2,4-D2mg／L＋6-BA0．5mg／L＋LH300mg／L＋蔗糖3％;胚状体诱导率为42．3％～83．4％;胚状体再分化培养基：SH＋GA30．5mg／L＋LH300mg／L＋肌醇60mg／L蔗糖3％;胚状体萌发率为20％～75％;生根培养基：1／2Ms＋NAA0．3～0.5mg／L＋蔗糖2％,生根率为91％,移栽成活率93％．     

迎春花无菌体系的建立以及茎段和叶片愈伤组织的诱导

本文对迎春花无菌体系的建立和茎段、叶片愈伤组织的诱导进行了研究。结果表明：（1）在建立迎春花的无菌体系时,应该选择晴天去采集外植体为好;（2）带芽茎段和叶片的污染率最大,而不带芽茎段的污染率最小;（3）在超净工作台外消毒应先用饱和洗衣粉溶液浸泡10 min,然后用自来水冲洗2-3次,最后再用蒸馏水冲洗2-3次;在进行超净工作台内消毒时,叶片应该先用84消毒液（1%）浸泡5min,无菌水冲洗3次,75%酒精浸泡20s,无菌水冲洗3次,0.1%升汞浸泡8 min,无菌水冲洗3次,而茎段应该先用84消毒液（1%）浸泡10 min,无菌水冲洗3次,75%酒精浸泡30s,无菌水冲洗3次,0.1%升汞浸泡10min,无菌水冲洗3次;（4）在NAA为0.2 mg/L时,高浓度的6-BA有利于不定根的再生,而低浓度的6-BA则更利于愈伤组织的诱导;在NAA为0.2 mg/L时,高浓度的KT有利于愈伤组织的诱导,而低浓度的KT则有利于不定根的再生;（5）NAA更利于不定根诱导,也可诱导愈伤组织。而2,4-D只利于愈伤组织的诱导,不利于诱导不定根。     

中华芦荟成熟叶组织培养的研究

以中华芦荟成熟叶为外植体,接种于9组不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)浓度配比的脱分化培养基中,诱导外植体的脱分化形成愈伤组织。研究表明,中华芦荟叶愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+1.0g/L活性炭;诱导不定芽的适宜培养基为MS+1mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.7g/L活性炭;及诱导生根的适宜培养基为1/2MS+0.2mg/Lα-萘乙酸(NAA)+20g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.5g/L活性炭,生根率达100%.     

银杏叶片愈伤组织培养及光暗条件对黄酮含量的影响

以银杏嫩叶为外植体,在添加不同种类和浓度激素的MS培养基上进行愈伤组织诱导研究,同时分析光暗条件对愈伤组织生长和黄酮含量的影响。愈伤组织生长后,用分光光度比色法分析测定银杏愈伤组织黄酮含量。实验结果:在光照条件下,添加激素6-BA1.0mg/L和NAA2.0 mg/L的MS培养基中,诱导形成的愈伤组织生长最好,黄酮含量较高。     

彩云阁快繁技术的研究

通过愈伤组织诱导途径进行快繁,由茎段诱导愈伤组织阶段和愈伤组织诱导芽阶段的最佳PGR种类和浓度配比分别为2mg/L6-BA+0.5mg/L2,4-D+0.1mg/L NAA、3.0mg/L6-BA+0.1mg/L NAA;通过促进腋芽生枝途径进行快繁,茎节诱导芽阶段最佳PGR种类和浓度配比为1.5mg/L6-BA+0.3mg/L NAA;由芽诱导生根阶段最佳PGR种类和浓度配比为0.1mg/L NAA.     

人参SQS基因的干扰载体构建及转化人参愈伤组织

以5年生人参为材料, 根据人参SQS基因设计正义及反义片段引物, 构建了SQS基因干扰表达载体; 利用农杆菌转化法转化人参愈伤组织, 对获得的抗性愈伤组织进行PCR检测及实时定量PCR检测, 并对抗性愈伤组织的皂苷进行HPLC分析. 实验结果表明, 与非转化人参愈伤组织相比, 转化后的愈伤组织SQS基因表达量降低, 皂苷含量有所变化. SQS是人参皂苷生物合成途径的关键酶, 抑制SQS基因的表达, 可调控人参皂苷含量变化.     

外源激素对牡丹胚性愈伤组织诱导的影响

为了探讨外源激素的添加对牡丹胚性愈伤组织诱导过程中生理生化特性的影响.以牡丹品种‘凤丹白’叶柄诱导的愈伤组织为材料,研究不同浓度NAA和TDZ对胚性愈伤组织诱导过程中POD(过氧化物酶)、SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)和可溶性蛋白的影响.结果表明,抗氧化酶类活性和蛋白质含量与胚性细胞早期发育发生密切相关,在胚性愈伤组织形成时期,POD和CAT活性变化趋势基本一致,而SOD活性变化则相反;SOD活性经过短暂下降后回升,于第15天达到第二个峰值后稳步下降,表明SOD在胚性愈伤组织诱导初期起主导作用;POD与CAT活性出现峰值时间较SOD滞后,推测POD和CAT活性的升高能够促进胚性愈伤组织的形成和早期发育;可溶性蛋白含量于胚性细胞形成前一直保持较高水平,在第15天达到峰值后下降,说明其含量的升高有利于胚性细胞的形成和发育,其累积对形成胚性愈伤组织有促进作用.添加NAA 0.2 mg/L和TDZ 0.5 mg/L对牡丹胚性愈伤组织的诱导效果最好.     

农杆菌介导的八氢番茄红素合酶基因转入人参愈伤组织影响因素

以PSY为目的基因,应用根癌农杆菌介导法对人参愈伤组织进行遗传转化,从菌液浓度、侵染胞龄、侵染时间、共培养时间四方面优化了遗传转化体系。经PCR分析鉴定初步证明,外源基因PSY已整合到人参的基因组中。     

秋水仙素诱导水稻幼穗愈伤组织创制同源四倍体种质的研究

以普通二倍体水稻亲本为材料,用秋水仙素进行水稻的多倍体化诱导,创制同源四倍体水稻三系亲本材料并对其进行鉴定. 结果表明在MS+2,4 D 1.0 mg/L+ KT0.2 mg/L+ IAA0.2 mg/L 和500 mg/L的秋水仙素处理下,水稻愈伤组织染色体加倍效果最好,平均加倍频率可达25.26%.其中,材料CDR22和IR26诱导较易成功,加倍频率分别达到75%和26.5%;相对材料94109 1.3%加倍频率和冈46B 10.8%加倍频率,诱导率差异极显著. 对水稻四倍体材料进行形态学鉴定结果表明     

Evidence of vacuolar compartmentalization of arsenic in the hyperaccumulator Pteris vittata

Pteris vittata can hyperaccumulate arsenic （As） to 〉1% of its dry weight without showing any signs of toxicity, indicating the existence of effective plant-internal detoxificaUon mechanisms. Although vacuolar compartmentalization is known to play an important role in heavy metal detoxification and tolerance, direct evidence of arsenic compartmentalization in this hyperaccumulator was lacking. Here we report the subcellular localization of As in the callus of P. vittata. The callus induced from gametophytes of P. vittata exposed to 0.2 mmol/L arsenate for 20 days were examined by directly isolating cell walls, protoplasts and vacuoles, and determining arsenic concentrations. Of the total As in the callus, about 94% was in the protoplast, and of that, 91% was present in the vacuoles, indicating that vacuoles are a major storage site for As in P. vittata. In addition, the changes in the chemical components of vacuoles were analyzed by Fourier transform infrared spectroscopy （FTIR）.