全文获取类型
收费全文 | 2417篇 |
免费 | 55篇 |
国内免费 | 148篇 |
专业分类
化学 | 174篇 |
力学 | 11篇 |
综合类 | 36篇 |
数学 | 62篇 |
物理学 | 67篇 |
综合类 | 2270篇 |
出版年
2024年 | 3篇 |
2023年 | 20篇 |
2022年 | 25篇 |
2021年 | 19篇 |
2020年 | 24篇 |
2019年 | 28篇 |
2018年 | 8篇 |
2017年 | 35篇 |
2016年 | 24篇 |
2015年 | 52篇 |
2014年 | 92篇 |
2013年 | 84篇 |
2012年 | 107篇 |
2011年 | 130篇 |
2010年 | 125篇 |
2009年 | 155篇 |
2008年 | 159篇 |
2007年 | 187篇 |
2006年 | 165篇 |
2005年 | 166篇 |
2004年 | 174篇 |
2003年 | 192篇 |
2002年 | 149篇 |
2001年 | 123篇 |
2000年 | 97篇 |
1999年 | 56篇 |
1998年 | 51篇 |
1997年 | 29篇 |
1996年 | 33篇 |
1995年 | 31篇 |
1994年 | 23篇 |
1993年 | 20篇 |
1992年 | 6篇 |
1991年 | 10篇 |
1990年 | 7篇 |
1989年 | 7篇 |
1988年 | 3篇 |
1987年 | 1篇 |
排序方式: 共有2620条查询结果,搜索用时 78 毫秒
51.
中华哲水蚤线粒体DNA COI基因序列分析 总被引:7,自引:7,他引:7
采用苯酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)提取、异丙醇沉淀、酒精洗涤、TE缓冲液保存方法提取了采自胶州湾青岛海域的中华哲水蚤基因组DNA;以相应引物经PCR扩增得到线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ亚基基因(mtCOD)片段;PCR产物采用化学法进行质粒重组(载体pGEM—T Easy Vector)、热休克转化重组质粒至大肠杆菌感受态细胞(JM109)、氨苄LB培养基扩大培养;测序.结果表明。中华哲水蚤线粒体COI碱基大小为710bp(国际基因库索引号AY665663)。其碱基组成A、C、G、T含量分别为24.23%、19.15%、22.54%和34.08%;G C含量为41.69%。A T为58.31%. 相似文献
52.
<正> 随着市场经济的不断深入,国有企业的体制转换进入攻坚阶段,竞争更加激烈,现有国有企业一些深层次矛盾和问题逐步暴露出来。国有企业现有产权制度已不能适应市场化的发展和竞争要求。国有企业必须要进一步深化改革,建立产权清晰、权责明确、政企分开、管理科学的现代企业制度,健全企业法人治理结构,努力成为市场竞争的主体,通过产权制度改革来解决企 相似文献
53.
人粒细胞集落刺激因子 ( h G-CSF)有促进粒系造血干细胞增殖分化及增强成熟细胞功能的作用 ,广泛应用于医疗上癌症化疗、骨髓发育不良、再生障碍性贫血和先天性、特发性等嗜中性白细胞缺乏症的治疗。目前 ,h G-CSF主要来源工程菌发酵产生 ,浓缩于菌体包涵体之中 ,包涵体之中的 h G-CSF是没有生物活性的 ,必须经过溶解、分离、纯化和复性才有活性 ,有关 h G-CSF纯化和复性的研究实验如下 :一、材料与方法1 .包涵体来源 :上海三维公司赠送 ,由工程菌经发酵、收集菌体、破菌、离心和沉淀获得。2 .包涵体的洗涤 :主要是洗去包涵体表面的… 相似文献
54.
信息素在八肋游仆虫接合生殖过程中起着重要的诱导配对作用,为了进一步研究其诱导机制,根据已知的基因序列,应用PCR技术,扩增信息素G3基因,并将该基因插入表达载体pGEX-6P1中,构建了重组表达质粒pGEX-6P1-G3.重组菌在37℃下,经1.0mmol/L IPTG诱导,12%SDS-PAGE分析,在37kDa处出现明显的特异目的带。 相似文献
55.
陈亚莉 《黔西南民族师范高等专科学校学报》2003,(1):42-45
学校或其他教育机构在办学中存在着营利的可能性与合理性,它们在办学过程中,可以将盈余和利润作为教育滚动发展的手段,但决不能以营利为目的。正确对待教育营利与非营利的关系,有利于优化教育资源,促进教育事业的可持续发展。 相似文献
56.
57.
重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的培养条件研究 总被引:1,自引:0,他引:1
对重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的发酵条件进行了优化,并在BiofloⅢ发酵罐中实现了高密度培养和高效表达。结果表明;温度30C,培养基pH6.0,当酵母密度达到200A600mm以上时,加入无水甲醇,控制甲醇的流加体积,使其终体积分数为1.0%~3.O%,继续诱导培养72h左右,酵母菌密度可达到150g/L,重组肠激酶总活性可达58kIU/L发酵液。 相似文献
58.
59.
60.
为研究重组人截短型白细胞介素6(rhIL-6)工程菌高效表达的影响因素及纯化方法的优化.观察不同培养温度对重组人截短型IL-6工程菌生长密度和IL-6表达的影响;复性蛋白终浓度对复性效率的影响;细菌诱导培养后,经破菌-洗包-溶包初步纯化后,再经柱层析纯化IL-6.其结果为30℃培养后42℃诱导培养5h的IL-6表达效率最高,达32.8%;复性蛋白终浓度在0.5 g/L以下时,蛋白复性效率最佳,比活性为4.42×108 μmol/min*mg-1;进一步柱层析后,IL-6的纯度达96.5%,得率可达46.5%.最后得出培养和纯化工艺简便易行,可获得高纯度、高比活性的截短型rhIL-6的结论. 相似文献