门诊血液透析患者丙型肝炎病毒抗体假阳性情况调查与分析

目的:调查门诊血液透析患者丙型肝炎病毒抗体假阳性的发生率和发生原因,以便正确处理抗体检测报告和医患沟通困扰。方法:对中国人民解放军南部战区总医院2019年12月至2022年12月279名门诊血液透析患者的丙型肝炎病毒抗体和丙型肝炎病毒RNA检测结果进行整群抽样、横断面调查和回顾性研究。结果:调查发现共有81人丙型肝炎病毒抗体假阳性,占29.03%;其中S/CO值介于1.0～5.0的占98.77%,介于5.0～10.0的占比为1.23%。全部病例经HCV-RNA复核3次,均为阴性。检验科与输血医学科采取不同的检测方法与报告程序,结果有显著性差异(P<0.01)。结论:丙型肝炎病毒抗体S/CO值处于灰区范围时多为假阳性,且与抗体检测策略和报告程序有关。     

2株甲型肝炎病毒蛋白酶2A核苷酸序列的测定与比较

从甲型肝炎病毒２个不同株感染的ＫＭＢ１７细胞中提取总ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ特异性扩增出此２毒株病毒蛋白２Ａ基因,将２个２Ａ基因克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体上,经ＤＮＡ序列测定,得到２个２Ａ基因的核心苷酸序列,序列比较发现它们及与ＨＡＶ野毒株相对应序列有突变存在,Ｈ２株与ＨＭ１７５相比有一个点突变,同源性为９９．７２％;与ＨＭ１７５比较,Ｈ２株和Ｌ８株第３１９７位核苷酸均由Ａ突变为Ｇ,相应的氨基酸由丝氨酸     

乙型肝炎病毒母婴传播问题探讨

探讨乙型肝炎病毒宫内感染及乳汁感染的母婴传播问题,用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对７５例ＨＢｓＡｇ阳性产妇初乳及其新生儿外周血进行ＨＢＶ ＤＮＡ的检测;同时应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定产妇初乳中乙肝病毒５项标志物（ＨＢＶＭ）。结果为１）１７５例初乳中ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率为６８％,高于同组新生儿外周血ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率３４．６７％,有显性差（Ｐ〈０．０１）;ＨＢＶＭ三项阳性各组二埂有显性差异（Ｐ〈０．０５）．２）ＨＢｅＡｇ阳性初乳及新生儿外周血ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率均量高,与ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ比较,有显性差异（Ｐ〈０．０１,Ｐ〈０．０５）。表明初乳排毒率高于内传染率,母婴传播率与母血中ＨＢＶＭ传染性呈正相关。     

目视化乙肝病毒基因芯片

优化了基于纳米金标记探针的目视化检测方法,将其用于检测从阳性血清中提取的乙肝病毒(HBV)基因,并与基于荧光素异硫氰酸酯(FITC)标记探针的荧光检测方法进行了比较.结果表明,目视化乙肝病毒基因芯片诊断方法操作简单,成本低廉.此类基因芯片在病毒基因检测领域将会有广泛用途.     

HCV非结构基因NS5分子生物学研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)非结构基因5(NSS)区是RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)及一种磷蛋白的编码区,与HCV的复制、致病及抗药性关系密切。就HCV NS5区有关的分子生物学研究进展进行了综述。     

聚乙二醇沉淀富集和预扩增反转录实时定量聚合酶链式反应高灵敏检测小浆果中低浓度甲型肝炎病毒

基于聚乙二醇沉淀富集和改进的预扩增反转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR),建立了高灵敏检测小浆果中低剂量感染甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus, HAV)的方法。优化了聚乙二醇沉淀富集草莓中HAV的处理时间,探索设置预扩增步骤以加速样本核酸裂解和富集模板,建立了一种高灵敏的预扩增RT-qPCR检测新方法。回收率为15.51%, HAV减毒疫苗检测灵敏度可低至滴度4.49 CCID₅₀/mL,检测HAV质粒的灵敏度低至3.5 copies/μL。与ISO/TS15216-2:2019标准方法相比,本方法具有更高的检测效率,适于对小浆果中微量污染HAV的检测。对78批市售小浆果样品中HAV的阳性检出率为5.13%,高于采用ISO/TS 15216-2:2019标准方法的检出率(1.28%)。本方法对低剂量HAV病毒污染小浆果的检测具有很好的适用性和推广应用前景。     

4253例乙型肝炎病毒血清标志物定性结果模式分析

为适应乙肝两对半模式的变化,更准确地进行乙肝诊断,对4 253例乙型肝炎病毒血清标志物(HBVM)的结果模式特征进行了分析。采用ELISA法检测乙型肝炎病毒血清标志物(1-HBsAg、2-抗HBs、3-HBeAg、4-抗HBe、5-抗HBc)。结果表明,ELISA检测HBVM共得到18种模式,其中"全部阴性"占18.3%;"1、4、5阳性"比例最高占23.5%;"1、3、5阳性"占18.1%;"2阳性"占15.1%;"1、5阳性"占12.1%;"2、4、5阳性"占4.3%;"4、5阳性"占2.1%;"2、5阳性"占2.6%;"5阳性"占2.1%;其它特殊模式所占比例相对较低。     

Enhancing cellular immune response to HBV M DNA vaccine in mice by codelivery of interleukin-18 recombinant

OBJECTIVE: To investigate the effect of interleukin-18 (IL-18) on immune response induced by plasmid encoding hepatitis B virus middle protein antigen and to explore new strategies for prophylactic and therapeutic HBV DNA vaccines. METHODS: BALB/c mice were immunized with pCMV-M alone or co-immunized with pcDNA3-18 and pCMV-M and then their sera were collected for analysing anti-HBsAg antibody by ELISA; splenocytes were isolated for detecting specific CTL response and cytokine assay in vitro. RESULTS: The anti-HBs antibody level of mice co-immunized with pcDNA3-18 and pCMV-M was slightly higher than that of mice immunized with pCMV-M alone, but there was not significantly different (P>0.05). Compared with mice injected with pCMV-M, the specific CTL cytotoxity activity of mice immunized with pcDNA3-18 and pCMV-M was significantly enhanced (P<0.05) and the level of IFN-Gamma in supernatant of splenocytes cul-tured with HBsAg in vitro was significantly elevated (P<0.05) while the level of IL-4 had no significant difference (P>0.05). CONCLUSION: The plasmid encoding IL-18 together with HBV M gene DNA vaccines may enhance specific TH1 cells and CTL cellular immune response induced in mice, so that IL-18 is a promising immune adjuvant.     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中HBV YMDD变异株的检测

目的观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中,乙型肝炎病毒(HBV)发生 YMDD变异的情况;研究HBV YMDD变异的发生率同拉米夫定用药时间及用药前与血清HBV DNA水平的关系;观察拉米夫定治疗过程中,血清HBV DNA水平的变化.方法 80例慢性乙型肝炎病人被分为2组,1组为拉米夫定治疗组50例,另1组为对照组30例.采用实时PCR技术,并结合荧光探针技术,分别检测拉米夫定治疗组和对照组在用药期间的HBV YMDD变异发生率;采用荧光定量PCR技术检测治疗组在用药前及用药期间血清HBV DNA水平.结果治疗组在用药52周时的HBV YMDD变异发生率为24.0%,明显高于对照组用药52周的变异率3.3%(P<0.05); 治疗组在用药52周的HBV YMDD变异率为24.0%,明显高于用药26周时的变异率4.0%(P<0.05);治疗前HBV DNA水平较高组用药52周时的变异率为35.7%,明显高于HBV DNA水平较低组的变异率9.1%(P<0.05);治疗组中未变异组在用药52周时的HBV DNA阴转率为65.8%,明显高于变异组的HBV DNA阴转率16.7%(P<0.05).结论拉米夫定可导致HBV YMDD变异的产生,并且该变异的发生率随着拉米夫定用药时间延长而增加;治疗前血清HBV DNA水平较高者在应用拉米夫定后易发生YMDD变异;HBV YMDD变异发生后,可出现HBV DNA复升,但一般不会超过治疗前的基线水平.