海洋低温溶菌酶对人脐静脉内皮细胞超微结构的影响

目的:观察海洋低温溶菌酶对体外培养的人脐静脉内皮细胞超微结构的影响,探讨海洋低温溶菌酶抗肿瘤血管形成的机制.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,用不同浓度的海洋低温溶菌酶处理24 h后,利用透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果:海洋低温溶菌酶处理后人脐静脉内皮细胞出现超微结构变化,包括核内染色质浓缩及边集,胞质内细胞器肿胀和空泡化,呈现典型的细胞凋亡改变.这种改变呈剂量依赖性.结论:海洋低温溶菌酶可引起人脐静脉内皮细胞损伤,导致细胞凋亡,从而可能诱发其抗肿瘤血管生成的作用.     

浊点萃取-高效液相色谱法同时测定人尿中的4种抗凝血鼠药

建立了基于浊点萃取同时测定人尿中杀鼠灵、杀鼠醚、溴敌隆和溴鼠灵的反相高效液相色谱法。以非离子表面活性剂TritonX-114为萃取剂,考察了色谱测定条件,优化了浊点萃取参数。5mL尿样中加入0.030gNaCl,30μL甲酸和5%(w/v)TritonX-114400μL,50℃萃取15min,4种目标物的萃取效率能达到85%以上。在选择的色谱条件下,以V(甲醇)∶V(1%甲酸)=90∶10为流动相,待测组分经反相C18色谱柱分离,于306nm波长处用二极管阵列检测器检测,10min可完成分析。4种鼠药中杀鼠醚在0.01～5.0mg/L,其余3种在0.02～5.0mg/L范围内呈良好的线性关系(r≥0.997);尿样的标准加入回收率为71.2%～114.5%;相对标准偏差小于7.0%。对于5mL尿液,富集相用50μL甲醇稀释,萃取浓缩因子可达到28倍。定量检出浓度分别为:杀鼠灵0.016mg/L,杀鼠醚0.001mg/L,溴敌隆0.005mg/L,溴鼠灵0.003mg/L。本法简便快速、灵敏可靠、绿色环保,能满足鼠药中毒应急检测的要求。     

多孔导电膜刻蚀方法的改进及其在毛细管电泳蛋白进样浓缩中的应用

通过控制电压偏置方向,利用电渗流效应使毛细管多孔导电膜的刻蚀成功率得到显著提高。在刻蚀过程中于管中灌注偏碱性溶液,并在毛细管进口端与刻蚀池间施加正电压偏置。当刻蚀达到电通透时,在电渗流的作用下刻蚀自动停止,从而避免了过刻蚀。在含有2%～4%的葡聚糖的0.05mol/LTris-H3PO4(pH2.5)缓冲体系中,利用该多孔膜对溶菌酶和牛血清白蛋白实现了接近理论值的浓缩倍率。对酸碱性不同的蛋白浓缩效率的差别进行了讨论。利用电进样浓缩30min使常规光度检测器(214nm)对两个蛋白样品的检出限减小为1×10-11mol/L。     

高效液相色谱-串联质谱联用测定人血液中的全氟化合物

采用HPLC-ESI-MS/MS联用技术,建立了分析血样中9种全氟化合物(PFCs)的方法.以13C4标记的PFOS (MPFOS)作为内标物.以C18反相柱为分析柱,甲醇、醋酸铵为梯度洗脱淋洗液,9种分析物包括全氟己烷磺酸(PFHxS)、全氟庚酸(PFHpA)、全氟辛酸 (PFOA)、全氟辛烷磺酸(PFOS)、全氟壬酸(PFNA)、全氟癸酸(PFDA)、全氟十一酸(PFUnDA)、全氟十二酸(PFDoDA)和全氟十四酸(PFTA),在15 min内即可达到良好的分离.在血样前处理中,采用MTBE液-液萃取和固相萃取相结合的方法,进一步净化样品以延长色谱柱寿命;比较了4种固相萃取小柱对全氟化合物的萃取性能,最终选定HLB柱(Waters).本研究还讨论了两种C18反相柱Acclaim 120(50 mm×4.6 mm, 3 μm)和Acclaim120 (250 mm×4.6 mm, 5 μm)(Dionex) 对PFCs的分析性能,在本实验条件下,两种色谱柱具有相似的分离性能及检出限,线性范围在0.1～50 μg/L之间 (r≥0.9957);对于血液样品该方法的检出限在0.03～0.8 μg/L之间.本研究将该方法成功地应用于血样实际样品中全氟化合物的测定,加标回收除PFTA较低外,其它化合物均在74.2%～118.1%之间.     

光谱法研究巯嘌呤与血清白蛋白的相互作用

利用荧光光谱和紫外-可见光谱法研究了巯嘌呤药物与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HAS)分子间的相互结合反应.测得巯嘌呤与BSA、HAS反应的结合平衡常数分别为:2.39×103L/mol、1.28×103L/mol.根据Forster非辐射能量转移理论,求算了给体(BSA和HAS)与受体(巯嘌呤)间的结合距离和能量转移效率.用同步荧光法考察了巯嘌呤对BSA和HAS构象的影响.证实了巯嘌呤药物与牛血清白蛋白和人血清白蛋白的相互结合作用为单一的静态猝灭过程.     

荧光光谱法研究左西孟旦与牛血清白蛋白的结合反应

用荧光光谱法、分光光度法研究了水溶液中左西孟旦与牛血清白蛋白(BSA)的相互结合反应。研究表明:左西孟旦对BSA的内源荧光有较强的猝灭作用且该猝灭作用属于静态荧光猝灭作用。得出了反应的结合常数(KA=1.48×106L/mol)和结合位点数(n=1.14)。根据Frster非辐射能量转移机理,求算了给体(BSA)与受体(左西孟旦)间距离r=2.9 nm和能量转移效率E=0.33。     

In Vitro and In Vivo Human Body Odor Analysis Method Using GO:PANI/ZNRs/ZIF−8 Adsorbent Followed by GC/MS

Among various volatile organic compounds (VOCs) emitted from human skin, trans-2-nonenal, benzothiazole, hexyl salicylate, α-hexyl cinnamaldehyde, and isopropyl palmitate are key indicators associated with the degrees of aging. In our study, extraction and determination methods of human body odor are newly developed using headspace-in needle microextraction (HS-INME). The adsorbent was synthesized with graphene oxide:polyaniline/zinc nanorods/zeolitic imidazolate framework-8 (GO:PANI/ZNRs/ZIF−8). Then, a wire coated with the adsorbent was placed into the adsorption kit to be directly exposed to human skin as in vivo sampling and inserted into the needle so that it was able to be desorbed at the GC injector. The adsorption kit was made in-house with a 3D printer. For the in vitro method, the wire coated with the adsorbent was inserted into the needle and exposed to the headspace of the vial. When a cotton T-shirt containing body odor was transferred to a vial, the headspace of the vial was saturated with body odor VOCs. After volatile organic compounds were adsorbed in the dynamic mode, the needle was transferred to the injector for analysis of the volatile organic compounds by gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS). The conditions of adsorbent fabrication and extraction for body odor compounds were optimized by response surface methodology (RSM). In conclusion, it was able to synthesize GO:PANI/ZNRs/ZIF−8 at the optimal condition and applicable to both in vivo and in vitro methods for body odor VOCs analysis.     

基于人眼视觉特性的混合滤波算法

为了有效地滤除混合噪声,本文提出了一种基于人眼视觉特性的混合滤波算法。该方法首先采用基于人眼视觉特性的噪声敏感系数作为阈值来确定脉冲噪声点,对检测出脉冲噪声点采用自适应窗口大小的迭代中值滤波进行滤波,而对于含有高斯噪声的像素点则采用一种保护细节的改进的自适应模糊滤波器进行处理。该算法与标准滤波方法及其它改进混合滤波算法相比,具有更好的滤波性能。     

正常人周围神经冷冻复型超微结构观察

本研究利用冷冻复型电镜技术对５例正常人周围神经进行了观察：（１）有髓神经纤维髓鞘以同心圆形式包裹轴索，后者位于中央呈圆柱样。（２）雪旺细胞核膜劈裂面不论ＰＦ面还是ＥＦ面膜蛋白颗粒（ＩＭＰ）均较丰富，核孔数量较多，说明该细胞代谢功能较旺盛；另外其胞膜表面ＩＭＰ呈簇状分布，推断在正常情况下该区域物质代谢较活跃或雪旺细胞具有分泌功能；再者，髓鞘板层与一般生物膜不同，其劈裂面不论是ＰＦ面还是ＥＦ面均罕见ＩＭＰ，推测此为神经冲动呈跳跃式传导和绝缘性传导的物质基础。（３）轴索内亚细胞结构可见微丝、微管，二者除具有支架作用外，还参与轴浆物质运转等许多重要的神经生理活动。（４）沿神经纤维纵向劈裂面可见相邻雪旺细胞膜内陷相贴，形成轴索外系膜。     

改进相关反馈技术在CBVR人体动作识别中的应用研究

针对CBVR人体动作识别问题,提出利用相关反馈技术与其它技术相结合。首先,分析了从视频中提取人类行为并将其表示成特征集的方法;然后研究了各种基于内容的视频检索方法;最后,将这些技术进行组合得到基于相关反馈技术的最优CBVR人体动作识别方法。在三个行为数据库中(包括UCF运动,UCF视频网站和HOHA2)评估了由上述几种技术组合而成的性能,实验结果为开发高效的基于内容的视频检索系统提供了有益的借鉴。