高效液相色谱法同时分析城市河水中的多种抗生素

结合固相萃取（SPE）与高效液相色谱（HPLC）分析,建立了一种适用于我国城市水环境中多种抗生素的分析方法,同时分析城市水体中3种磺胺类(磺胺嘧啶、磺胺甲唑和磺胺二甲基嘧啶)、3种喹诺酮类(氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星)、氯霉素以及甲氧苄氨嘧啶等8种抗生素污染物。水样品由稀盐酸调节pH值后经HLB固相萃取小柱萃取,用内标法通过HPLC定量分析上述抗生素污染物。采用Agilent Zorbax Eclipse XRD C18液相色谱柱(150 mm×3.0 mm,3.5 μm),用乙腈-水(含0.1%甲酸)二元流动相进行梯度洗脱,流速为0.25 mL/min,柱温25 ℃。喹诺酮类抗生素使用荧光检测器(FLD)定量,其他抗生素则采用紫外检测器定量。该方法对自来水加标的回收率为80%～120%,对地表水样品加标的回收率为63%～106%,方法的定量检测限为0.030～0.080 μg/L,相对标准偏差小于18%。利用该方法对珠江广州河段的水体进行了分析,检测到磺胺甲唑、氧氟沙星、诺氟沙星及环丙沙星,质量浓度范围为0.197～0.510 μg/L。     

蜂蜜中残留抗生素的填充毛细管液相色谱法检测

采用新型毛细管高效液相色谱法和自行填充的毛细管色谱柱,以四环素、土霉素和金霉素为标准物,对蜂蜜中残留的四环素类抗生素进行了定量分析。方法具有操作简单、灵敏度高、定量准确的优点。在10μg/L至0.4mg/L的质量浓度范围内,土霉素、四环素和金霉素的线性相关系数分别为rOTC=0.99695,rTC=0.99778和rCTC=0.98836。毛细管高效液相色谱法可用于抗生素类物质的高灵敏度测定。     

UPLC-MS/MS法对动物源性食品中12种大环内酯类抗生素残留的测定

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定动物源性食品中12种大环内酯类抗生素(林可霉素、阿奇霉素、螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、红霉素、泰乐霉素、吉他霉素、罗红霉素、克拉霉素、麦迪霉素、交沙霉素)的方法.样品均质后,用乙腈提取,正己烷净化,无水硫酸钠脱水.乙腈提取液减压浓缩后,氮气流吹干,甲醇溶解定容;采用UPLC-MS/MS电喷雾多反应监测模式检测,基质匹配标准曲线定量.实验结果表明,12种大环内酯化合物在5 ～100 μg/kg范围内线性关系良好,检出限均为5.0 μg/kg,定量下限为10 μg/kg.5种空白基质样品中,10、25、50 μg/kg加标水平的平均回收率为60% ～117%,相对标准偏差均在20%以内.该方法灵敏度高、重复性好,各项技术指标均满足国内外相关法规要求,可用于动物源性食品中12种大环内酯类抗生素残留的检测.     

交联壳聚糖微球及其接枝精氨酸树脂吸附性质的比较研究

研究了交联壳聚糖接枝精氨酸阴离子吸附树脂及交联壳聚糖微球吸附L-谷氨酸、β-内酰胺抗生素(青霉素G及氨苄青霉素)、尿素及Zn2+的动态吸附时间进程曲线及吸附容量。实验结果表明,交联壳聚糖接枝精氨酸阴离子吸附树脂对L-谷氨酸、青霉素G、氨苄青霉素、尿素及Zn2+的动态吸附平衡时间分别为120min、60min、75min、90min及50min,比交联壳聚糖微球分别缩短15min、15min、45min、45min、30min;对L-谷氨酸、青霉素G、氨苄青霉素、尿素及Zn2+的动态吸附容量分别是214.95mg/g干树脂、78.56mg/g干树脂、67.91mg/g干树脂、530mg/g干树脂及85.01mg/g干树脂,分别比交联壳聚糖微球提高了2.35倍、2.26倍、2.41倍、3.64倍和2.37倍。     

伊瑞霉素键合手性毛细管整体柱的制备与对映体分离

以具有22个不同种类手性中心的新型大环抗生素伊瑞霉素为手性选择器,基于环氧基团高反应活性的特征,将伊瑞霉素用一步法键合到甲基丙烯酸酯整体柱表面制备伊瑞霉素键合手性毛细管整体柱。通过对制备条件进行优化,证实该制备方法可在较宽的pH范围(6.0～9.0)内进行,方法简单易行,反应条件温和。应用制备的手性毛细管整体柱在毛细管电色谱模式下,对5种手性氨基酸对映体和手性药物罗格列酮对映体进行拆分,均得到了基线分离,说明伊瑞霉素手性固定相具有较强的手性拆分能力。在优化的色谱条件下,6种对映体的分析时间均小于4 min,分析速度快。通过对有机调节剂、缓冲液pH值和缓冲盐浓度等分离条件进行系统考察,初步探讨了该手性毛细管整体柱对不同溶质的手性识别机理。     

革兰氏阴性菌WaaP蛋白的表达与纯化对比研究

采用基因重组方法构建来源于大肠杆菌和铜绿假单胞菌的waa P基因的克隆,利用多种感受态细胞表达出带有不同纯化标签的可溶性Waa P蛋白,并利用亲合层析和凝胶过滤层析对可溶性Waa P蛋白进行纯化,用SDS-PAGE进行检测。对比大肠杆菌和铜绿假单胞菌中Waa P的表达和纯化结果,为蛋白结晶选取能够得到大量稳定和高纯度Waa P蛋白的表达纯化方法,并用该方法,使用硒代甲硫氨酸培养基表达出硒代甲硫氨酸标记的Waa P,为蛋白结构解析时相位的确定提供依据。     

超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱快速筛查与确证猪尿中74种抗生素及其他化合物

采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap)建立了猪尿中74种抗生素及其他化合物的快速筛查与确证方法。猪尿样品经高速离心并稀释后,以Agilent SB C_(18)色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8μm)分离,0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱。结合精确分子质量数、保留时间和二级特征碎片离子对目标化合物进行筛查与确证。74种目标药物在各自的浓度范围内呈良好线性(r~20.99),检出限(LOD)为10 ng/mL,在检出限加标浓度下,回收率集中在55.8%～120%,相对标准偏差(RSD)为1.3%～21%。该方法简便、快速、灵敏、准确,适用于猪尿中多种抗生素及其他化合物的定性确证,有利于掌握养殖业用药情况。     

超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道肼高分辨质谱快速筛查鱼类样品中的多肽抗生素

建立了超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道肼高分辨质谱快速筛查水产品鱼类样品中三种多肽类物质的分析方法。样品用1%甲酸化乙腈-水(体积比7∶3)提取,无需净化,直接用C18色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.9μm)分离,用0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,电喷雾电离正离子模式,以SIM-dd-MS²模式扫描,以提取的保留时间和一级母离子精确质量数实现对样品的快速筛查。三种多肽类物质在相应的浓度范围内线性关系良好,R²均大于0.995,定量限(LOD)为10.0μg/kg,平均回收率为61.3%～113.9%,相对标准偏差(RSD)为2.1%～14.3%。方法快速简单易操作,数据可靠,可用于鱼类样品的快速定性筛查和定量分析。     

浙江地区抗生素残留的环境分布特征及来源分析

近年来在天然水体、土壤、动植物及其排泄物中都检测到了抗生素的存在,抗生素在环境中的残留已经引起广泛关注。本文调研和梳理了2011~2019年间针对浙江地区各种环境介质中抗生素残留状况的相关研究工作,对浙江地区废水、地表水、地下水、土壤和养殖畜禽粪便等环境介质中抗生素残留的主要种类、污染水平和分布特征进行了分析总结,并对抗生素残留的可能来源进行了分析。结果显示,浙江地区环境中抗生素残留的主要种类为四环素类、磺胺类、氟喹诺酮和氯霉素类。杭州、金华、嘉兴等地的畜禽养殖废水中检测出较高浓度抗生素,最高至994 μg·L^-1;畜禽粪便中达到了66.62 mg·kg^-1,为浙江地区环境中抗生素污染的主要来源之一。制药废水中的抗生素浓度更是达到了5.7 mg·L^-1,这些废水虽然经过污水处理厂处理,但在部分处理过的废水中仍能检出抗生素,浓度最高达88 μg·L^-1,并被直接排入天然水体。水产养殖区域中残留的抗生素也会不经处理直接进入地表水中,导致地表水污染,浙江地表水中抗生素浓度最高为508.7 ng·L^-1,但是大部分流域小于100 ng·L^-1。迄今为止,尚未在千岛湖、丽水石塘水库、衢州江山碗窑水库和东西苕溪等饮用水水源地中检测到抗生素,但舟山地区饮用水源中抗生素浓度达到了55 ng·L^-1。虽然地表水中抗生素残留水平相对较低,由于这些水体用于水产养殖、畜禽饮水及农田灌溉,使得环境中的抗生素流入畜禽及农作物中,最终可能导致食品污染。因此,未来工作中需要对浙江各地区进行抗生素环境残留的全面、持续调查,结合浙江地区地域特征及经济发展特色,加强环境中抗生素迁移转化规律的研究,并及时开展抗生素环境污染对生态系统和人体健康效应的研究。     

几种单环Cis-β-内酰胺类抗生素的反相色谱保留行为

众所周知,抗生素是临床上重要的化学治疗剂,但很多细菌对目前临床应用的青霉素类抗生素显示出耐药性,其主要原因是细菌产生的β-内酰胺酶对抗生素有钝化作用。p-(3-酰胺基-4-取代苯基-2-吖