铈诱导东北红豆杉凋亡细胞蛋白质的双向凝胶电泳分析

应用蛋白质双向凝胶电泳方法，研究了Ce^4 诱导悬浮培养红豆杉细胞凋亡过程中蛋白质的表达，分析了凋亡细胞与正常细胞的蛋白质组差异。发现在Ce^4 诱导4d后的凋亡样品中有13个新的蛋白质点出现，而在对照组细胞样品中未检测到，此外，还发现凋亡细胞中有一些蛋白质的含量明显高于对照组。表明Ce^4 诱导的红豆杉细胞凋亡过程中有新蛋白质的合成及原有某些蛋白质量的改变。说明Ce^4 诱导了某些功能蛋白的表达，红豆杉细胞凋亡的发生可能与这些新蛋白质的合成有关。     

探讨维甲酸诱导小鼠肝癌细胞凋亡血清微量元素的变化

为探讨维甲酸诱导小鼠肝癌细胞凋亡的血清微量元素的变化,收集30例实验组BALBC小鼠血清标品,应用等离子体发射光谱仪测定了se、zn、cu、Fe、Ca、Mg含量。结果表明,血清微量元素含量测定,维甲酸组Zn、Mg含量低于对照组,se、cu、Fe、ca含量和对照组比差异无显著性（P〉0．05）。提示维甲酸诱导小鼠肝细胞凋亡,血清微量元素含量变化不大与肝癌发生、靠展无相关件．     

抗肿瘤双特异免疫导向治疗制剂CAtin的表达及活性分析

结合生物信息学方法与已知癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen, CEA)特异性单链抗体(Single chain Fv fragment, scFv)核苷酸序列, 经分子设计和密码子优化后, 通过化学方法合成CEA二硫键稳定性单链抗体(Disulfide stabilized single chain Fv fragments, scdsFv)基因片段. 将凋亡素基因(Apoptin)通过一段柔性连接肽(Linker)连接在CEA scdsFv基因下游, 并克隆入大肠杆菌表达载体质粒pET28a, 转化BL21感受态菌后经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导, 表达融合蛋白CAtin. SDS-PAGE和Western-Blot分析表明, 目的蛋白得到良好表达, 经条件优化后表达量最高可达44.1 mg/L. 融合蛋白经分步洗涤法和谷胱甘肽对表达的目的蛋白进行初步纯化和复性后, 利用人肝癌细胞(HCC)对所制备融合蛋白进行亲和力测定、细胞结合活性测定和特异性细胞杀伤活性分析. 结果显示, 所制备融合蛋白不仅能够有效地与上述肿瘤细胞结合, 并对其具有明显的杀伤活性, 表明成功制备了具有特异性识别和特异性杀伤活性的双特异抗肿瘤免疫导向制剂.     

AFM研究蝙蝠葛碱对daudi细胞毒性的影响

利用原子力显微镜、CCK-8实验和流式细胞术研究了蝙蝠葛碱(dauricine)对B细胞淋巴瘤daudi细胞的细胞毒性。蝙蝠葛碱能显著抑制daudi细胞的增殖。CCK-8实验表明,细胞存活率与蝙蝠葛碱浓度存在时间依赖和剂量依赖关系。经10～50μmol/L的蝙蝠葛碱作用24 h后,daudi细胞存活率从(89.8±4.3)%降至(11.2±3.2)%;48 h后,存活率从(68.9±2.6)%降至(2.5±0.5)%。流式细胞术表明蝙蝠葛碱处理dau-di细胞24 h后,凋亡率从5.2%增至28.2%(60μmol/L)。AFM数据显示对照组细胞呈圆形,表面较光滑。经蝙蝠葛碱处理后,daudi细胞坍塌,超微结构显示细胞表面粗糙、凹凸不平。此外,经不同浓度蝙蝠葛碱作用的daudi细胞,其线粒体膜电位随着药物浓度的加大而降低。蝙蝠葛碱能显著抑制daudi细胞生长增殖。     

Tetraarsenic Tetrasulfide Induced Colon Cancer ls174t Cells Apoptosis

To explore the functional mechanism of tetraarsenic tetrasulfide(As4S4)against the growth and proliferation of colon cancer cells ls174t,MTT method was used to observe the functions of tetraarsenic tetrasulfide for the inhibition of cells ls174t in vitro.Transmission electron microscope was used to observe cell morphologies.FCM assay was performed to measure the change of cell cycle.RT-PCR method was used to detect the expressions of bcl-2 and bax mRNA.Westernblot method was used to detect the expressions of bcl-2 and bax protein.Tetraarsenic tetrasulfide showed an inhibiting effect on the proliferation of cells ls174t in vitro(P＜0.01).It induces the apoptosis of cells ls174t,which is related to the decrease in the expression of bcl-2 and the increase in the expression of bax.     

呼吸缺陷型酵母菌株的离子束辐射敏感性研究

选取一株由离子束辐照诱变获得的呼吸缺陷型酵母菌株，研究其在不同离子辐照剂量范围的辐射敏感性。结果发现，呼吸缺陷型酵母菌株因其线粒体及线粒体DNA发生突变，在离子束辐照时，在低剂量区域表现出较高辐射敏感性，在高剂量区则表现出对于辐射的抗性。     

金属配合物作为蛋白酶体抑制剂的研究进展

蛋白酶体涉及机体的多种生理功能和许多疾病的发病机制.近年来的研究发现,金属配合物尤其是铜的配合物对肿瘤细胞中蛋白酶体活性有较强的抑制作用并能诱导肿瘤细胞凋亡.本文综述了金属配合物作为蛋白酶体抑制剂及肿瘤细胞凋亡诱导剂的研究进展.     

光动力作用促人肝癌细胞HepG2凋亡及对bax，bcl-2蛋白表达的影响

应用流式细胞仪分析光动力作用后细胞凋亡及免疫组化染色检测凋亡相关蛋白bcl-2蛋白，bax蛋白表达水平．发现血卟啉光动力实验组人肝癌细胞HepG2凋亡率达24．23±1．86％，与对照组相比，差异非常显著（P〈0．01）；光动力作用后凋亡相关蛋白bcl-2表达显著高于对照组（P〈0．05）；实验结果显示血卟啉光动力作用具有诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的生物学效应，而凋亡调控蛋白bcl-2表达水平的降低可能是血叶林光动力作用诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的一个重要机制．     

海胆肠多糖致Bel7402人肝癌细胞凋亡的扫描电镜观察

近年来的研究发现肿瘤的发生与细胞增殖和凋亡之间的平衡失调有关。本研究从海胆肠内提取多糖成分，用扫描电镜观察提取物对体外培养的Bel7402人肝癌细胞的超微结构的影响，为开发新型抗肿瘤药物提供依据。     

信号转导抑制剂对TNF β诱导L929细胞凋亡的研究

本文采用FDA-PI荧光染色,DNA电泳和流式细胞仪等实验手段研究了本实验室自行重组并纯化的人TNF β对L929细胞的细胞毒效应,结果表明TNF β主要是诱导L929细胞以凋亡的形式死亡。实验还采用8种信号转导抑制剂,观察它们对TNF β杀伤L929细胞的影响,以探讨细胞凋亡的信号转导途径。初步研究表明：磷脂酶A2,Ca2+通道、丝氨酸蛋白酶的抑制剂能抑制TNF β对L929细胞的杀伤,而且抑制剂的持续存在能更有效地发挥这一抑制作用;相反地,蛋白激酶C和酪氨酸蛋白激酶的抑制剂可促进凋亡;而环加氧酶、磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂则对细胞凋亡不起作用。