诱导血红素氧合酶-1及雷帕霉素对PDGF诱导的大鼠平滑肌细胞表型转化的抑制作用

目的观察血红素氧合酶-1(HO-1)与雷帕霉素对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的作用。方法原代大鼠VSMCs给予PDGF-BB诱导表型转化。同时给予不同剂量的血红素氧合酶诱导剂氯血红素诱导HO-1的表达,和雷帕霉素共培养24h。结果PDGF-BB20nmol/ml作用原代VSMCs24h后,SM-α-actin与PCNA表达减弱,PCNA表达增强。氯血红素诱导HO-1后可以抑制PDGF-BB诱导的VSMCs表型改变,并且随剂量的增加,抑制强度增加。较低剂量的雷帕霉素可以抑制PDGF诱导的VSMCs表型转化。结论PDGF-BB亚型可以促进原代培养的大鼠VSMCs由收缩表型向合成表型转化,给予氯血红素诱导HO-1表达可以对抗PDGF-BB诱导的大鼠VSMCs表型转化,并呈剂量相关。     

视黄酸合成酶基因Raldh2敲除鼠肢体发育起始的挽救

视黄酸合成酶基因Raldh2敲除鼠胚胎心脏膨大,没有肢体发育的起始.肌细胞增强子基因Mef2C敲除鼠胚胎心脏较小,但肢体的发育起始正常.Raldh2/Mef2C双基因敲除鼠与Raldh2敲除鼠形态相似.Tbx5在Raldh2/Mef2C基因敲除鼠第9天的胚胎表达表明,双基因敲除鼠胚胎没有肢体的发育.这一结果表明Mef2C敲除鼠没有挽救Raldh2敲除鼠肢体发育的起始.     

人体心钠素心肌细胞的免疫电镜及定量研究

本研究采用胶体金免疫电镜技术观察了35例人体心房,心耳心肌细胞中的心钠素颗粒,并定量分析了不同年令人体心房肌中心钠素颗粒数量的变化。免疫电镜观察显示三种不同形态的心钠素颗粒均有相似的免疫阳性反应。定量研究结果提示儿童、青壮年心房肌心钠素颗粒的数目较少,而胎儿及老年人,尤其是超高令者的心房肌中常常可检测到较多数量的心钠素颗粒。     

高气道压力机械通气致大鼠膈肌细胞超微结构改变的研究

目的:本实验从微观的角度研究高气道压力机械通气对膈肌细胞超微结构的损伤与功能的影响.方法:将30只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组,给予40cm H2O气道压力机械通气5 min组(HAP-1)、20 min组(HAP-2)及对照组.HAP-1及HAP-2组设置50次/min的机械通气频率,完全抑制了膈肌的电活动.实验组与对照组大鼠的膈肌标本进行电镜超微结构观察.结果:HAP-1组实验大鼠少数膈肌细胞显示核膜轻度凹陷,染色体边集;肌原纤维结构改变不明显,个别线粒体呈髓样变.HAP-2组实验大鼠膈肌细胞显示凋亡早期超微结构改变.肌细胞核固缩、形态不规则、核膜凹陷显著,有的皱缩呈锯齿状,核膜下染色质浓缩、边集.肌原纤维肿胀,z线模糊,结构紊乱,兼有局灶性肌丝断裂和溶解,肌纤维间线粒体空泡化.两组大鼠膈肌神经肌连接超微结构大致正常,仅HAP-2组透明突触小泡有所增加.结论:20 min的高气道压力机械通气可以导致大鼠膈肌细胞凋亡,它可能是膈肌收缩功能下降的重要原因.     

Salubrinal保护心肌细胞内质网应激凋亡的实验研究

目的探讨Salubrinal对衣霉素诱导的乳鼠原代心肌细胞凋亡的保护作用及机制。方法采用消化贴壁法获得乳鼠原代心肌细胞,分别给与不同浓度的Salubrinal(10μmol、20μmol、40μmol)预处理,30min后加入TM(5μg/ml),继续培养24h后通过流式细胞和TUNEL检测方法对乳鼠心肌细胞凋亡进行检测;Western印迹法检测凋亡过程中Caspase-12蛋白酶的表达变化。结果经Salubrinal预处理的细胞同单独使用衣霉素相比,细胞凋亡率和细胞凋亡指数均显著下降;Caspase-12表达明显减少。结论Salubrinal对衣霉素诱导的乳鼠原代心肌细胞凋亡具有保护作用,其机制可能是通过抑制内质网应激凋亡通路。     

细胞增殖状态对激光诱导血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的：探讨细胞的增殖状态及细胞周期分布对体外培养的血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡的激光诱导率的影响。方法：组织贴块法体外培养VSMC,饥饿法同步法,VSMC在不同的刺激因子作用之后,亚甲基噻唑蓝比色（MTT）法检测细胞增殖状况,流式细胞仪（FCM）检测细胞的周期发布,510．6nm的铜蒸汽激光照射后,TUNEL染色法记数细胞凋亡率。结果：生长活跃,处于增殖期的细胞,在激光的诱导下易发生凋亡;相反,增殖相对不活跃、处于静止期的细胞,凋亡诱导率较低。结论：经不同生长因子刺激后VSMC的增殖状态及细胞的周期分布不同,对激光的凋亡诱导率产生影响。     

心房肌细胞钙通道和钾通道免疫电镜定位研究

离子通道是一种跨膜蛋白 ,迄今为止 ,尚未见关于离子通道的细胞内分布情况的报道。心脏Ｌ 型电压依赖钙通道 (Ｌ ｔｙｐｅｖｏｌｔａｇｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｃａｌｃｉｕｍｃｈａｎｎｅｌ,ＬＶＤＣＣ)和电压依赖ＫＶ4 3钾通道 (ｖｏｌｔａｇｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｏｔａｓｓｉｕｍｃｈａｎｎｅｌ,ＶＤＫＶ4 3)对心肌细胞动作电位有重要作用。通过ＬＶＤＣＣ产生的Ｌ型钙电流 (ＩＣａＬ)和ＶＤＫＶ4 3产生的短暂外向钾电流 (Ｉｔｏ1)分别对动作电位 2相平台期和复极Ｉ相的维持起决定作用。本文应用免疫电镜方法对进行体外循环术的先天性…     

神经电信号和运动肌细胞之间的桥梁——烟碱型乙酰胆碱受体通道(NAChR)

 烟碱型乙酰胆碱受体(NAChR)是通过打开或关闭一个跨膜生成孔的门来控制神经和肌肉细胞间的电信号。这个通道是由两部分组成的:直接面向通道的内环(innerring)是由5个α螺旋互相缠绕形成的,它们成放射状地排列,这样就为离子形成了一个逐渐变窄的通道。这个通道的外环(outerring)是由15个α螺旋互相缠绕形成的,它们的作用是将内环和外部的油脂层隔离开来。通道的“门”是一个位于细胞膜中间的一个压缩的疏水性区域(constrictinghydrophobicgirdle),它是靠内环相邻的螺旋之间的微弱作用力而形成。