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<正>PTPMEG1 is an intracellular protein tyrosine phosphatase(PTP),which contains FERM and PDZ domains. This study focuses our attention on the expression,purification and characterization of catalytic domain of PTPMEG1(△MEG1) and preparation of its polyclonal antibody.A cDNA fragment encoding△MEG1 protein(amino acid residues 643—926) was amplified by PCR and then cloned into the pT7-7 vector.Both soluble and insoluble recombinant△MEG1 proteins were observed after induction by IPTG.Soluble△MEG1 was purified via two chromatographic steps,and the purified enzyme was characterized.With para-nitrophenylphosphate(pNPP) as a substrate,△MEG1 exhibited typical enzymatic characteristics of classic PTPs and classical Michaelis-Menten kinetics.Insoluble△MEG1,which was mainly distributed in the inclusion body of E.coli cells extracts,was purified by preparative electrophoresis gel for the preparation of the polyclonal antibody.A rabbit was immunized with△MEG1 purified by preparative electrophoresis to generate anti-△MEG1 antibody.Anti-serum was collected on 28th day after initial injection and purified via affinity chromatography.The purified polyconal antibody displayed a satisfactory titer and sensitivity. 相似文献
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腰椎间盘纤维环膨隆症站立位动态脊髓造影的临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:在MRI或CT检查的腰腿痛病人中,通过站立位动态脊髓造影,了解椎间盘纤维环在腰椎中立、过屈、过伸三位置下的变化,并探讨其临床意义,筛选出具有手术指征的LDH病人,决定手术方式.方法:对86例LDH患者,行站立或平卧中立、过屈、过伸脊髓造影,对比分析两组动态变化.鉴别出LDB,选择性行有限椎板减压,或保留其椎间盘.结果:脊髓造影侧位像“拿破仑帽”状影,站立三位置均明显大于平卧位,差异非常显著(P<0.01),在动态变化中平卧位者改成由中至屈曲位时,硬膜囊受压影较站立位者明显缩小,差异非常显著(P<0.01),站立由中至伸时,压迫影较平卧位增大,差异显著(P<0.05).其中28例,行有限椎板切除或保留其椎间盘,效果优良.结论:站立位会使LDB加重、临床症状加重,因站立过伸位使腰椎管狭窄病人症状加重.而平卧位造影时因重力负荷减轻,(拿破仑帽)影像不明显或消失,而出现假阴性. 相似文献
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