薄层色谱法测定青藤碱血浆浓度

青藤碱(Sinomenine)系从防已科植物毛青藤(Sinomenium acutum Var.cinereum(Diels) Rehd)中提取的生物碱。经药理实验证实,其具有镇痛、消炎、降压、抗心律失常等作用。为了进行药物动力学研究以及临床药物监测,本实验研究了应用薄层快速分离展开血浆中青藤碱,以锯齿形和直线形薄层扫描法测定其浓度。该方法简便,快速,灵敏度较高。     

高效液相色谱法测定吲哚美辛控释胶囊的血药浓度和生物利用度

采用ＯＤＳ柱,甲醇－稀磷酸溶液（７６２４）为流动相,２６０ｎｍ为检测波长,建立了测定血浆中吲哚美辛浓度的高效液相色谱法,并测定了吲哚美辛控释胶囊炎痛康的血药浓度。结果表明,血浆中吲哚美辛浓度在０．１２５～５．０ｍｇ／Ｌ范围内线性关系良好（ｒ＝０．９９９６）,检测限６２．５μｇ／Ｌ（Ｓ／Ｎ＝３１）,平均回收率为１００．４％,日内和日间ＲＳＤ均小于５％。１１位受试者单剂量口服炎痛康后的相对生物利用度为１０２．３８％。     

高效液相色谱法测定血浆中表阿霉素浓度

报道了高效液相色谱法测定血浆中表阿霉素浓度的实验方法。采用μＢｏｎｄａｐａｋＣ＿（１８）色谱柱,正磷酸、甲醇、乙腈、异丙醇为流动相。荧光检测器检测,激发波长为４５０ｎｍ,发射波长为５３０ｎｍ。血浆经离心后,取血清,用甲醇沉淀蛋白。方法的平均相对回收率为９９．４％±４．６％,日内和日间平均ＲＳＤ小于５％和６％。最低检测限为３ｎｇ。本方法快速、准确,灵敏度高。     

流动注射在线固相萃取预富集毛细管区带电泳测定血浆中的伪麻黄碱

研究了流动注射在线固相萃取与毛细管区带电泳联用系统(FI-SPE-CZE)应用于测定血浆中痕量盐酸伪麻黄碱的方法。通过脱线和在线试样净化、优化CZE分离条件等措施消除了血浆中共存组份的干扰;通过增加固相萃取的进样量、加大场放大电动进样量和柱上堆积的力度等,提高了联用系统的灵敏度。血浆试样沉淀蛋白后可连续进入FI-SPE-CZE系统进行自动的浓缩、分离与分析,检测限为12ng/mL,分析速度达10次/h.应用本方法成功地测定了志愿者口服正常剂量盐酸伪麻黄碱后的血药浓度,并试用于药物动力学的研究。     

冠状毛细血管长度非线性变化及渗透作用下的毛细血管血液流动

建立冠状毛细血管内血流的血液动力学模型,研究毛细血管长度沿轴向的非线性变化及冠状毛细血管与周围组织的渗透和物质交换对血液流动的影响。考虑单根长弹性并具有通透性的冠状毛细血管,毛细血管长度非线性变化,毛细血管内血液为粘性不可压缩牛顿流体,跨壁滤过遵循Starling定律,血浆胶体渗透压和血浆蛋白浓度成线性关系。建立血管半径的无量纲方程,数值求解不同生理参数情况下,左心室壁不同层中毛细血管沿长度平均的无量纲半径和不同层毛细血管的平均流量。结果显示,冠状毛细血管与周围组织的渗透和物质交换及毛细血管长度沿轴向的非线性变化对平均无量纲半径和平均出口流量几乎没有影响;而对弹性模量较小的毛细血管,则对心脏收缩期时的平均进口流量有不同程度的影响。     

稳定同位素稀释离子色谱-三重四极杆质谱法测定血浆和尿液中的氟乙酸

建立了离子色谱-三重四极杆质谱测定血浆和尿液样品中氟乙酸（MFA）的方法。血浆样品经高氯酸超声提取,尿液样品经高氯酸酸化,血浆和尿液提取液在pH 0.5~1.0条件下用叔丁基甲醚（MTBE）萃取,萃取液经氮吹浓缩后溶于0.1%（v/v）氨水溶液。以Ionpac AS 19型阴离子色谱柱为分析柱,在线自动产生的氢氧化钾作为淋洗液进行梯度分离,柱流出液经阴离子抑制器抑制后进入质谱系统。采用电喷雾电离源,在负离子、多离子监测（MRM）模式下检测,¹³C₂-氟乙酸稳定同位素内标法定量。血浆和尿液样品中氟乙酸的平均加标回收率为96.2%~120%,相对标准偏差为1.1%~13.1%（n=6）,方法的检出限（S/N=3）分别为0.03 μg/L和0.1 μg/L。该法简单、灵敏、准确,可用于生物样品中氟乙酸的检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中盐酸氨溴索及其制剂的生物等效性评价

采用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）技术,建立了快速、简单、灵敏的测定人血浆中盐酸氨溴索含量的方法,并用于盐酸氨溴索人体生物等效性预试验研究。取50 μL血浆样品,采用蛋白沉淀法处理,以盐酸氨溴索-d5为内标。采用Waters XBridge BEH C18色谱柱（50 mm×2.1 mm,2.5 μm）,以0.1%（v/v）甲酸水-含0.1%（v/v）甲酸的甲醇为流动相,在0.4 mL/min流速下进行梯度洗脱。采用电喷雾电离（ESI）源以正离子模式进行MRM检测。结果显示,盐酸氨溴索在2~400 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数（r）为0.998,准确度为97.1%~108.7%,精密度为1.0%~5.6%。将该方法用于6名健康受试者口服盐酸氨溴索受试制剂和参比制剂30 mg后血药浓度的测定,结果显示二者相对生物利用度为（102.3±14.8）%,血药浓度-时间曲线下面积（AUC_0-t、AUC_0-∞）和最大血药浓度（C_max）的90%置信区间均在80.0%~125.0%范围内,两种制剂生物等效。     

Solid-phase Synthesis of Acyl-plasminogen-Streptokinase Activator Composite（APSAC） and Its Thrombolytic Properties

The dialysis method has been traditionally used for the conversion of native human plasminogen (Glu-Hpg) to lys-plasminogen(Lys-Hpg). Here is described a solid-phase synthesis method for the preparation of an acyl-plasminogen-streptokinase activator complex(APSAC) from Lys-Hpg, streptokinase (SK) and chemical modification agent(4-amidinophenyl-4‘-aminobenzoate hydrochloride) with the L-lysine-Sepharose 4B Column as the carrier. The new method significantly increases the product yield and purity over the liquidphase methods. The APSAC prepared with the new method exhibits a significant thrombolytic effect with a long half-life of about 8.8 h in rabbits.     

Crystal Structures of Urokinase-type Plasminogen Activator in Complex with 4-（Aminomethyl） Benzoic Acid and 4-（Aminomethyl-phenyl）-methanol

Urokinase-type plasminogen activator （uPA） is a trypsin-like serine protease and plays a key role in several biological processes, including tissue remodeling, cell migration, and matrix degradation. The inhibitors of uPA have been shown to prevent the spread of metastasis and tumor growth, and accordingly uPA is widely recognized as a target for the treatment of cancer. In this work, we report the crystal structures of the complexes of uPA with its inhibitors： 4- （aminomethyl）-benzoic acid （AMBA） and 4-（aminomethyl-phenyl）-methanol （AMPM）, both at a resolution of 2.35 А. The inhibitory constants of these two inhibitors were measured by a chromogenic competitive assay, and it was found that AMBA is a better inhibitor for uPA （Ki = 2.68 mM） than AMPM （Ki = 13.99 mM）. The structural study shows that the binding mode of inhibitor AMBA on uPA is similar to that of AMPM on uPA, both docked into the active site S1 pocket of uPA. Structural details of these complexes are provided to explain the difference of inhibitory constants.     

高血压患者血浆中游离氨基酸的柱前衍生HPLC法测定

以2,4-二硝基氯苯为衍生化试剂,建立了反相高效液相色谱法测定人血浆中22种游离氨基酸的方法.衍生化产物用Kromasil C18柱分离,梯度洗脱,紫外检测波长为360 nm.在所研究的浓度范围内,22种氨基酸的线性关系良好(r>0.99),日内精密度(RSD)为1.7% ～4.1%,日间精密度(RSD)为2.8% ～6.9%,方法回收率为90% ～106%.用建立的方法对高血压病人和正常人血浆中的游离氨基酸进行测定,并将测定结果进行主成分分析及判别分析,结果表明高血压病人与正常人血浆中的氨基酸存在显著差异,分类判别率为94.4%.