小分子荧光探针在蛋白质标记与成像分析中的应用

小分子荧光探针由于其体积小、合成简单等特点在蛋白质成像技术中扮演着越来越重要的角色。此领域的研究融合了生物化学、有机合成、分析化学等相关学科,是当今化学发展的一个重要方向,有着广阔的前景。目前,能够专一性地与目标蛋白质(POI)结合的小分子探针较少,设计和合成方法的缺乏已经成为制约该领域进一步发展的瓶颈。本文概括地介绍了近年来出现的一些小分子荧光探针,关注它们在活体标记中的应用。     

胺甲基化聚丙烯酰胺阳离子交换剂的合成与表征

采用反相悬浮聚合法合成20%交联度的聚丙烯酰膀(Polyacrylamide,PAM)树脂,经过Mannich反应修饰(nacrylamide:nformaldehyde:ndimethylamine=1:1:1.2)得到高亲水性弱碱性阴离子交换剂氨甲基化聚丙烯酰胺(Aminomcthylated Polyacrylamide,APAM).随着修饰反应时间的增加,得到的APAM的弱碱交换量与蛋白质吸附量增加,在选定的实验条件下,确定Mannich反应时间以1h为宜,所得树脂对牛血清白蛋白吸附量达到433mg/g,过长的反应时间导致树脂结构有一定程度的破坏.树脂对蛋白质的吸附等温线符合Langmuir方程,实际分离牛血清白蛋白和血红蛋白效果较好,柱体积不随洗脱液中盐浓度的增加而变化.     

微流控芯片技术在蛋白质分析中的应用进展

近年来,微流控芯片技术取得了显著的发展。随着微电子及微机械等制作技术的不断进步,高通量、高效、快速、低成本的微流控分析芯片在蛋白质和多肽分析方面获得了令人瞩目的成果。本文主要介绍了微流控芯片在蛋白质组学分析研究的应用和发展。引用文献52篇。     

211At标记蛋白质或多肽的方法研究

α核素211At具有良好的辐射生物学性质,以对肿瘤细胞具有高亲和性的单克隆抗体或多肽类配体为载体则是实现211At肿瘤靶向治疗的最理想方式之一。本文介绍了211At标记蛋白质或多肽的方法的现状与进展,对存在的一些问题及今后的发展方向进行了讨论。     

一种基于遗传算法的肽/蛋白质结合模式虚拟筛选建模技术

“合理”QSAR模型是指在了解配体与受体相互作用模式的前提下建立定量构效关系, 这样避开了传统做法仅仅依靠样本集分子自身信息来构建预测模型的诸多弊端. 本文将此思想应用于肽/蛋白质亲和活性的研究当中, 借助于遗传算法作为虚拟受体结合靶点及相互作用模式的筛选手段得到了一种新的建模技术: 肽/蛋白质结合模式遗传虚拟筛选(genetic virtual screening of combinative mode for peptide/protein, GVSC). 该法成功解决了“合理”QSAR研究中的难题, 即大多数情况下受体结构未知而难以了解配基与之发生的结合方式. 分别使用58个血管紧张素转化酶, 18个Camel抗体蛋白cAb-lys3双位点突变残基对GVSC加以检验, 其结果表明GVSC能够较好地阐明配基与受体之间的作用机理, 并能得到优于传统方法的QSAR模型.     

Mammalian-like Purple Acid Phosphatases in Plants

Introduction Purpleacidphosphatases(PAPs)compriseofa familyofbinuclearmetal containinghydrolases,some membersofwhichhavebeenisolatedandcharacterized fromanimal,plantandfungalsources[1].PAPsnoton lycatalyzethehydrolysesofawiderangeofphosphate estersandanhy…     

光谱法研究蛋白质与表面活性剂的相互作用

结合本课题组的工作, 较系统地总结了近年来有关紫外吸收光谱、荧光光谱、圆二色光谱和电子自旋共振光谱技术在蛋白质-表面活性剂混合体系研究中的应用. 大量研究表明, 借助于光谱技术不仅可以研究蛋白质结构与功能的关系, 而且可以探讨蛋白质与表面活性剂的作用机理.     

考马斯亮蓝-SLS体系共振瑞利散射法测定蛋白质

研究了考马斯亮蓝与蛋白质的结合反应。在十二烷基磺酸钠的存在下,于pH1.6的酸性介质中,蛋白质与考马斯亮蓝可形成复合物,使最大波长351 nm的共振光散射光谱得到加强,据此,用于蛋白质的定量测定。十二烷基磺酸钠的加入,可使灵敏度提高3.2倍。本法测定牛血清白蛋白、人血清白蛋白、卵蛋白、γ-球蛋白的线性范围分别为:0.04~0.8、0.03~0.5、0.04~1.00、.06~1.2 mg/L,检出限分别为:6.3、4.7、7.9、9.2μg/L。已用于人血清、牛奶、豆浆、尿液中蛋白质的测定,所得结果与经典的考马斯亮蓝法一致。