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ZHU Zhi-cheng SUN Mei ZHANG Xing-yi LIU Ke-xiang SHI Dong-lei LI Jin-dong SU Ji-quan XU Yue-chi FU Xue-qi 《高等学校化学研究》2007,23(3):289-296
This study objective was to express and characterize the catalytic domain of the human T cell protein tyrosine phosphatase(△TC-PTP) and to study immunohistochemically the expression of △TC-PTP in human non-small cell lung cancers. △TC-PTP gene was PCR amplified with the cDNA of human TC-PTP as template, and cloned into the pT7 expression vector. The recombinant pT7-△TC-PTP was expressed in E. coli Rosetta ( DE3 ) host cells and puri- fied. The enzymatic characteristics of △TC-PTP including enzyme activity and kinetics assay were measured. The antiserum was prepared by immunizing rabbit with the purified recombinant △TC-PTP. Rabbit polyclonal antibody against △TC-PTP was purified by PVDF immobilized antigen affinity chromatography. Immunohistochemical staining of lung cancer tissues was performed with antibody against △TC-PTP protein. △TC-PTP gene was correctly cloned, expressed, and purified. The recombinant △TC-PTP had a highly catalytic activity of PTPase. Squamous cell lung carcinoma showed a significantly higher expression rate of △TC-PTP (76. 92%, 10/13 ) than adenocarcinoma (57.14%, 4/7) and normal lung tissue(20%, 1/5 ). This study represents the first demonstration that △TC-PTP is highly expressed in human squamous cell lung carcinomas. In addition, this study provides an important basis for further studying the biological function of TC-PTP and its relationship with lung carcinomas and other diseases. 相似文献
14.
以交联聚乙烯醇为载体的离子交换剂对蛋白质的分离性能 总被引:2,自引:0,他引:2
本文对阴离子交换剂DEA—PVT常压液相离子交换色谱分离蛋白质的性能、分离条件进行了探讨。结果表明其对蛋白质的分离性能良好,容易洗脱。与载体交联聚乙烯醇相比,DEA—PVT对蛋白质的非特异性吸附明显降低。 相似文献
15.
以作者开发的从蛋白质结合部位推导出其界面所具有的疏水性质和氢键性质的计算程序PP_SITE为基础,利用蛋白质结构数据库(PDB),对蛋白质-蛋白质相互作用界面进行了统计分析.从PDB中挑出非冗余的链间相互作用对,计算出这个数据集中所有链间界面的疏水和氢键相互作用特征.对得到的界面特征进行统计分析,寻找能够明显聚类的界面特征.结果表明,界面大小、氢键和疏水相互作用在界面所占比例以及疏水相互作用的集中程度可以作为分类的依据. 相似文献
16.
用共振光散射技术研究蛋白质与丽春红2R的相互作用 总被引:5,自引:0,他引:5
在pH3.50的Britton-Robinson缓冲溶液中,丽春红2R与蛋白质发生结合反应,使最大波长为352.5nm的共振散射光谱得到加强。据此建立了利用丽春红2R作探针,用共振散射光谱技术测定蛋白质的新方法。散射光强度与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HAS)和免疫球蛋白(IgG)的浓度在0.25~17.5μg/mL范围内成正比。方法的稳定性好,快速、简便,绝大多数氨基酸、金属离子均不产生干扰,用于人血清样品中蛋白质的测定,获得了满意的结果,加标回收率为93.4%~100.1%。 相似文献
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质谱在肽和蛋白质序列分析中的应用 总被引:7,自引:0,他引:7
了解肽和蛋白质的序列对理解其功能具有重要意义,测定其序列也是当前生命 科学研究中的重要内容之一,质谱作为高灵敏度的测定分子结构的仪器,其高灵敏 度、广泛的适用性及快速性等特性使它具有很大潜力发展成为辅助传统测序方法的 新方法,并得到了广泛的关注。从离子活化方法(包括碰撞诱导解离CID、源后裂 解PSD、源内裂解ISD等)、衍生化作用以及氨基酸残基消除方式(高能活化产生亚 稳离子、化学降解、酶降解)等多个角度介绍了利用质谱分析多肽和蛋白质序列的 方法,并对其发展前景作出展望。 相似文献
19.
芯片国管电泳及其在生命科学中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
芯片毛细管电泳(Chip-CE)技术在近几年已取得了很大的进展。本文着重介绍芯片毛细管区带电泳技术,对等电聚焦、等速电泳、自由溶液电泳及胶束电动色谱等其它芯片电泳模式也有所提及。讨论了芯片材料和制作技术、芯片的几何形状、样品的操作和衍生、检测及芯片毛细管电泳技术的应用,特别是在核酸和蛋白质的分离分析中的进展。 相似文献
20.
大孔球形纤维素离子交换剂的制备及其对蛋白质的吸附富集性… 总被引:7,自引:1,他引:7
以精制棉为原料,经过漂白→碱化→老化→黄原酸酯化制得粘胶液,按一定比例加以CaCO3粉末,混合均匀后分散在氯苯中90℃下加热固化3h,在HCl-NaCl-CaCl2混合溶液中除去CaCO3后,制得大孔球形纤维素。研究制球的各种影响因素。 相似文献