热诱导β晶状体蛋白去折叠及寡聚体解聚过程的脉冲升温时间分辨红外光谱

通过变温傅里叶变换红外光谱和脉冲升温时间分辨红外光谱,系统地研究了β晶状体蛋白不同二级结构的热稳定性,以及热诱导β晶状体蛋白去折叠的动力学过程．结果表明,β晶状体蛋白N端的β反平行折叠热稳定性最低(转变的中点温度为36.0±2.1 oC),该结构的破坏导致了一种富含无规卷曲结构的β晶状体蛋白中间体形成, 认为该中间体可能由β晶状体寡聚体解聚后形成的单体,单体形成的中点温度为40.4±7 πC．β晶状体蛋白全局去折叠引发蛋白变性聚集的转变的中点温度为72.4±0.2 oC．脉冲升温时间分辨红外光谱进一步揭示出β晶状体蛋白的热诱导去折叠开始于N端的β反平行折叠结构,该结构去折叠所需时间约为50 ns     

锌诱导对香菇菌丝生长速度及金属硫蛋白含量影响

金属硫蛋白(Metallothionein)对镉、铜和锌等多种元素有高度亲和性,具有重金属解毒的功能。选取食用菌中的香菇(Mushrooms)作为代表菌种,在固体培养基中添加了不同浓度梯度的元素锌盐溶液,每天测定不同锌浓度作用下香菇的生长速度;培养结束,测定菌丝体内锌含量和金属硫蛋白含量。结果表明,培养环境中锌浓度越高,菌丝体内富锌量越多。通过一系列元素吸附和金属硫蛋白含量相关性分析,发现元素锌含量与香菇中金属硫蛋白含量呈正相关性,锌含量越高,金属硫蛋白含量也越高。实验结果为香菇及其他食用菌富集元素锌机理提供参考,还为食用菌安全问题的解决提供一定参考依据。     

家蝇幼虫抗菌肽MDL-1的构象分析

用红外光谱、圆二色谱和荧光光谱研究家蝇幼虫抗菌肽MDL-1的结构特征及其在不同条件下的构象变化. 红外光谱检测结果显示抗菌肽MDL-1结构中含有螺旋、无规卷曲、折叠构象的吸收特征; 圆二色谱显示抗菌肽MDL-1结构相对比较稳定, 抗菌肽在不同浓度溶液中的构象发生改变; 荧光光谱法研究发现家蝇幼虫抗菌肽MDL-1在280 nm波长的激发光下, 荧光光谱为Tyr残基和Trp残基共同提供, 而且Trp残基不是位于抗菌肽分子的表面, 而是位于分子的内部, 该研究结果为进一步探讨抗菌肽的抗菌机理奠定了基础.     

桑叶多糖SJB的结构分析和蛋白酪氨酸磷酸酯酶PTP1B抑制活性

通过DEAE-纤维素和凝胶过滤柱色谱对桑叶碱提粗多糖进行分级分离, 获得均一多糖SJB, 进行结构鉴定. 采用蛋白酪氨酸磷酸酯酶PTP1B体外模型对SJB进行降血糖活性测定. 结果表明: SJB的相对分子质量为5.4×104, 由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸组成的酸性杂多糖; 主链由1,2-、1,2,4-连接的鼠李糖和1,4-、1,3,4-连接的半乳糖醛酸组成; 侧链包括末端、1,5-、1,3,5-连接的阿拉伯糖; 末端、1,4-连接的葡萄糖以及末端、1,3-、1,4-、1,6-连接的半乳糖, 主要通过鼠李糖的O4位和半乳糖醛酸的O3位与主链相连. 该多糖为首次从桑叶中获得的酸性杂多糖. 20 μg/mL SJB对PTP1B的抑制率为31.7%.     

聚偏二氯乙烯构象分布的理论研究

在MP2/6-311++G**水平下, 对2,2,4,4-四氯戊烷与2,2,4,4,6,6-六氯庚烷旋转异构体构象进行几何优化和能量计算. 结果表明, 对于2,2,4,4-四氯戊烷, 采用gauche-gauche排列的旋转异构体的能量较低; 2,2,4,4,6,6-六氯庚烷旋转异构体中, 采用trans-gauche-trans-gauche排列的构象能量较低. 反之, 完全采用trans-trans排列的旋转异构体构象能量较高, 不稳定. 通过比较模型分子不同旋转异构体构象的能量差值可以得到一级和二级特征的相互作用能差, 进而计算统计权重参数. 在此基础上, 应用计算得到的模型分子的几何构型与统计权重参数, 分别构建针对—CH2—和—CCl2—中心的聚偏二氯乙烯的6态旋转异构态模型. 通过旋转异构态模型可以计算聚偏二氯乙烯分子中各种构象的分布.     

漫谈绿色荧光蛋白——2008年度诺贝尔化学奖

2008年诺贝尔化学奖授予了O．Shimomura,M．Chalfie和R．Y．Tsien3位科学家,彰显他们为绿色荧光蛋白（GFP）的发现、表达及应用作出的突出贡献。本文简要介绍了GFP的基本结构、发光机制及其发现和发展的过程。     

快速MRI联合母体血清标志物诊断孕中期胎儿CNS发育畸形

本文探讨快速磁共振成像(MRI)联合母体血清标志物检测诊断孕中期胎儿中枢神经系统(CNS)发育畸形的应用价值。选取112例孕中期疑似胎儿CNS发育畸形的孕妇作为研究对象,均进行MRI检查和母体血清标志物检测。结果显示,胎儿CNS发育畸形发生率为18.75%;快速MRI检出19例胎儿CNS畸形,其中真阳性18例;胎儿CNS畸形母体孕中期血清甲胎蛋白(AFP)、游离β-人绒毛膜促性腺激素(Free-β-hCG)水平高于未畸形母体,妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、游离雌三醇(uE3)水平低于未畸形母体(P<0.05);母体血清AFP、Free-β-hCG、PAPP-A、uE3水平均为孕中期胎儿CNS畸形独立影响因素(P<0.05);快速MRI联合母体血清AFP、Free-β-hCG、PAPP-A、uE3水平诊断孕中期胎儿CNS发育畸形的曲线下面积(AUC)为0.961。快速MRI联合母体血清标志物检测在孕中期胎儿CNS发育畸形诊断中具有较高的应用价值。     

一种蛋白质阵列芯片新技术的研究

将微印刷技术与银增强法相结合,建立了一种蛋白质阵列芯片制备与检测的新方法。通过定量分析证明了蛋白质可以被均匀地转印至固相载体表面,采用银增强法对蛋白质的直接法检测和夹心法检测的最低检测量分别可达0.33和0.13 fmol。此新方法应用于蛋白质阵列上具有灵活、灵敏及成本低廉等特点。     

介孔氧化铁材料快速、高效富集分离磷酸化肽段和蛋白的新方法研究

以0.1μmol/Lβ-casein磷酸化蛋白酶解液为对象,利用在酸性条件下对PO43-能够特异性吸附的氧化铁材料为新载体,对介孔氧化铁材料富集分离磷酸化肽段的孵育液酸含量、孵育液有机溶剂含量和洗脱液选择的条件进行了优化,结果表明:室温条件下,在含有0.1%乙酸和30%乙腈的孵育液中孵育5min后,经1mol/LNH3.H2O溶液的洗脱,介孔氧化铁可有效地将磷酸化肽段从蛋白酶解液中富集分离。本方法也可以选择性地提取α-casein磷酸化蛋白,实现了简单、快速、高效的磷酸化肽段和蛋白的富集分离。同时,通过MALDI-TOF串级质谱分析,成功地完成了在优化条件下分离出的磷酸化肽段磷酸位点的鉴定。     

金属硫蛋白的分离与纯化

金属硫蛋白(MT)是一类低分子量、高巯基含量,能大量结合重金属离子的蛋白质.本文从诱导剂的注射次数、家兔体重以及不同诱导剂等因素对家兔体内金属硫蛋白含量的影响进行了分析.金属硫蛋白氨基酸组分分析结果与文献报道一致.利用精品生产工艺对金属硫蛋白粗品进行纯化,结果令人满意.