壬基酚异构体对小鼠Sertoli TM4细胞内黏着连接、雄激素结合蛋白和抑制素B的影响

研究了壬基酚异构体[4-(1-乙基-1-甲基-己基)酚](4-NP65)对小鼠睾丸Sertoli TM4细胞黏着连接相关分子表达和分泌雄激素结合蛋白(ABP),抑制素B(Inhibin B)的作用。不同浓度4-NP65(0、0.1、1、10、20、40μmol·L-1)作用于TM4细胞24h,MTT法测定细胞存活率,RT-PCR测定TM4细胞波形蛋白(Vimentin),N-钙黏着蛋白(N-cadherin),黏着斑蛋白(Vinculin)mRNA的表达情况;Elisa法测定细胞上清液中ABP和Inhibin B的含量。结果4-NP65在低剂量(0.1、1、10、20μmol·L-1)对细胞存活率无显著影响,在高剂量(40、80、100μmol·L-1)能显著降低TM4细胞存活率(P<0.01);4-NP65剂量依赖性增加Vimentin mRNA表达,降低Vinculin、N-cadherin mRNA的表达;4-NP65呈剂量依赖性降低ABP的分泌量,与对照组比较,在20、40μmol·L-1处理组有显著差异(P<0.05),而Inhibin B的含量在20、40μmol·L-1 4-NP65处理组有显著降低(P<0.05)。4-NP65对小鼠Sertoli TM4细胞具有生殖毒性作用,黏着连接是其作用的可能靶点之一,4-NP65可能通过影响TM4细胞黏着连接相关分子的表达和TM4细胞分泌ABP、Inhibin B引起雄性生殖系统损伤。     

早期自然流产患者绒毛滋养细胞中CXCL14的表达及其临床意义

目的研究正常早孕妇女和早期自然流产妇女之间绒毛滋养细胞中CXCL14的表达情况,探讨其表达的临床意义。方法选取33例正常早孕妇女绒毛组织和37例早期自然流产妇女绒毛组织,HE染色后光镜下观察两组绒毛组织的形态学变化;采用免疫组化SP三步法检测两组绒毛滋养细胞中CXCL14的表达。结果HE染色下两组绒毛滋养细胞形态对比,见早期自然流产组绒毛组织滋养细胞层变薄、滋养细胞变性甚至坏死、滋养细胞嗜酸性增强、绒毛间质水肿坏死;免疫组化示正常早孕组绒毛滋养细胞CXCL14的表达量为0.07±0.05,自然流产组绒毛滋养细胞CXCL14的表达量为0.12±0.02,两组比较差异具有统计学意义（P＜0.01）;首次流产组CXCL14表达量0.116±0.067,多次流产组CXCL14表达量0.086±0.127,两组比较差异无统计学意义（P＞0.01）。结论早期自然流产绒毛滋养细胞中CXCL14表达升高,可能在自然流产的发生中起着重要作用。     

Tregs细胞CCR4、CCR6表达异常在类风湿关节炎患者发病时的意义

目的探讨Tregs细胞CCR4、CCR6受体在类风湿关节炎（RA）患者发病时的意义。方法选择45例活动期RA患者（RA组）及30例健康体检者（对照组）,从外周血分离单个核细胞（PBMC）,采用流式细胞分析法检测RA患者外周血中CD4+Foxp3+细胞（Tregs）占比及其该类细胞上CCR4、CCR6的表达水平,并对Tregs上CCR4、CCR6水平与RA临床活动指标进行相关性分析。结果与对照组比较,RA活动期患者外周血Tregs细胞数量明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）;RA活动期患者外周血Tregs细胞表面趋化因子受体CCR4、CCR6表达水平与对照组的差异有统计学意义（P＜0.05）;RA活动期患者外周血Tregs细胞CCR4、CCR6表达水平与DAS28评分呈正相关（P＜0.05）。结论 RA患者外周血中Tregs细胞上趋化因子受体CCR4、CCR6表达增加,可能是Tregs细胞获得定向迁徙至病变关节能力的表现,也是机体炎症反应时反馈性调节的一种现象。     

基于细胞色素C双通道比率型过氧化氢生物传感器测定过氧化氢

制备细胞色素C/巯基丙酸修饰电极(Cyt.C/MPA/Au)和六-(二茂铁)-己硫醇修饰电极(FcHT/Au),采用循环伏安法研究了Cyt.C/MPA/Au电极和FcHT/Au电极的电化学行为。结果表明,在pH 7.0的磷酸盐缓冲溶液中,过氧化氢在Cyt.C/MPA/Au电极的还原峰电流随其含量的增加不断增大,而在FcHT/Au电极上的参比峰电流基本不变,构建了一种双通道比率型过氧化氢生物传感器。采用差分脉冲伏安法测定过氧化氢的含量,过氧化氢在Cyt.C/MPA/Au电极上的还原峰电流与FcHT/Au电极上的参比峰电流比值,与其浓度在20.0～100.0μmol·L~(-1)内呈线性关系,检出限(3S/N)为1.19μmol·L~(-1),方法的回收率在71.4%～79.2%之间。     

用伪同色光谱图像检测色觉正常观察者的锥细胞光谱响应

为了能够快速、准确的检测色觉正常观察者的辨色差异,从而对其红、绿、蓝三通道的锥细胞光谱响应进行研究,设计并制作了由背景层（或和明度层）以及数字层组成的伪同色光谱图像,其中背景层和数字层具有不同的光谱反射曲线,经过照明光源以及人眼锥细胞光谱响应的共同作用,使色觉正常的观察者产生不同的颜色感知差异。实验首先基于不同光谱原色的输出设备,在不同的照明光源下,制作出能够放大观察者差异的近同色异谱色样对。要求用不同颜色匹配函数计算近同色异谱色样对的CIEDE2000色差值,有的色差在人眼辨色阈值之内,有的色差人眼可明显识别。通过优化计算,将放大观察者色觉差异的近同色异谱色样对应用于伪同色光谱图像的数字层和背景层,并利用Epson Stylus Pro7908喷墨打印机和OKI C9600激光打印机分别输出伪同色光谱图像的背景层和数字层。同时组织了72名色觉正常的观察者（包含55名18～25岁的年轻观察者和17名62～74岁的老年观察者）分别在D65和LED-5000K两种光源下,对伪同色光谱图像进行识读检验。识读结果表明,伪同色光谱图像可以较为准确的判定年轻和老年观察者的视网膜锥细胞光谱响应是否老化。同种照明光源下,年轻观察者可以识读出数字的伪同色光谱图像（②/④）老年观察者不能识读,老年观察者可以识读的伪同色光谱图像（①/③）大多年轻观察者不能识读,且55名年轻观察者中有4名观察者的目视结果与老年人相同。另外,年轻观察者的锥细胞光谱响应与CIE1964和CIE2006（age=25 y）颜色匹配函数较为一致,而老年观察者的锥细胞光谱响应与CIE1931和CIE2006（age=75 y）颜色匹配函数更为一致。对比颜色匹配函数的分布,发现老年观察者的锥细胞光谱响应向长波段偏移,同时由于屈光系统光学密度增加导致其锥细胞光谱响应有所降低。     

几个生态因子对不同品系三角褐指藻生长的影响

比较研究了盐度、温度和光照强度等环境因子对不同品系三角褐指藻生长的影响,实验结果表明,不同盐度对3个品系生长有显著的影响(P<0.01),各盐度水平对生长率影响的优劣顺序为5.0、11.6、24.6 37.7 44.2、1.l 50.7.在不同品系中,SS02品系是一株耐低盐不耐高盐的品系,XS03是一株耐高盐不耐低盐的品系,而ZS08对盐度的适应性更广,SS02和ZS08品系生长的最适盐度为1.1～24.6,XS03的最适盐度为5.0～37.7,不同温度对3个品系的影响基本一致,均属低温品系,以15℃最好,其它依次为10℃,20℃,5℃,25℃光照强度对不同品系藻类的生长率和细胞密度影响达极显著(P<0.01),以4000lX和6000lX水平最优,其它依次为2000lx,8000lx,1000lx.     

麻疹病毒(Nepal毒株)H基因的序列测定及其表达

提取麻疹病毒Ｎｅｐａｌ毒株的ＲＮＡ并利用逆转录ＰＣＲ方法特异性地扩增血凝素基因（Ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ）．将Ｈ基因克隆并测定序列，结果表明新毒株的Ｈ基因与标准疫苗毒株Ｅｄｍｏｎｓｔｏｎ之间存在较多重要的基因变异，两者的同源性为９８．１７％．将Ｈ基因克隆到表达载体ｐＣＤ－ＳＲα中并利用电转染法转染ＣＯＳ－７细胞，利用血凝实验检测了Ｈ蛋白的表达及功能     

一个新的调控人类细胞死亡基因的发现

ａｓｙ基因是最近发现的一个凋亡诱发基因［１］,但诱发细胞凋亡的机制仍不清楚为研究ａｓｙ基因诱发凋亡的机制,本文以ＡＳＹ为诱饵蛋白（Ｂａｉｔ）,采用酵母双杂交系统从人肺细胞系（ＷＩ３８）ｃＤＮＡ文库中筛选ＡＳＹ结合蛋白基因从１×１０６个共转化子中,分离鉴定了３个Ｈｉｓ＋ＬａｃＺ＋克隆,其中一个克隆的插入片段与Ｇｅｎｂａｎｋ全序列比较没有发现同源基因,推测为一个新基因,命名为ａｓｙ相互作用蛋白基因ａｓｙｉｐ（ａｓｙｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ）ａｓｙｉｐ基因在人的各种组织中均组成性转…     

丝裂霉素诱导CHO-K1细胞凋亡及对其细胞周期的影响

采用荧光探针染色法，琼脂糖凝胶电泳分析方法．流式细胞仪技术研究丝裂霉素诱导CHO-K1细胞凋亡及对其细胞周期的影响．结果显示，丝裂霉素处理CHO-K1细胞后，细胞核质收缩凝集，核碎裂及出现凋亡小体；琼脂糖电泳呈现典型的DNA梯带；流式细胞仪检测到典型的细胞凋亡峰(亚G1峰)，分别用10，15，20，25mg／L丝裂霉素处理CHO-K1细胞，其细胞凋亡率分别为4．76％，9．20％，14．51％，37．46％，且凋亡率随药物浓度的升高而升高，显示两者的正相关性；作用浓度相同而改变处理时间时．发现细胞凋亡率随处理时间的延长而呈上升趋势；流式细胞仪细胞周期分析，显示随着丝裂霉素浓度提高或作用时间延长，G1-S期细胞百分比降低，G2／M期细胞百分比升高，Ap峰与G1-S期负相关，与G2／M期正相关．     

双核联吡啶钌配合物的合成、表征及细胞毒性

以联苯胺、4,4′-二氨基二苯醚和8-羟基喹啉为原料,合成了两个偶氮类配体BL1和BL2及由其桥联的与二氯·二联吡啶钌反应生成两个双核钌配合物1和2,通过核磁共振、红外光谱、质谱、元素分析等测试手段进行表征,并对配合物进行了电化学、细胞毒性及细胞周期的研究.结果表明:两个配合物对胶质瘤细胞(U251)均有明显的细胞毒性,半数抑制浓度IC50值分别为7.76和7.69μmol·L-1,配合物2对肺癌细胞(A549)和白血病细胞(K562)的细胞毒性约为配合物1细胞毒性的两倍;桥配体的刚柔性影响了配合物的结构,并因此影响了配合物对A549和K562的细胞毒性;配合物1与U251作用后,细胞周期阻滞在S期,而配合物2与U251作用后,细胞周期阻滞在G0/G1期.